应用hiPSC-CMs细胞模型比较不同药物对硫利达嗪诱发的acLQTS的逆转作用及机制

　　

摘要: 药物靶向心脏人类ether-à-go-go相关基因(human ether-à-go-go-related gene, hERG) 编码的快速延迟整流钾通道易诱发获得性长QT综合征(acquired long QT syndrome, acLQTS), 使患者发生危及生命的心律失常。抗精神失常药硫利达嗪(thioridazine, THIO) 在临床应用时产生诱发acLQTS的心脏毒性, 如何逆转并探索可能的机制即为本研究的目的。本研究应用人诱导多能干细胞衍生的心肌细胞(human induced pluripotent stem cell derived cardiomyocytes, hiPSC-CMs) 模型, 结合微电极阵列(multi-electrode array, MEA)、高分辨荧光标测技术评价比较了丹参酮ⅡA (tanshinone IIA, TANIIA)、普萘洛尔(propranolol, Prop)、白藜芦醇(resveratrol, Res) 对硫利达嗪引起的动作电位时程(action potential duration, APD)、场电位延长的逆转作用(所有动物实验均按照哈尔滨医科大学动物操作准则进行并得到哈尔滨医科大学伦理委员会的批准, 伦理号-IRB3020622)。结果显示, 丹参酮能够明显逆转硫利达嗪延长的APD₉₀、APD₅₀及场电位, 而普萘洛尔和白藜芦醇两药没有逆转硫利达嗪导致APD及场电位的延长作用。基于以上结果, 本研究进一步探索丹参酮ⅡA发挥逆转作用的机制及靶点。Western blot及全细胞膜片钳检测结果证实, 丹参酮ⅡA对硫利达嗪抑制的hERG蛋白具有明显的拯救作用, 其机制是丹参酮ⅡA通过减弱硫利达嗪造成的hERG蛋白与钙连蛋白(calnexin) 的相互作用, 拯救了硫利达嗪诱发的hERG通道蛋白折叠转运障碍, 同时hERG电流也增加; 此外丹参酮ⅡA明显减少了硫利达嗪所激活的钙电流。综上, 丹参酮ⅡA可以通过上调hERG蛋白、hERG电流及下调钙电流, 最终逆转硫利达嗪诱发的acLQTS, 有望成为临床上治疗acLQTS的有效药物。