《Advances in Cancer Biology - Metastasis》：Exploring the mechanism of Jianpi Guchang Recipe and Its Compound: Inhibition Liver Metastasis in Colorectal Carcinoma through regulation of the Bile Acid-FXR-FGF19 Axis.
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本研究探索了健脾固肠方（JPGC）通过调节胆汁酸（BA）-法尼醇X受体（FXR）-成纤维细胞生长因子19（FGF19）轴，抑制结直肠癌（CRC）肝转移的机制。研究发现，JPGC能稳定胆汁酸水平，上调FXR表达，抑制炎症反应，从而有效减少小鼠模型的肝转移灶，并抑制结直肠癌细胞的增殖与迁移。这项研究为中医药防治结直肠癌肝转移提供了新的科学依据和治疗靶点。
结直肠癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，也是癌症相关死亡的第三大原因，其中肝转移是患者死亡的主要原因。尽管手术、化疗和免疫疗法在不断进步，但许多患者因肿瘤位置、大小或并发症等因素无法进行手术，且总体预后仍然不佳。在传统医学“扶正祛邪”理念的指导下，中医药在防治恶性肿瘤方面展现出独特优势，但其具体作用机制，尤其是在调节复杂的肿瘤微环境方面，仍需深入探索。近年来，研究发现“种子与土壤”理论在肿瘤转移中扮演关键角色，而连接肠道与肝脏的“肠肝轴”及其核心介质——胆汁酸代谢，在结直肠癌肝转移的发生发展中可能起着重要作用。胆汁酸不仅参与消化，还是重要的信号分子，其代谢紊乱与多种消化道肿瘤密切相关。法尼醇X受体（FXR）作为胆汁酸的关键核受体，在维持胆汁酸稳态和抑制炎症方面发挥着核心作用。那么，以健脾益气、活血解毒为法的中药复方能否通过调节这条轴心来遏制癌症的扩散呢？发表在《Advances in Cancer Biology - Metastasis》上的这项研究，为我们揭示了健脾固肠方（Jianpi Guchang Recipe， JPGC）潜在的作用蓝图。
为了探究JPGC的作用，研究人员综合运用了网络药理学、分子对接、细胞实验和动物模型等多种技术。他们首先通过液质联用技术分析了JPGC冻干粉的化学成分，并利用数据库筛选其潜在作用靶点与结直肠癌肝转移疾病靶点的交集，进行通路富集分析。接着，通过分子对接技术评估了活性成分与核心靶点蛋白的结合能力。在细胞层面，使用人结直肠癌细胞系SW480和小鼠结肠癌细胞系CT26，通过CCK-8、克隆形成和划痕实验评估了JPGC及其化合物对细胞增殖和迁移的影响，并利用RT?qPCR检测了相关基因的表达。在动物层面，研究人员构建了CT26细胞脾脏注射诱导的结直肠癌肝转移小鼠模型，将模型鼠分为对照组、JPGC低剂量组和高剂量组进行干预。通过观察小鼠一般状况、体重、肝脏外观，结合HE染色、免疫组化、ELISA和质谱分析等方法，评估了JPGC对肝转移、血清胆汁酸谱、炎症因子水平以及肠肝组织中FXR、FGF15/19等蛋白表达的影响。
研究结果部分展示了多层次、多角度的证据链：
1. JPGC抑制肠癌肝转移并改善肝转移小鼠的基本状况
实验结果显示，与模型组相比，JPGC干预后的小鼠体重显著增加，活动能力、食欲和皮毛状态均有改善。肉眼观察和肝脏HE染色切片显示，JPGC处理组小鼠肝脏表面的不规则癌结节和转移灶明显减少，肝细胞排列更为有序。此外，JPGC能剂量依赖性地降低模型小鼠血清中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和干扰素-γ（IFN-γ）等促炎因子的水平。
