《Arthritis Research & Therapy》：Subclinical atherosclerosis in rheumatoid arthritis is driven by MicroRNA polymorphisms and NETosis
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本综述探讨了类风湿关节炎(RA)患者心血管风险(CVD)增高的新机制。研究表明，传统风险因素外，microRNA基因多态性(miR-SNPs)rs2431697和rs3746444与RA患者亚临床动脉粥样硬化(pCIMT)相关，且rs2431697 T等位基因可能通过促进NETosis（以citH3-DNA水平升高为标志）介导这一过程，揭示了遗传、炎症和血栓形成间的联系，为RA患者CVD风险提供了潜在生物标志物和治疗靶点。
类风湿关节炎(RA)是一种复杂的多系统疾病，心血管疾病(CVD)，特别是动脉粥样硬化，是导致RA患者死亡率过高的主要原因。然而，传统的CVD风险因素无法完全解释RA患者升高的CVD风险。近年来研究表明，慢性炎症、免疫调节microRNA(miRNA)以及中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的形成（一种被称为NETosis的过程）可能通过血栓炎症机制共同促进RA相关的动脉粥样硬化。
研究团队深入探讨了三个特定的microRNA基因多态性(miR-SNPs)——rs2431697（位于miR-146a）、rs3746444（位于miR-499）和rs11614913（位于miR-196a2）——是否与RA患者的亚临床动脉粥样硬化相关，以及NETosis是否介导了这种关联。
研究方法与参与者
研究人员从西班牙两家医院（穆尔西亚的Morales Meseguer医院和科尔多瓦的Reina Sofía医院）招募了620名RA患者和359名健康对照者。为了评估动脉粥样硬化负担，研究对来自穆尔西亚队列的54名RA患者和75名对照者测量了颈动脉内膜中层厚度(CIMT)。当CIMT值大于0.90毫米或超声检测到斑块时，即被定义为病理性CIMT(pCIMT)。此外，在86名RA患者和75名对照者的血浆中，量化了两种NETosis标志物：相对非特异性的细胞游离DNA(cfDNA)以及特异性标志物瓜氨酸化组蛋白H3-DNA复合物(citH3-DNA)。所有参与者的上述三种miR-SNPs均进行了基因分型，并使用逻辑回归模型评估了SNPs与pCIMT之间的关联，同时考虑了RA状态和传统心血管风险因素。
研究主要发现
在RA易感性方面，rs11614913的C等位基因与RA风险增加相关，而rs2431697和rs3746444与RA易感性在本研究人群中无显著关联。
在动脉粥样硬化负担方面，RA患者的pCIMT发生率(85.2%)显著高于健康对照者(45.3%)，平均最大CIMT值和颈动脉斑块患病率也显著更高。
研究的关键发现在于miR-SNPs与pCIMT的关联。统计分析显示，rs2431697和rs3746444与pCIMT的关联具有RA特异性。也就是说，rs2431697的T等位基因和rs3746444的G等位基因仅与RA患者（而非健康对照）的pCIMT风险增加显著相关，即使在调整了年龄、性别、高血压、血脂异常和烟草使用等传统风险因素后，这种相互作用依然存在。
为了探究潜在的机制，研究人员分析了miR-SNPs与NETosis标志物的关系。结果显示，携带rs2431697 T等位基因（CT或TT基因型）的RA患者，其血浆citH3-DNA复合物水平显著高于携带CC基因型的患者，表明NETosis活性增强。而rs3746444和rs11614913与citH3-DNA水平则无显著关联。此外，在RA患者中，pCIMT组的citH3-DNA水平显著高于非病理性CIMT(nCIMT)组，进一步支持了NETosis与亚临床动脉粥样硬化之间的直接联系。
讨论与意义
这项研究首次揭示了rs2431697和rs3746444这两种miR-SNPs可能与RA患者的亚临床动脉粥样硬化（pCIMT）相关，且这种关联在健康对照中并未观察到。重要的是，携带rs2431697 T等位基因的RA患者表现出更高的NETosis活性（citH3-DNA水平升高），提示NETosis可能是该基因多态性影响RA患者动脉粥样硬化风险的潜在机制。
miR-146a是核因子κB(NF-κB)通路的已知负调控因子，rs2431697多态性可影响其表达水平。研究团队前期的动物模型和临床研究已证实，miR-146a水平降低（受rs2431697调控）与房颤、社区获得性肺炎和急性冠脉综合征等疾病背景下NETosis驱动的血栓形成及心血管事件风险增加相关。本研究将这一发现扩展至RA领域，强调了在炎症背景下，该基因变异可能通过增强NETosis途径，特异性增加RA患者的动脉粥样硬化风险。
尽管关于rs3746444与NETosis的直接功能研究较少，但已有证据表明其G等位基因与MIR499转录增加和心血管疾病风险升高相关。本研究观察到rs3746444 G等位基因与RA患者的pCIMT相关，支持其在RA相关动脉粥样硬化中可能具有疾病特异性作用。
结论与展望
综上所述，本研究支持一个模型：在RA特有的炎症环境中，rs2431697基因变异可能通过调节NETosis过程来影响动脉粥样硬化风险。这些发现为理解RA患者心血管风险增加的复杂机制提供了新的遗传和分子层面的见解，突出了miR-SNPs和NETosis作为潜在生物标志物和治疗靶点的重要性，有望为开发降低RA患者CVD风险的新策略提供方向。然而，研究也存在局限性，例如评估CIMT和NETosis标志物的亚组样本量相对较小，未来需要更大规模、多中心的研究来验证这些关联并进一步阐明其功能意义。
