术后循环DNA动态监测新启示：NETs介导的III期结肠癌微小残留病检测窗口优化

本文系统评估了III期结肠癌术后8周内循环核DNA（cir-nDNA）动态变化，揭示了中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）是cir-nDNA的重要来源，并挑战了传统术后1月检测窗口的假设，为优化微小残留病（MRD）检测策略提供了新证据。

　　

术后循环DNA动态监测的新范式：NETs介导的III期结肠癌微小残留病检测优化

摘要

循环核DNA（cir-nDNA）检测在可手术III期结肠癌（CC）患者的微小残留病（MRD）评估中展现出显著预后价值。然而，术后cir-nDNA浓度变化及其对MRD检测可靠性的影响尚未明确。本研究通过对67例III期CC患者术后8周内cir-nDNA动态监测，揭示了NETs形成是cir-nDNA的重要来源，并提出了优化MRD检测窗口的新策略。

研究背景

传统组织病理学与影像学检查在MRD识别中存在局限。尽管MRD检测可指导辅助化疗（ACT）决策，但约30%的III期CC患者术后仍复发。基于变异等位基因频率（VAF）的MRD检测灵敏度受总cir-nDNA浓度影响，而术后cir-nDNA动态变化机制尚未阐明。

研究方法

本研究纳入THRuST临床试验中67例III期CC患者，在术后8周内采集血浆样本。采用IntPlex?方法定量cir-nDNA，并通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测NETs标记物髓过氧化物酶（MPO）和中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）。统计分析采用Mann-Whitney检验和Spearman相关性分析。

研究结果

1. 1.
   术后cir-nDNA显著升高：71.7%的患者术后4周内cir-nDNA浓度高于术前水平，51.4%的患者在4-8周内维持升高，部分患者浓度增幅达18倍。
2. 2.
   NETs与cir-nDNA强相关：术后8周内cir-nDNA浓度与MPO、NE呈显著正相关（Spearman相关系数>0.4，p<0.05），证实NETs是cir-nDNA重要来源。
3. 3.
   检测窗口优化：鉴于术后cir-nDNA高变异性和NETs影响，建议MRD检测窗口为术后4-6周，而非传统1个月内。
4. 4.
   VAF检测局限性：高cir-nDNA浓度和NETs干扰导致VAF作为MRD单一指标可靠性不足，需结合绝对突变DNA浓度监测。

讨论与启示

本研究首次系统揭示III期CC患者术后cir-nDNA持续升高现象与NETs形成机制，挑战了“术后1月cir-nDNA显著下降”的传统认知。NETs相关炎症反应是cir-nDNA释放的重要驱动因素，其个体差异导致MRD检测需个性化调整。研究建议采用“总cir-nDNA浓度+绝对突变DNA水平+NETs标记物”的整合监测策略，提升MRD检测准确性。

临床意义

1. 1.
   优化MRD检测时机：术后4-6周为较稳定检测窗口
2. 2.
   改进检测指标：用绝对突变浓度替代VAF比值
3. 3.
   纳入炎症监控：MPO/NE作为cir-nDNA质量控指标

研究局限与展望

本研究样本量（N=67）限制了对复发/不良事件的预后分析，未来需扩大队列验证NETs形成个体差异机制。此外，cir-nDNA片段组学与甲基化分析可进一步揭示NETs来源DNA特征，为精准MRD检测提供新维度。