2. 网络药理学分析
通过质谱鉴定，JPGC包含氨基酸及其衍生物、黄酮类、生物碱等多种成分。网络药理学分析找到了JPGC与结直肠癌肝转移的253个交集靶点，KEGG富集分析提示这些靶点显著富集在脂质与动脉粥样硬化、PI3K-AKT、MAPK等信号通路，尤其与胆汁分泌通路密切相关。进一步的分子对接综合评分显示，木蝴蝶素A（Oroxylin A， OA）与胆汁酸代谢关键蛋白FXR、FGF19和CYP7A1具有较好的结合潜力，因此被选为后续研究的活性化合物。
3. JPGC通过降低血清胆汁酸水平激活FXR–FGF15信号轴来抑制CRLM
动物实验发现，模型组小鼠血清总胆汁酸水平显著升高，而JPGC干预能剂量依赖性地降低其水平。免疫组化结果显示，JPGC高剂量组能上调小鼠肠道和肝脏组织中FXR和FGF15/19的蛋白表达。血清胆汁酸质谱分析进一步揭示，模型组小鼠血清中以牛磺胆酸（Taurolcholic acid， TCA）为主的原发性胆汁酸异常积聚，而次级胆汁酸缺失；JPGC干预能剂量依赖性地降低TCA水平，并部分恢复次级胆汁酸。此外，JPGC处理上调了肠癌肝转移模型小鼠肠道组织中上皮标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达，并下调了肝脏组织中与肿瘤侵袭相关的基质金属蛋白酶2（Matrix metalloproteinase-2， MMP-2）的表达。
4. JPGC及其化合物抑制结肠癌细胞的增殖和迁移
细胞实验表明，JPGC能显著抑制SW480结肠癌细胞的活力，其24小时和48小时的半抑制浓度（IC50）约为8.2-8.4 mg/mL。克隆形成实验显示，JPGC及其化合物OA能显著减少细胞集落数量。划痕实验证实，JPGC能有效抑制SW480细胞的迁移能力。
5. JPGC显著上调结肠癌细胞中FXR和FGF19等胆汁酸代谢相关基因和蛋白的表达
RT?qPCR结果显示，JPGC能上调SW480细胞中FXR及其上下游因子FGF19、小异源二聚体伴侣（Small heterodimer partner， SHP）的mRNA表达，并下调胆汁酸合成限速酶胆固醇7α-羟化酶（Cytochrome P450 family 7 subfamily A member 1， CYP7A1）的mRNA表达。化合物OA也能上调FGF19和SHP的表达。
结论与讨论部分对本研究的意义进行了深入阐述。 研究表明，异常的胆汁酸代谢，特别是TCA的积聚，会破坏肠肝轴稳态，激活肝星状细胞，形成促转移的肿瘤微环境，从而促进结直肠癌肝转移。FXR作为胆汁酸的核心核受体，其表达下调或功能受损与肿瘤的侵袭性增强和不良预后相关。本研究发现，健脾固肠方（JPGC）能够调节紊乱的胆汁酸谱，降低血清总胆汁酸及促炎细胞因子水平，并显著上调肠道和肝脏组织中FXR及其下游信号因子FGF15/19的表达。同时，JPGC还能上调上皮标记物E-钙黏蛋白、下调间质标记物MMP-2，提示其可能通过逆转上皮-间质转化（Epithelial-mesenchymal transition， EMT）过程来抑制肿瘤侵袭。在细胞实验中，JPGC及其活性化合物OA直接抑制了结直肠癌细胞的增殖与迁移，并激活了FXR-FGF19信号轴。
综上所述，该研究揭示了一条中药复方防治结直肠癌肝转移的新机制：JPGC通过调节胆汁酸-FXR-FGF19轴，稳定胆汁酸代谢，抑制全身及局部炎症反应，进而影响肿瘤微环境，最终发挥抑制肝转移的作用。这不仅为中医药“扶正固本、解毒散结”治疗肿瘤的现代科学内涵提供了实证，也为针对“肠肝轴”和胆汁酸代谢开发抗肿瘤转移新策略提供了重要的理论依据和候选药物来源。
