基于环介导等温扩增和CRISPR/Cas系统的转基因玉米和大豆快速准确现场检测

　　摘要： 为应对基于核酸扩增的分子生物学检测转基因粮食方法所面临操作复杂、检测时间长和设备昂贵等挑战，本研究以玉米和大豆为主要研究对象，研发了一种高效快速、无需纯化或稀释的核酸提取方法。同时筛选了高效、特异的转基因标签引物，建立了针对转基因玉米和大豆的转基因快速环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）体系和防污染体系。此外，建立了一种基于规律成簇间隔短回文重复序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeat，CRISPR）/CRISPR相关蛋白（CRISPR-associated protein，Cas）系统的可视化快速检测方法。该检测方法可在45 min内完成转基因检测，对转基因大豆和玉米的代表性转基因成分检测限达0.1%。该方法可实现转基因粮食的快速精准检测，有助于提高粮食监管水平，具有良好的应用前景。