《Scientific Reports》：Analysis of the mechanism and prognostic value of PRKCQ-AS1 in inhibiting the progression of lung adenocarcinoma via regulating the PD-1/PD-L1 pathway
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本研究发现长链非编码RNA PRKCQ-AS1在肺腺癌中发挥肿瘤抑制作用。为解决其调控肿瘤免疫逃逸的机制问题，研究人员开展主题研究，证实PRKCQ-AS1低表达促进癌细胞增殖与侵袭，并上调PD-1/PD-L1表达，从而揭示了其通过抑制PD-1/PD-L1轴来阻断免疫逃逸的新机制，为肺腺癌免疫治疗提供了新的潜在生物标志物和治疗靶点。
肺腺癌是肺癌中最常见的亚型，尽管诊疗手段不断进步，患者预后依然不尽如人意。这背后的一个重要“帮凶”是肿瘤的免疫逃逸——癌细胞就像狡猾的罪犯，能够通过各种手段躲避免疫系统的“警察”（免疫细胞）的追捕和清除。其中，PD-1（程序性死亡蛋白-1）/PD-L1（程序性死亡配体-1）这对“信号开关”是癌细胞实现免疫逃逸的关键途径之一。PD-L1在癌细胞表面表达，一旦与免疫细胞上的PD-1“握手”，就会传递一个“停止攻击”的抑制信号，导致免疫细胞失活，肿瘤得以逍遥法外。虽然针对这一通路的免疫检查点抑制剂已成功应用于临床，但仍有相当一部分患者治疗效果不佳或产生耐药。因此，深入挖掘调控PD-1/PD-L1轴的上游分子机制，寻找能够预测疗效或逆转免疫抑制的新靶点，成为当前肿瘤免疫治疗研究的焦点。
在此背景下，一类名为长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）的分子走进了研究者的视野。它们虽不编码蛋白质，却能像“幕后指挥家”一样，精细调控基因的表达，在肿瘤发生发展以及免疫调控中扮演着复杂而关键的角色。PRKCQ-AS1便是这样一位“神秘嘉宾”，它在肺腺癌中的具体角色和调控网络尚不明确，尤其是否参与了PD-1/PD-L1介导的免疫逃逸过程，更是未解之谜。这项发表于《Scientific Reports》的研究，正是为了揭开PRKCQ-AS1在肺腺癌中的面纱，探究其功能、机制以及与患者预后的关联，以期找到对抗肺腺癌免疫逃逸的新策略。
研究人员开展这项研究，主要采用了以下几个关键技术方法：首先，利用癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas, TCGA）数据库，结合临床样本验证，系统分析了PRKCQ-AS1在肺腺癌组织中的表达水平及其与临床病理特征、患者预后的相关性。其次，通过生物信息学手段构建了以PRKCQ-AS1为核心的竞争性内源RNA（competitive endogenous RNA, ceRNA）调控网络，并进行功能富集分析，以预测其潜在的生物学功能和涉及的信号通路。最后，在体外实验中，通过在NCI-H1395肺腺癌细胞系中进行基因沉默（knockdown）操作，利用CCK-8（Cell Counting Kit-8）实验、Transwell迁移/侵袭实验、流式细胞术（flow cytometry）等技术评估其对细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡等恶性表型的影响；同时，采用RT-qPCR（实时定量聚合酶链式反应）和蛋白质印迹法（Western blotting）检测其对PD-1和PD-L1表达的调控作用。
PRKCQ-AS1在肺腺癌中表达下调并与不良预后相关
通过对TCGA数据库和临床样本的分析，研究人员发现，与正常肺组织相比，PRKCQ-AS1在肺腺癌组织中表达水平显著降低。进一步分析显示，PRKCQ-AS1的低表达与更晚期的TNM分期以及更差的患者总生存期密切相关。这表明PRKCQ-AS1可能作为一个潜在的抑癌因子发挥作用，其表达缺失预示着更恶性的肿瘤行为和更糟的临床结局。
PRKCQ-AS1介导的ceRNA网络与免疫相关通路紧密关联
为了探究PRKCQ-AS1的作用机制，研究者构建了其介导的ceRNA调控网络。分析发现，该网络中的基因显著富集于多种免疫相关的生物学过程和信号通路。这一结果提示，PRKCQ-AS1可能通过复杂的RNA交互作用网络，深度参与调控肿瘤免疫微环境。
沉默PRKCQ-AS1促进肺腺癌细胞恶性表型
在功能验证实验中，当在NCI-H1395细胞中敲低PRKCQ-AS1的表达后，细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力均被显著增强，而细胞凋亡则受到抑制。这一系列体外实验直接证实，PRKCQ-AS1确实具有抑制肺腺癌细胞生长和转移的抑癌功能，其表达下调会直接驱动肿瘤的恶性进展。
PRKCQ-AS1通过抑制PD-1/PD-L1通路调控免疫逃逸
研究最关键和具启发性的发现在于，当PRKCQ-AS1被沉默后，肺腺癌细胞中PD-1和PD-L1的mRNA和蛋白表达水平均出现显著上调。这一结果将PRKCQ-AS1的抑癌功能与肿瘤免疫逃逸的核心通路直接联系起来。它表明，PRKCQ-AS1可能通过某种尚未完全阐明的分子机制（可能通过其ceRNA网络），负向调控PD-1和PD-L1的表达。当PRKCQ-AS1表达降低时，对PD-1/PD-L1通路的“刹车”作用减弱，导致该通路过度激活，从而帮助癌细胞实现免疫逃逸。
综上所述，本研究得出了明确的结论：长链非编码RNA PRKCQ-AS1在肺腺癌中扮演着肿瘤抑制因子的角色。它不仅在转录水平上表达下调，且其低表达与肿瘤晚期和不良预后相关。在机制上，PRKCQ-AS1能够抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭，并促进细胞凋亡。更重要的是，研究首次揭示了PRKCQ-AS1的一个关键功能——通过负向调控PD-1/PD-L1信号轴来抑制肿瘤的免疫逃逸。当PRKCQ-AS1表达缺失时，会解除对PD-1/PD-L1通路的抑制，从而为癌细胞创造免疫抑制的微环境，促进肿瘤进展。
这项研究的意义深远。首先，它鉴定出PRKCQ-AS1作为一个新的、有潜力的肺腺癌预后生物标志物，其表达水平或许能帮助临床医生更精准地评估患者风险。其次，更重要的是，它揭示了PRKCQ-AS1作为PD-1/PD-L1通路的上游调控因子，为理解肺腺癌免疫逃逸的分子机制提供了新视角。这提示，未来或可通过恢复或模拟PRKCQ-AS1的功能，来抑制PD-1/PD-L1信号，从而增强现有免疫检查点抑制剂的疗效，或为那些对现有免疫治疗不响应的患者提供新的联合治疗思路。因此，PRKCQ-AS1不仅是一个预后指标，更是一个极具潜力的免疫治疗新靶点，为攻克肺腺癌的免疫治疗困境带来了新的希望。
