来自 Amesiodendron chinense 的奥莱南皂苷：通过双重抑制 STAT3 和细胞因子实现免疫抑制作用

《Phytochemistry》：Oleanane saponins from Amesiodendron chinense: Dual inhibition of STAT3 and cytokines for immunosuppression

奥兰烷型三萜皂苷的糖苷结构多样性及其免疫抑制活性研究。通过生物活性导向分离结合GNPS分子网络技术，从Sapindaceae植物Amesiodendron chinense中分离出26个新化合物（1-26）及1个已知类似物（27）。其中5、7、16、25具有显著免疫抑制活性，通过STAT3介导的线粒体通路诱导活化T细胞凋亡，并抑制IFN-γ、IL-2、IL-4等关键免疫细胞因子。结构分析表明糖苷基团连接位置（C-3位阿拉伯糖及C-2/C-3位葡萄糖）与NMR化学位移存在显著相关性，建立了基于取代模式的NMR解析预测模型。

　　

张仁超|高文静|吴佩倩|周斌|岳建民

中国科学院上海药物研究所药物研究国家重点实验室民族医药与生物功能分子研究中心，中国上海祖冲之路555号，201203

摘要

通过对Amesiodendron chinense的茎叶进行植物化学分析，利用生物活性导向的分馏技术和全局天然产物社会分子网络（GNPS）技术，分离出了26种未描述的奥莱烷三萜皂苷（amesiodendroside A?Z（1–26））。化合物1?12被归类为二糖，而13?26为三糖，其特征是阿拉伯糖通过糖苷键连接到奥莱烷的C-3位，同时葡萄糖基团连接在阿拉伯糖的C-2和/或C-3位。这些化合物在C-16、C-23和C-28位置具有不同的乙酰化模式和氧化状态变化，其取代模式与典型的¹H/¹³C NMR化学位移之间存在显著相关性。值得注意的是，化合物5、7、16和25在体外对T细胞和B细胞的增殖表现出显著的免疫抑制作用，并讨论了初步的结构-活性关系。此外，化合物7和25通过信号转导子和转录激活因子3（STAT3）介导的线粒体途径诱导活化T细胞凋亡，并强烈抑制关键的免疫调节细胞因子（如IFN-γ、IL-2和IL-4），从而表现出双重免疫抑制效应。

引言

免疫抑制是一种复杂的生物过程，在维持免疫系统的微妙平衡中起着关键作用。免疫抑制剂是重要的临床药物，主要用于治疗自身免疫性疾病和器官移植（Fugger等人，2020年）。环孢素A、雷帕霉素和利妥昔单抗是具有预防器官移植排斥反应效果的代表性天然免疫抑制药物（Parlakpinar和Gunata，2021年；Burke等人，2022年；Zhen等人，2022年；Shao等人，2024年）。然而，尽管这些免疫抑制剂具有令人满意的治疗效果，但它们的临床应用受到副作用的限制，如肝毒性、感染和恶性肿瘤（Szumilas等人，2023年）。这些局限性凸显了开发高效且低毒性的新型免疫抑制剂的迫切需求。

奥莱烷三萜是一类在植物中广泛分布的五环三萜化合物，尤其是在无患子科植物中（Chen等人，2020年；Xu等人，2022年；Wei等人，2021年；Ding等人，2020年），已证明它们具有潜在的免疫抑制活性（Ren等人，2024年；Jiang等人，2024年；Chen等人，2024年；He等人，2020年）。属于无患子科的Amesiodendron chinense（Merr.）可能含有丰富的奥莱烷三萜成分。然而，此前只有一项研究对该植物进行了研究，发现其中含有三种具有弱细胞毒性的黄酮类6-C-糖苷（Ban等人，2020年）。受到A. chinense中免疫抑制性奥莱烷三萜的启发，推测该物种的化学多样性尚未得到充分研究。

结果与讨论

本研究采用生物活性导向的分离策略，并结合GNPS分子网络技术，专门针对具有免疫抑制作用的奥莱烷三萜（图1）。该策略成功分离出了26种未报道的奥莱烷三萜皂苷（1–26）以及一种已知的类似物（27）（图2）。正如预期的那样，这些奥莱烷皂苷对T细胞和B细胞的增殖表现出强烈的免疫抑制作用。本文详细描述了分离过程。

结论

本研究通过综合光谱数据分析、X射线晶体学和化学修饰方法，基于生物活性导向策略和GNPS分子网络技术，分离并鉴定了26种结构新颖的奥莱烷型三萜皂苷。研究发现，取代模式与特征共振信号之间存在密切的相关性，为通过NMR模式快速阐明化合物结构建立了预测模型。

通用实验程序

熔点使用SGM X-4分析仪（上海精密科学仪器有限公司）测量，未进行校正。光学旋转在Autopol VI自动偏振仪上室温下进行，浓度以g/100 mL为单位报告。ECD和UV光谱使用JASCO J-815光谱仪在0.1 cm光程样品池中测量。红外光谱使用Thermo Scientific Nicolet iS5 FT-IR光谱仪记录。核磁共振光谱使用Bruker Avance III 400仪记录。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文研究的财务利益或个人关系。

作者贡献声明

岳建民：撰写、审稿与编辑、监督、项目管理、资金获取。周斌：撰写、审稿与编辑、监督、项目管理、方法学、资金获取。吴佩倩：方法学。高文静：撰写、审稿与编辑、可视化、方法学、数据分析。张仁超：撰写初稿、方法学、实验研究、数据分析、概念构思

数据获取

数据可应要求提供。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文研究的财务利益或个人关系。

致谢

感谢国家重点研发计划“战略性科技创新合作”重点项目（2022YFE0203600）、上海市重大科技项目以及国家自然科学基金（编号：82322064、22494691和82293685）的财政支持。同时感谢中华人民共和国海南大学生物系的黄世曼教授提供植物材料。