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本研究旨在评估miRNA-93和223在无药物治疗及口服避孕药 treated PCOS患者及健康对照组外周血单核细胞中的表达差异，以确定其作为生物标志物的潜力。结果显示，miRNA-93在PCOS患者中显著升高，且metformin治疗可降低其表达，而OCP治疗无显著影响。结论表明miRNA-93在Kashmiri人群中有望用于PCOS诊断及治疗监测。
伊拉姆·阿沙克·卡瓦（Iram Ashaq Kawa）| 库德西亚·法蒂玛（Qudsia Fatima）| 阿克巴尔·马苏德（Akbar Masood）| 肖纳兹·艾哈迈德·米尔（Shahnaz Ahmad Mir）| 伊尔凡·米尔（Irfan Mir）| 萨伊卡·曼祖尔（Saika Manzoor）| 福齐娅·拉希德（Fouzia Rashid）
印度查谟和克什米尔地区斯利那加（Srinagar）克什米尔大学临床生物化学系
摘要
目的
多囊卵巢综合征（PCOS）是最常见的内分泌疾病，其诊断常常存在挑战，治疗计划也不够完善。本研究旨在评估未接受药物治疗的PCOS患者、接受药物治疗的PCOS患者以及健康对照组中miRNA-93和miRNA-223的差异表达，以探讨它们作为监测治疗效果生物标志物的潜力。
方法
通过定量实时PCR技术检测研究对象外周血单核细胞（PBMCs）中miRNA-93和miRNA-223的表达情况。同时分析了所有研究对象的临床、人体测量学、激素和代谢参数，并进行了比较。进一步研究了miRNAs与这些参数之间的相关性。
结果
与健康对照组相比，PCOS女性的miRNA-93和miRNA-223表达水平显著升高（p = 0.004；p = 0.0057）。接受口服避孕药（OCP）治疗的PCOS女性的miRNA-93和miRNA-223表达水平与未接受药物治疗的PCOS女性相当（p = 0.662；p = 0.151）。然而，在接受二甲双胍治疗的PCOS女性中，miRNA-93和miRNA-223的表达水平显著降低（p = 0.001；p = 0.013）。未接受药物治疗的PCOS女性中，miRNA-93和miRNA-223的接收者操作特征曲线下面积（AUC）分别为0.79和0.69；而接受OCP治疗的PCOS女性中，这些指标的AUC分别为0.51和0.59；接受二甲双胍治疗的PCOS女性中，这些指标的AUC分别为0.77和0.70。
结论
在克什米尔人群中，miRNA-93在PBMCs中的表达水平比miRNA-223更能准确、敏感地区分PCOS患者和健康对照组。因此，我们建议将miRNA-93作为监测PCOS女性对二甲双胍治疗反应的生物标志物。
引言
多囊卵巢综合征（PCOS）是育龄女性中最常见的内分泌疾病，其全球患病率在6%至20%之间，具体取决于用于定义该疾病的诊断标准（Azziz, 2018）。PCOS患者因多种症状而面临长期健康问题，包括雄激素过多、排卵功能障碍、多囊卵巢、不孕以及妊娠并发症等。此外，这些患者还常常伴有肥胖、胰岛素抵抗、高胰岛素血症和血脂异常等代谢异常，这增加了他们患2型糖尿病、心血管疾病和妇科癌症的风险（Jeelani等人，2017）。目前尚无药物可以根治PCOS，但可以通过口服避孕药（OCPs）、胰岛素增敏剂和抗雄激素等干预措施来缓解症状。然而，这些治疗方法并不能显著改善疾病的长期预后。PCOS的病理生理机制仍不明确，据信它是遗传、表观遗传和环境因素相互作用的结果。近年来，microRNA（miRNAs）作为疾病生物标志物受到了广泛关注，标志着科学上的重大进展。miRNAs是一类小型非编码RNA，通过抑制翻译或降解目标mRNA在转录后水平调节基因表达，使其成为疾病诊断和监测的理想候选者。已有研究探讨了miRNAs在癌症（Esquela-Kerscher和Slack, 2006）、胰岛素抵抗（Heneghan等人，2010）、糖尿病（Osmai等人，2016）、心血管疾病（Xu等人，2012）、子宫内膜异位症（Wei等人，2015）等多种疾病中的作用。相关研究分析了血液（Murri等人，2013）、血清（Long等人，2014）、卵巢（Zhang等人，2014；Sirotkin等人，2010；Roth等人，2014）和卵泡液（Roth等人，2014）中的miRNAs在PCOS病理生理中的作用，重点关注卵巢周期调节（Roth等人，2014）、卵巢功能异常和卵泡发育（Zhang等人，2014；Sirotkin等人，2010）、胰岛素抵抗和高胰岛素血症（Zhang等人，2014；Trajkovski等人，2011；Chen等人，2013）以及不孕症的发病机制（McCallie等人，2010）。