M6A甲基化的ETV1通过转录激活RBMS1，促进多发性骨髓瘤的进展以及肿瘤相关巨噬细胞的M2极化

《Journal of Translational Medicine》：m6A methylation-modified ETV1 drives multiple myeloma progression and M2 polarization of tumor-associated macrophage through transcriptional activation of RBMS1

研究发现ETV1在多发性骨髓瘤中高表达，促进肿瘤细胞增殖和M2型肿瘤相关巨噬细胞极化，机制涉及METTL3介导的m6A修饰及ETV1激活RBMS1，提示ETV1/RBMS1轴可能是治疗靶点。

　　

摘要

背景

多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的肿瘤，其特征是骨髓中恶性浆细胞的克隆性扩增。肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）在MM微环境中起着关键作用，它们能够促进浆细胞的存活并增强对治疗的抵抗性。ETV1（E-twenty-six转化特异性变异体1）是一种转录因子，已被证明在多种癌症中具有致癌作用，但其功能机制在MM中的具体作用仍不甚清楚。

方法

我们从GSE125361数据集中获取了3个健康样本和45个MM样本的骨髓浆细胞，对其基因表达谱进行了分析。使用CCK-8和集落形成实验评估了细胞生长情况。通过流式细胞术分析了巨噬细胞的表型，并通过免疫荧光双染色技术评估了TAM的浸润情况。利用体内荧光成像系统检测了肿瘤的发展。通过荧光素酶报告基因和染色质免疫沉淀（ChIP）实验检测了转录活性。通过m6A RNA免疫沉淀后进行qPCR（m6A RIP-qPCR）检测了MM细胞中ETV1的N6-甲基腺苷（m6A）修饰水平，并通过RIP-PCR检测了ETV1 mRNA与METTL3（甲基转移酶样3）之间的相互作用。

结果

生物信息学分析显示，ETV1在MM中显著上调，并与MM患者的不良预后相关。功能获得和功能丧失实验表明，ETV1的过表达在体外和体内均增强了MM细胞的增殖以及TAMs向M2型的极化，而ETV1的敲低则产生了相反的效果。从机制上讲，我们证实METTL3通过增强ETV1的m6A甲基化修饰来上调其表达。此外，ETV1在转录水平上激活了RBMS1（RNA结合基序，单链相互作用蛋白1），而RBMS1的敲低则消除了ETV1过表达的促肿瘤效应。

结论

这些发现强调了ETV1/RBMS1信号轴在MM进展和TAMs向M2型极化中的关键作用。我们的结果进一步表明，ETV1可能是一个有前景的治疗靶点，为理解其致癌机制提供了新的见解。