《Journal of Ethnopharmacology》：Tanreqing injection regulates Sema7a/Plxnc1 signaling pathway mediated neutrophil extracellular trap formation to alleviate lipopolysaccharide-induced acute lung injury
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中药注射剂泰瑞真切注（TRQ）通过抑制Sema7a/Plxnc1信号通路减少中性粒细胞胞外陷阱（NETs）形成，从而改善急性肺损伤（ALI） rats模型的肺组织损伤和炎症反应。
霍梦琪|张明良|范琳红|张慧|王燕|孟维婷|吴亚丽|马旭斌|陈晓菲|唐金发
河南中医药大学第一附属医院药学系，中国郑州450003
摘要
民族药理学相关性
丹参青金化痰注射液（TRQ）源自传统中药方剂“青金化痰汤”，具有清热、解毒、化痰和止咳的功效。历史上，它被用于治疗呼吸系统疾病。最近的研究表明，TRQ在减轻急性肺损伤（ALI）方面具有显著效果，这凸显了其在肺部炎症管理中的潜在作用。
研究目的
本研究旨在评估TRQ对ALI的治疗效果，并阐明其分子机制。
材料与方法
通过气管内注射脂多糖建立ALI大鼠模型。使用超高效液相色谱-四极杆电喷雾质谱（UHPLC-QE-MS）鉴定TRQ的关键成分。通过整合代谢组学、RNA测序和单细胞测序分析差异表达基因及相关通路。通过分子对接和体外/体内实验验证这些机制。
结果
TRQ显著减少了ALI大鼠中性粒细胞胞外陷阱（NETs）的形成和炎症细胞因子的分泌。其保护作用主要通过抑制Sema7a/Plxnc1信号通路实现。体内实验证实，TRQ治疗可减少NETs的积累并下调Sema7a和Plxnc1的表达。此外，分子对接和体外实验显示，TRQ中的活性成分黄芩素可竞争性抑制Sema7a与Plxnc1的结合，从而显著抑制NETs的形成。
结论
本研究为TRQ治疗ALI的潜在机制提供了新的分子见解，强调了其在肺部炎症管理中的治疗前景。
引言
急性肺损伤（ALI）是一种由多种病因因素引起的急性肺部炎症疾病。如果不及时采取有效干预措施，ALI可能发展为急性呼吸窘迫综合征（ARDS），这对患者生存构成重大风险（Chen等人，2025；Urtubia等人，2025；Zhang等人，2025）。ARDS的主要治疗方法包括机械通气和辅助治疗，如外源性表面活性剂、一氧化氮疗法、液体管理、抗氧化剂、皮质类固醇和抗炎药物（Park，2025；Wang等人，2025；Zhang等人，2025）。然而，当前的治疗方案存在显著局限性，尤其是皮质类固醇和免疫抑制剂。虽然这些药物可以缓解某些症状，但使用它们也可能增加感染风险并抑制免疫功能（Williams等人，2025；Sivapalan等人，2019）。因此，迫切需要开发更有效的治疗策略以改善ARDS患者的临床预后。
由各种病原体引起的感染是ALI的重要诱因（Barkat等人，2025；Zhang等人，2025）。脂多糖（LPS）是细菌细胞壁的关键成分，在ALI的发病机制中起关键作用，它通过激活免疫反应、诱导炎症细胞因子的释放、增强氧化应激和直接造成细胞损伤（Shen等人，2024）来发挥作用。组织损伤释放的炎症信号进一步促进中性粒细胞从循环系统迁移到受影响的肺组织，诱导DNA释放形成中性粒细胞胞外陷阱（NETs），这些NETs在捕获和清除病原体中起重要作用（Zhou等人，2024；Retter等人，2025）。然而，NETs的过度释放会导致氧化应激增加、毛细血管通透性增强以及更多中性粒细胞被招募到炎症部位，从而形成“炎症-损伤-招募”的恶性循环，最终加重肺损伤（Wu等人，2023；Vestweber，2015）（图1）。尽管目前的研究主要集中在直接抑制NETs的形成或开发降解NETs的酶上，但针对NETs形成上游调控因子的综合治疗策略仍处于探索阶段（Chen等人，2025；Liu等人，2025）。
最近的研究表明，中性粒细胞的迁移是NETs在肺组织中聚集的关键步骤，减轻过度迁移可以有效缓解ALI（Zi等人，2024）。临床数据显示，ALI患者血清中的NETs水平显著升高，这与疾病严重程度和促炎细胞因子水平呈正相关（von Meijenfeldt等人，2022）。Sema7a/Plxnc1信号通路在中性粒细胞迁移中起关键作用：Sema7a是中性粒细胞表面表达的配体，与受体Plxnc1结合，激活下游信号，促进中性粒细胞向炎症部位定向迁移（Khan等人，2025；Angelopoulou和Piperi，2018）。针对这一通路可能减少中性粒细胞在肺部的积聚，从而抑制NETs的过度释放，为ALI的治疗提供新的策略。
