《Mucosal Immunology》：Mucosal IL-36 is a defining feature of severe paediatric bronchiolitis
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本研究针对婴幼儿重症毛细支气管炎的免疫机制展开深入探索。研究人员通过转录组学分析发现，重症患者黏膜中IL-1家族细胞因子IL-36α显著升高，同时伴随干扰素信号通路缺陷。体外实验证实呼吸道上皮细胞在RSV感染时可产生IL-36α，且中性粒细胞可增强其分泌。该研究首次揭示IL-36在呼吸道病毒感染中的关键作用，为靶向治疗提供新思路。
毛细支气管炎是婴幼儿住院最常见的原因，其中呼吸道合胞病毒(RSV)是主要病原体。令人困惑的是，病毒载量与疾病严重程度并不正相关，甚至呈现负相关——这意味着重症患者的免疫反应可能比病毒本身更具破坏性。这种矛盾现象促使科学家们深入探索呼吸道黏膜免疫反应的奥秘。
近期发表在《Mucosal Immunology》的研究通过创新的多组学方法，揭示了重症毛细支气管炎的关键免疫特征。来自英国帝国理工学院国家心肺研究所的团队发现，黏膜IL-36α的异常高表达与干扰素信号缺陷共同构成了重症患者的独特免疫图谱。
研究人员采用的关键技术方法包括：对88例住院婴幼儿（重症40例，中度48例）的鼻咽抽吸物进行NanoString转录组学分析（检测785个免疫相关基因）；利用ELISA检测IL-36 isoforms的蛋白表达；建立原代人鼻上皮细胞(HNEC)空气-液体界面(ALI)三维培养模型，模拟RSV感染过程；并创新性地使用倒置共培养系统研究中性粒细胞与上皮细胞的相互作用。
研究结果：
患者 demographics
研究队列包含88例2岁以下住院患儿，重症组年龄更小、体重更轻、住院时间更长且病毒合并感染率更高。RSV是最常见病原体，在重症组和中度组分别占49%和48%。
Differential gene expression in severe vs moderate all-cause bronchiolitis
转录组分析显示，重症患者有57个基因显著差异表达，其中51个下调基因主要涉及干扰素信号通路（I型、II型、III型IFN信号）和MHC I类抗原呈递。引人注目的是，IL-1家族细胞因子IL36A表达上调最为显著（Log2FC: 5.14），同时IL18也显著升高。因子分析显示IL36A和PSMB8是区分疾病严重度的主要贡献因子。
Significant downregulation of the interferon signalling pathway in severe RSV
在RSV特异性分析中，重症患者的病毒载量虽略低于中度组，但无统计学差异，再次证实病毒载量不是严重度的决定因素。干扰素信号通路相关基因（如CXCL9、CXCL11、IFI6等）显著下调，而IL36A、TMPRSS2等基因持续高表达。
IL-36 is elevated in severe bronchiolitis
蛋白水平验证发现，重症患者IL-36α、IL-36β和IL-36γ浓度均显著高于中度组，其中IL-36α差异最明显。值得注意的是，全血转录组数据显示重症RSV患者IL36A表达反而降低，表明这种变化是黏膜特异性反应。IL-36α水平与住院时间呈正相关，进一步支持其与疾病严重度的关联。
RSV infection of HNEC induces both IFNs and IL-36
体外实验显示，RSV感染的HNEC模型呈现出强烈的干扰素主导的抗病毒反应，同时IL36A和IL36G基因表达上调。然而，在没有中性粒细胞的情况下，IL-36蛋白分泌量极低，提示其分泌需要额外激活信号。
Soluble factors in NPAs induce IL-36
用重症患者鼻咽抽吸物刺激HNEC可诱导IL36G表达，但IL36A反应较弱。单独使用LPS或IL-17A刺激未能重现重症患者的转录特征，表明存在更复杂的调控机制。
Neutrophils amplify IL36A release from RSV infected HNEC cultures
最关键的发现在于：当中性粒细胞与RSV感染的HNEC共培养时，IL-36α分泌量显著增加。特别值得注意的是，中性粒细胞仅需4小时共培养即可显著增强IL-36α分泌，且不影响RSV复制。
讨论与结论：
这项研究首次系统揭示了IL-36在婴幼儿重症毛细支气管炎中的核心地位。重症患者的特征性免疫表现是"干扰素信号缺陷伴IL-36驱动炎症"的双重失衡状态。尤为重要的是，研究发现IL-36的黏膜高表达是局部特异性现象，在全身循环中并不存在，这强调了呼吸道黏膜免疫研究的独特价值。
机制上，研究揭示了上皮细胞-中性粒细胞的交互作用在IL-36分泌中的关键作用。中性粒细胞来源的蛋白酶可能通过切割IL-36前体而激活其生物学功能，形成炎症放大环路。这为理解为何中性粒细胞浸润与疾病严重度相关提供了新视角。
研究的临床意义在于：首先，IL-36可能成为评估疾病严重度的新型生物标志物；其次，针对IL-36/IL-36R通路的治疗策略（如已用于银屑病治疗的IL-36受体拮抗剂）可能为重症毛细支气管炎提供新的治疗选择。此外，研究结果提示调节中性粒细胞-上皮细胞相互作用可能成为干预策略。
未来研究需要进一步阐明IL-36在呼吸道炎症中的具体作用机制，并在更接近婴幼儿生理状态的模型中进行验证。这项研究为理解婴幼儿严重呼吸道感染的免疫病理机制开辟了新视角，也为开发靶向治疗策略奠定了重要基础。