需要考虑常规PCOS治疗是否会影响循环中的miRNAs水平，因为miRNAs可能在临床环境中作为PCOS和2型糖尿病的生物标志物。miRNAs已在肿瘤学和2型糖尿病研究中作为预后标志物使用（Willeit等人，2017；Ghai等人，2019；Jaeger等人，2018）。我们对PCOS相关的miRNAs了解仍然有限，进一步研究对于揭示这一复杂疾病的分子机制至关重要。
鉴于胰岛素抵抗在PCOS发病中的核心作用，以及GLUT4（葡萄糖转运蛋白4型）作为胰岛素抵抗的新表型特征，以及miRNAs作为潜在的生物标志物的优势，我们研究了未接受药物治疗的PCOS女性和健康对照组中GLUT4靶向miRNA-93/miRNA-223的表达情况，以确定它们在两者之间的差异。同时评估了包括二甲双胍和OCPs在内的药物对GLUT4靶向miRNA-93/miRNA-223表达模式的影响，以判断药物的治疗效果是否反映在miRNAs的变化上，从而可作为监测治疗效果的生物标志物。
材料与方法
本研究在临床生物化学系进行，并获得了伦理委员会的批准。研究对象包括未接受治疗的PCOS患者以及接受不同药物治疗6个月的患者，样本来自GMC内分泌科。健康对照组来自临床生物化学系组织的健康营地。未进行正式的样本量功效分析。每组参与者人数为25人。
结果
本研究共纳入25名未接受药物治疗的PCOS患者、25名接受OCP治疗6个月的PCOS患者、25名接受二甲双胍治疗6个月的PCOS患者以及25名健康对照组，以检测miRNA-93和miRNA-223的表达情况。表1总结了各组患者的临床、人体测量学、激素和代谢参数的差异。
讨论
PCOS在全球范围内呈上升趋势，已成为重要的公共卫生问题。PCOS患者常出现月经不规律、多毛症、痤疮、脱发和不孕等症状，同时还伴有胰岛素抵抗、高胰岛素血症、2型糖尿病和血脂异常等代谢紊乱。PCOS的代谢影响主要与胰岛素抵抗有关。
结论
据我们所知，这是首次研究PCOS女性PBMCs中miRNA-93和miRNA-223的表达情况。本研究显示，PCOS女性的miRNA-93和miRNA-223表达与健康女性存在差异，miRNA-93具有作为PCOS诊断标志物的潜力。此外，还研究了OCP和二甲双胍等药物治疗对miRNA水平的影响。OCP治疗未改变miRNA的表达水平，而二甲双胍治疗则改变了miRNA的表达。
缩写
- BMI
- 体质指数
- CDKN1A
- 周期依赖性激酶抑制剂1A
- GLUT 4
- 葡萄糖转运蛋白4型
- HA
- 雄激素过多
- HGF
- 肝生长因子
- HOMA-IR稳态模型评估胰岛素抵抗指数
- IGF-1胰岛素样生长因子1
- miRNAs
microRNAs - NGF
- 神经生长因子
- OCPs
- 口服避孕药
| PBMCs | - 外周血单核细胞
- PCOS
- 多囊卵巢综合征
- PPAR
- 过氧化物酶体增殖受体
- QUICKI
- 定量胰岛素敏感性检测指数
- SHBG
- 类固醇激素结合球蛋白
- USG
- 超声检查
CRediT作者贡献声明
伊拉姆·阿沙克·卡瓦（Iram Ashak Kawa）：撰写——审稿与编辑、初稿撰写、数据验证、方法学设计、研究实施、资金筹集、数据分析、概念构建。库德西亚·法蒂玛（Qudsia Fatima）：软件使用、研究实施。阿克巴尔·马苏德（Akbar Masood）：撰写——审稿与编辑、数据验证、研究监督。肖纳兹·艾哈迈德·米尔（Shahnaz Ahmad Mir）：研究监督、方法学设计。伊尔凡·米尔（Irfan Mir）：撰写——审稿与编辑、软件使用、数据分析。萨伊卡·曼祖尔（Saika Manzoor）：研究实施。福齐娅·拉希德（Fouzia Rashid）：撰写——审稿与编辑。
参与同意
所有参与研究的人员均签署了知情同意书。
伦理批准
本研究获得了斯利那加政府医学院伦理委员会的批准（批准编号：IEC-GMC-Sgr/26）。本研究涉及人类参与者，所有操作均遵循了机构委员会的伦理标准和1964年赫尔辛基宣言。
资助
本研究得到了印度医学研究委员会（ICMR）的支持（项目编号：RBMH/FW/2020/1）。作者I.A.K获得了ICMR的研究资助。
利益冲突声明
作者们没有需要披露的相关财务或非财务利益。
