针对T细胞的融合纳米囊泡能够在体内生成CAR-T细胞，用于类风湿性关节炎的治疗

《Biomarker Research》：T-cell-targeted fusogenic nanovesicles generate CAR-T cells in vivo for rheumatoid arthritis therapy

类风湿关节炎（RA）中致病B细胞驱动炎症，传统CAR-T疗法因体外制造和病毒载体限制难以推广。本研究开发FuNV_CAR纳米系统，通过膜融合直接在体内递送CD19 CAR蛋白至T细胞，实现有效CAR-T生成、B细胞耗竭及关节保护，且安全可行。

　　

摘要

背景

类风湿性关节炎（RA）是一种慢性自身免疫性疾病，其中致病性B细胞会引发持续的炎症和关节损伤。尽管针对CD19的CAR-T细胞疗法能够有效清除B细胞，但传统的体外制造方法和基于病毒载体的基因修饰技术限制了其可扩展性和临床应用。因此，能够在体内高效生成CAR-T细胞的策略可能为持续性的免疫调节提供一种更实用的方法。

方法

我们开发了FuNV_CAR，这是一种针对T细胞的融合纳米囊泡系统，通过膜融合将预先制备的αCD19 CAR蛋白传递给T细胞。我们对FuNV_CAR的大小、成分和融合特异性进行了表征，并在体外评估了其生成CAR-T细胞的能力、持久性及细胞毒性。随后在胶原诱导的关节炎（CIA）小鼠模型中，我们评估了其体内诱导CAR-T细胞的效果、B细胞的清除情况、治疗效果以及组织层面的改变。

结果

FuNV_CAR能够选择性地与CD3? T细胞融合，并在无需基因修饰的情况下在细胞表面表达功能性αCD19 CAR蛋白。FuNV_CAR生成的CAR-T细胞在体外对CD19? B细胞表现出抗原特异性细胞毒性。体内给药后，血液和脾脏中可检测到CAR-T细胞的生成，有效清除了B细胞，降低了自身抗体水平，减轻了关节炎症，并保持了CIA小鼠的软骨和骨骼结构。FuNV_CAR具有良好的耐受性，未出现明显的器官毒性。

结论

这些研究结果表明，FuNV_CAR能够在体内有效生成CAR-T细胞，并对实验性关节炎发挥持续的治疗作用。作为一种机制独特且可扩展的平台，FuNV_CAR为RA及其他由B细胞驱动的自身免疫性疾病提供了基于CAR-T细胞的免疫治疗新途径。