二肽基肽酶4探针酶动力学特征评价

　　

摘要: 二肽基肽酶4 (dipeptidyl peptidase 4, DPP4) 是一种广泛存在于人体内的丝氨酸蛋白酶, 能特异性地催化多肽链N末端第2位的氨基酸残基脯氨酸(Pro) 或丙氨酸(Ala) 肽键水解断裂, 从而参与体内多种生物活性多肽的激活、部分或完全失活。本研究通过比较DPP4催化不同探针底物GP-PNA、GP-AMC和GP-BAN的动力学参数, 结合不同探针体系下DPP4与其抑制剂西格列汀/维格列汀的抑制动力学差异性研究, 并借助分子对接技术, 从小分子角度揭示DPP4与不同底物的相互作用机制, 探讨影响DPP4催化底物活性的关键因素。结果表明, DPP4与探针GP-BAN具有最优的结合特性, 其亲和力高于GP-AMC和GP-PNA, 证明探针碳端结构是影响结合的关键因素; 西格列汀对DPP4的抑制活性优于维格列汀, 分子对接结果提示西格列汀特有的卤化作用可能是其增强结合能力的关键因素。本研究可为不同研究目的下的DPP4探针选择提供重要依据, 同时为理性设计和开发高选择性的DPP4配体工具分子并服务于临床的个性化合理用药提供实验数据和研究基础。