Fusicolla acetilerea(属于Nectriaceae科、Hypocreales目)的完整线粒体基因组

《Mitochondrial DNA Part B》:The complete mitochondrial genome of Fusicolla acetilerea (Nectriaceae, Hypocreales)

【字体: 时间:2026年02月17日 来源:Mitochondrial DNA Part B 0.5

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  完成了Fusicolla acetilerea菌株NIBRFGC000505922的线粒体基因组测序,发现其基因组包含14氧化磷酸化基因、2 rRNA基因和25 tRNA基因,其中rnl区域存在内含子。系统发育分析表明该菌属于内群科,与Nectria cinnabarina形成姐妹群,支持线粒体基因组在真菌分类中的应用。

  

摘要

Fusicolla acetilerea(属于Nectriaceae科,子囊菌门)是一种新兴的腐生/植物相关真菌,其基因组资源仍然十分有限。在此,我们报道了F. acetilerea菌株NIBRFGC000505922的完整线粒体基因组,该基因组是通过Illumina NovaSeq测序数据组装而成的。该线粒体基因组为环状结构,长度为29,182 bp,GC含量为28.7%。它编码了一组典型的氧化磷酸化基因、两个rRNA基因、25个tRNA基因以及一个内含子rps3基因。基于14个核心蛋白编码基因的系统发育分析表明,F. acetilereaNectria cinnabarina属于同一类群。这一线粒体基因组为Fusicolla及其相关物种的遗传学研究提供了参考。

引言

Fusicolla属(Bonord. 1851)主要为腐生菌,可在多种有机基质上发现,包括腐烂的枝条(Zeng和Zhuang 引用2023)、土壤(Liu等人 引用2022)、野猪骨头(Lechat和Rossman 引用2017),甚至水中(Jeon等人 引用2020)。除了其生态作用外,多项研究还强调了Fusicolla物种对人类健康(Zhong等人 引用2021)、发酵过程(Zhu和Huang 引用2021)以及农业(Wang等人 引用2020)的重要性。鉴于这些背景,研究Fusicolla的多样性和功能特性具有重要的学术和实际意义。

Fusicolla acetilerea(Tubaki, C. Booth & T. Harada)Gr?fenhan & Seifert 2011(Gr?fenhan等人 引用2011)是该属中的一个显著物种,其特征是产生大型分生孢子,这些分生孢子通常具有三个(偶尔四个)横隔膜,形成于分生孢子梗上,其尺寸为(30–)35–40 × 3.5(–4.0) μm(Tubaki等人 引用1976)。据报道,F. acetilerea存在于土壤、腐烂的木材中,并与某些甲虫(如Ambrosia甲虫)有关(Biedermann等人 引用2013;Ding等人 引用2015)。值得注意的是,来自韩国土壤的F. acetilerea菌株NIBRFGC000505922(=KNUF-20-PBU01)具有降解聚己内酯(PCL)和聚乳酸(PLA)的能力,这表明其在塑料废物处理方面具有潜在应用价值(Lee等人 引用2021)。此外,该物种能够以三丙烯腈和4-N-三甲基氨基-1-丁醇作为唯一的碳源和氮源(Asano等人 引用1981;Fujimitsu等人 引用2016)。

虽然核基因(acl1、ITS、LSU、rpb2tub2)已被广泛用于生态学和系统发育研究(Lee等人 引用2021;Zeng和Zhuang 引用2023),但迄今为止尚未有研究使用Fusicolla物种的线粒体基因组。在本研究中,我们首次组装了F. acetilerea菌株NIBRFGC000505922的线粒体基因组,并分析了其与其它Nectriaceae物种的系统发育关系。

材料与方法

F. acetilerea菌株NIBRFGC000505922是从韩国Boeun地区松树根际土壤中分离得到的(坐标:36.488767 N, 127.7174 E),并在25°C下培养于马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)上()。该菌株已在之前的研究中得到鉴定(Lee等人 引用2021),并保存在韩国仁川的国家生物资源研究所(NIBR,网址:https://species.nibr.go.kr/nibrbiobank,联系人:nibrbiobank@korea.kr),菌株编号为NIBRFGC000505922。基因组DNA使用Wizard? HMW DNA提取试剂盒(Promega,威斯康星州麦迪逊)提取。DNA质量通过Qubit 4.0荧光计(Thermo Fisher Scientific,马萨诸塞州沃尔瑟姆)和TapeStation D1000 ScreenTape系统(Agilent,加利福尼亚州圣克拉拉)进行评估。测序工作在PHYZEN(韩国城南)使用Illumina NovaSeqX平台完成。

图1.Fusicolla acetilerea菌株NIBRFGC000505922在马铃薯葡萄糖琼脂上的菌落形态。比例尺 = 1 cm。照片由Jung-Jae Woo博士提供。

图1. Fusicolla acetilerea菌株NIBRFGC000505922在马铃薯葡萄糖琼脂上的菌落形态。比例尺 = 1 cm。照片由Jung-Jae Woo博士提供。

