《Electronic Journal of Biotechnology》：AKT/p65-dependent upregulation of CD64 by LPS drives pathogenesis and diagnostic potential in sepsis
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本研究针对脓毒症早期诊断标志物匮乏的临床难题，系统探讨了CD64在儿童脓毒症中的诊断价值及分子调控机制。通过200例临床样本验证发现CD64指数（AUC=0.902）显著优于PCT、CRP等传统标志物，并首次揭示LPS通过AKT/p65信号通路促进CD64转录的分子机制，为脓毒症早期诊断和靶向治疗提供了新依据。
当致病微生物入侵人体，免疫系统出现失控性反应时，可能引发脓毒症（sepsis）。这种危及生命的器官功能障碍综合征，已成为全球公共卫生领域的重大挑战。尤其对于儿童患者，脓毒症起病急、进展快，死亡率高达25%，但临床常用的降钙素原（PCT）、C反应蛋白（CRP）等生物标志物在诊断敏感性和特异性方面存在局限。寻找能够实现早期精准诊断的新型标志物，成为改善脓毒症预后的关键突破口。
近日发表于《Electronic Journal of Biotechnology》的一项研究，将目光投向了中性粒细胞表面的CD64分子。这种Fcγ受体I在静息状态下几乎不表达于中性粒细胞，却在细菌感染后数小时内迅速上调，表现出作为早期诊断标志物的独特潜力。徐州医科大学附属徐州儿童医院输血科李林团队通过多维度实验证实：CD64不仅是脓毒症的优越诊断指标，其表达上调更受到AKT/p65信号轴的精密调控。
研究人员首先纳入200例脓毒症患儿和166例健康对照，通过受试者工作特征（ROC）曲线分析发现，CD64指数在截断值0.165时，诊断灵敏度达87.0%，特异性达92.8%，其曲线下面积（AUC=0.902）显著优于PCT（0.776）、CRP（0.834）等传统指标。动态监测还显示，治疗有效后CD64水平显著下降，提示其同时具备疗效评估价值。
为阐明机制，团队采用脂多糖（LPS）刺激中性粒细胞，发现革兰阴性菌（如大肠杆菌）诱导的CD64上调更为显著。通过抑制剂筛选、基因过表达等技术，证实LPS通过激活AKT信号通路促进转录因子p65的核转位。染色质免疫共沉淀（ChIP）实验进一步捕捉到p65与CD64启动子的直接结合，完整揭示了"LPS-AKT-p65-CD64"的转录调控通路。在大鼠脓毒症模型中，AKT抑制剂戊氧茶碱（PTX）有效抑制了CD64表达和p65核转位，为临床干预提供了潜在靶点。
关键技术方法包括：临床队列研究（200例脓毒症患儿/166例健康对照）、流式细胞术检测CD64指数、Western blot分析蛋白表达、核质分离技术追踪p65转位、染色质免疫共沉淀验证转录调控、大鼠LPS脓毒症模型验证。
3.1. CD64在脓毒症诊断和预后中优于其他生物标志物
通过ROC曲线分析显示CD64的诊断效能最佳，其AUC值显著高于PCT、CRP等指标。治疗前后配对样本检测证实CD64水平随病情好转显著下降，具备动态监测价值。
3.2. LPS上调CD64表达
革兰阴性菌（大肠杆菌）比革兰阳性菌（金黄色葡萄球菌）更能有效诱导CD64表达。LPS刺激呈现剂量和时间依赖性上调CD64蛋白水平。
3.3. LPS通过AKT通路诱导CD64表达
AKT特异性抑制剂wortmannin可阻断LPS诱导的CD64上调，而AKT过表达则直接增强CD64表达，证实AKT信号通路的核心作用。
3.4. AKT通过p65上调CD64表达
LPS和AKT过表达均促进p65核转位但不影响其总表达量。p65过表达直接提升CD64转录水平，NF-κB抑制剂PDTC可逆转此效应，ChIP实验证实p65与CD64启动子直接结合。
3.5. CD64在脓毒症中分子机制的体内验证
大鼠脓毒症模型显示LPS可显著提升CD64表达和p65核转位，而PTX干预能有效抑制这一过程，验证了AKT/p65通路在体内的调控作用。
该研究不仅确立了CD64在儿童脓毒症诊断中的优越性能，更首次系统阐明其上游调控机制。CD64检测仅需微量全血（<100 μL），1小时内即可完成，特别适合儿科急诊场景。研究者建议未来可探索CD64与PCT、CRP的联合检测方案，构建多维度诊断模型。值得注意的是，CD64对细菌性感染的特异性高于病毒性感染，这种鉴别能力对临床抗生素合理使用具有重要指导意义。
从转化医学视角，AKT/p65信号轴的发现为脓毒症治疗提供了新思路。针对该通路的抑制剂（如PTX）可能通过调控CD64表达减轻炎症风暴，但需进一步验证其安全性和有效性。随着精准医疗理念的深入，基于CD64动态监测的脓毒症分层管理策略，有望成为改善预后的关键突破点。
