含有血清的宁雪升斑汤通过BMSCs-Exo-miR-199a-5p调节CD4+T细胞平衡，从而缓解免疫性血小板减少症

《Stem Cell Research & Therapy》：Ningxue Shengban decoction containing serum alleviates immune thrombocytopenia by modulating CD4+T cells balance via BMSCs-Exo-miR-199a-5p

骨髓间充质干细胞外泌体通过miR-199a-5p调控CD4+T细胞免疫平衡治疗免疫性血小板减少症。

　　

摘要

背景

由CD4⁺T细胞介导的异常免疫反应是免疫性血小板减少症（ITP）进展的关键因素。虽然宁雪生斑汤（NXSBD）是一种有效的治疗方法，但其作用机制和靶点仍不明确。

目的

本研究旨在阐明骨髓间充质干细胞（BMSCs）产生的外泌体miR-199a-5p在免疫稳态中的作用，并探讨用含有血清的NXSBD预处理的BMSCs外泌体（BMSCs-Exo）对ITP的治疗效果。

方法

我们将CD4⁺T细胞与BMSCs或预处理的BMSCs-Exo共培养，然后使用CFSE染色和流式细胞术（FCM）评估CD4⁺T细胞的增殖和分化情况。此外，我们使用活性的ITP小鼠模型来评估预处理的BMSCs-Exo的治疗效果。测量血小板计数并计算器官指数。通过FCM和ELISA检测血清中的自身抗体水平，通过FCM分析脾脏中CD4⁺T细胞亚群的变化，通过H&E染色观察骨髓组织中的巨核细胞数量和形态，并通过ELISA量化小鼠血清中的关键细胞因子水平。

结果

我们的结果表明，BMSCs-Exo对CD4⁺T细胞的免疫调节作用是通过miR-199a-5p介导的，而含有血清的NXSBD通过增加miR-199a-5p的水平增强了这种作用。在活性的ITP小鼠模型中，BMSCs-Exo治疗显著改善了ITP的病理特征，表现为外周血小板计数增加、脾脏和胸腺指数降低以及自身抗体水平下降。免疫表型分析显示，BMSCs-Exo治疗后脾脏中的Treg细胞和Th2细胞比例增加，而Th17细胞和Th1细胞比例减少。此外，BMSCs-Exo还增强了成熟巨核细胞的生成。BMSCs-Exo治疗后，促炎细胞因子水平显著降低，而抗炎细胞因子水平显著升高。用含有血清的NXSBD预处理的BMSCs-Exo比未经处理的BMSCs产生的效果更好。

结论

总之，我们的研究结果表明，含有血清的NXSBD在ITP小鼠中的治疗效果可能归因于其上调了BMSCs-Exo中的miR-199a-5p，从而有助于调节CD4⁺T细胞的免疫平衡。