原始测序数据使用FASTP(Chen等人 引用2018)进行质量过滤,并使用NOVOPlasty v3.6(Dierckxsens等人 引用2017)进行de novo组装。覆盖度分析显示平均深度为2772倍(图S1),方法参考了之前的研究(Ni等人 引用2023)。线粒体基因组的注释使用了MFannot(Lang等人 引用2023)和GeSeq(Tillich等人 引用2017),tRNA基因由tRNAscan-SE v2.0(Lowe和Chan 引用2016)预测,并在Geneious Prime v.2025.2.2中手动校准。环状基因组图使用OGDRAW v 1.3.1(Greiner等人 引用2019)可视化。系统发育分析中,14个保守的蛋白编码基因(PCGs)(atp6atp8atp9cobcox1–3nad1–6nad4L)使用MUSCLE v.5.3(Edgar 引用2022)进行比对,不一致的位置使用Gblock v. 0.91b(Castresana 引用2000)去除。然后,使用ModelTest-NG v0.1.7(Darriba等人 引用2020)测试每个比对的替代模型,所有比对结果合并为一个整体。对于所有标记物,MTZOA被选为最佳拟合模型,cox1(LG)、nad5(DCMUT)和nad6(JTT)除外。作为外群使用了Clonostachys farinosa(Henn.)Rossman 2014(OQ205181)(Oh 引用2024)和Emericellopsis fuci(Summerb., Zuccaro & W. Gams)L.W. Hou, L. Cai & Crous 2023(KR864757)(Konovalova和Logacheva 引用2016),它们属于Hypocreales科的Bionectriaceae族。最大似然系统发育分析使用RAxML v. 8.2.12(Stamatakis 引用2014)进行,共进行了1000次自助法重复(raxmlGUI v2.0 引用2021)。

结果

F. acetilerea的完整线粒体基因组被组装成一个长度为29,182 bp的环状分子,GC含量为28.7%()。该线粒体基因组编码了14个参与氧化磷酸化的标准PCGs,包括三个细胞色素c氧化酶亚基(cox1cox2cox3)、一个apocytochrome b亚基(cob)、七个NADH脱氢酶亚基(nad1nad2nad3nad4nad4Lnad5nad6)以及三个ATP合成酶亚基(atp6atp8atp9)。此外,基因组还包含两个核糖体RNA基因(rnl和rns)和25个转运RNA基因(tRNAs),涵盖了所有20种标准氨基酸,其中一些tRNAs具有冗余性(Arg、Leu、Met和Ser)。在rnl区域发现了一个IA组内含子,其中包含rps3基因。此外,线粒体基因组中还注释了两个独立的开放阅读框(ORF1和ORF2),编码假想蛋白。基于14个PCGs的串联氨基酸序列的系统发育分析将F. acetilerea归类为Nectriaceae科的一员,与Nectria cinnabarina(Tode)Fr. 1849形成姐妹关系,具有较高的自助法支持度(84%)()。该线粒体基因组序列已上传至GenBank,登录号为PX421574。

图2.Fusicolla acetilerea菌株NIBRFGC000505922的线粒体基因组特征图。基因位于外圈,并根据功能类别进行颜色编码。内圈显示GC含量。含有内含子的基因用星号(*)标示。

图2. fusicolla acetilerea菌株nibrfgc000505922的线粒体基因组特征图。基因位于外圈,并根据功能类别进行颜色编码。含有内含子的基因用星号(*)标示。</a><div><button>显示全尺寸</button></div><div><div><p><span><span>图3.</span></span>基于14个保守线粒体基因(<i>atp6</i>、<i>atp8</i>、<i>atp9</i>、<i>cob</i>、<i>cox1</i>–<i>3</i>、<i>nad1</i>–<i>6</i>、<i>nad4l</i>)的串联氨基酸序列推断出的九种nectriaceae物种的最大似然(ml)系统发育树。<i>calonectria ilicicola</i>(mt118655.1;gai等人 <span><a><span>引用</span>2020</a>)、<i>clonostachys farinosa</i>(oq205181.2;oh <span><a><span>引用</span>2024</a>)、<i>emericellopsis fuci</i>(kr864757.1;konovalova和logacheva <span><a><span>引用</span>2016</a>)、<i>fusarium fujikuroi</i>(jn041210.1;al-reedy等人 <span><a><span>引用</span>2012</a>)、<i>fusarium graminearum</i>(dq364632.1;al-reedy等人 <span><a><span>引用</span>2012</a>)、<i>fusarium mangiferae</i>(kp742838.1;未发表)、<i>fusarium oxysporum</i>(ay945289.1;pantou等人 <span><a><span>引用</span>2008</a>)、<i>fusarium pseudograminearum</i>(mt036635.1;kulik等人 <span><a><span>引用</span>2020</a>)、<i>fusarium solani</i>(jn041209.1;al-reedy等人 <span><span>引用</span>2012</a>)、<i>ilyonectria destructans</i>(ku881725.1;okorski和majchrzak <span><a><span>引用</span>2007</a>)和<i>nectria cinnabarina</i>(kt731105.1;wang等人 <span><a><span>引用</span>2016</a>)被用作参考。分支上的自助法支持值(1000次重复)已标示。比例尺表示每个位置的替代次数。</p></a><img id=
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