传统中医（TCM）凭借其多样的生物活性天然化合物和潜在的治疗靶点，在预防和治疗呼吸系统疾病方面展现出巨大潜力（Ye等人，2025）。丹参青金化痰注射液（TRQ）是一种从经典中药方剂“青金化痰汤”衍生而来的现代制剂，包含五种活性草药：连翘（Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl.）、黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）、金银花（Lonicerae japonicae flos）、鹿角（Cornu Naemorhedi）和西藏沙棘（Selenarchos thibetanus G. Cuvier）的干燥胆汁（Xiao等人，2022；Tang等人，2025）。它传统上用于“清热解毒、化痰止咳”，并在临床上广泛用于治疗风热肺证（Ma等人，2024；Guo等人，2021；Huang等人，2022）。TRQ在治疗ALI方面具有特别前景，尤其是在重症病例中，因为其静脉给药可以迅速达到有效血药浓度，及时控制过度炎症和感染（Xie等人，2023）。这使得它特别适合胃肠道功能障碍患者或需要机械通气的患者（Wang等人，2016）。荟萃分析证实，TRQ作为辅助疗法，可显著改善炎症标志物（如CRP和PCT），缩短抗生素使用时间和机械通气时间，并提高脱离机械支持的成功率（Li等人，2025；Xie等人，2023）。尽管注射剂型的风险相对较高，但实际数据表明不良反应发生率较低（约0.3%），严重不良事件很少见（Li等人，2020）。因此，在标准化剂量管理和密切监测下，TRQ对ALI患者的临床益处远远超过其潜在风险，表明其应用是合理且安全的（Tong等人，2021）。
尽管TRQ的临床疗效已有充分记录，但其在ALI中的分子机制——特别是如何通过调节NETs的形成来缓解气道阻塞和组织损伤——仍不够清楚。本研究旨在系统阐明TRQ通过Sema7a/Plxnc1信号通路调节NETosis的机制，最终通过整合代谢组学、转录组学和单细胞测序技术来缓解ALI。这项研究致力于为TRQ的临床应用提供分子基础。
试剂
TRQ由上海凯宝药业有限公司提供（中国上海，目录号2404117）。来自铜绿假单胞菌（P. aeruginosa）的LPS（中国北京，目录号L8880）和全反式维甲酸（ATRA，中国北京，目录号A9120）由北京索尔巴bio科技有限公司提供。佛波尔12-肉豆蔻酸13-乙酸酯（PMA，中国上海，目录号TQ0198）由上海涛书生物科技有限公司提供。地塞米松磷酸盐（Dex，中国济宁，目录号N24041012）由
TRQ对LPS诱导的大鼠ALI的保护作用
H&E染色显示，与对照组相比，模型组大鼠的肺组织表现出显著的炎症细胞浸润、肺泡扩张、部分肺泡破裂或塌陷以及红细胞渗漏。与模型组相比，Dex组以及高剂量、中剂量和低剂量TRQ组大鼠的肺组织结构有所改善，炎症细胞浸润和腔内渗出物显著减少。肺功能测试
讨论
本研究通过整合多组学技术和分子生物学方法，系统揭示了TRQ治疗ALI的分子机制。它重点阐明了TRQ通过调节Sema7a/Plxnc1信号轴来调控NETs形成、中性粒细胞迁移和肺内皮屏障功能的综合途径。这是首次系统地揭示TRQ注射如何调节
结论
本研究系统阐明了TRQ注射通过调节Sema7a/Plxnc1信号轴来抑制NETs形成、调控中性粒细胞迁移和增强肺内皮屏障功能的分子机制。利用多组学技术和先进的分子生物学技术，我们的发现为TRQ在ALI治疗中的应用提供了坚实的理论基础。
利益冲突声明
作者声明他们没有已知的竞争性财务利益或个人关系可能影响本文所述的工作。
作者贡献声明
张明良：撰写——审阅与编辑、验证、监督、资金获取、正式分析、数据管理。霍梦琪：撰写——初稿、可视化、验证、软件使用、资源获取、项目管理、方法学研究、资金获取、正式分析、数据管理、概念构思。唐金发：撰写——审阅与编辑、监督、资金获取、概念构思。孟维婷：验证、数据管理。王燕：可视化，未引用的参考文献
Chen等人，2025；Chen等人，2025；Wang等人，2025；Zhang等人，2025；Zhuang等人，2020。数据可用性
本研究的数据集可根据合理请求向相应作者获取。利益冲突声明
作者声明他们没有已知的竞争性财务利益或个人关系可能影响本文所述的工作。致谢
本研究得到了国家自然科学基金（编号82574685）、中原科技创新领军人才计划（编号254000510038）、河南省高等学校重点科研项目（编号23A360008）、河南省高等学校科技创新团队（编号23IRTSTHN026）、河南省医学科学技术重点项目（编号SBGJ202403040）等项目的支持
