摘要 A005：一种由癌基因驱动的自发三阴性乳腺癌模型在免疫治疗测试中的应用价值 免费

《Cancer Immunology Research》：Abstract A005: Utility of an oncogene-driven spontaneous triple-negative breast cancer model for immunotherapeutic testing Free

本研究开发了基于CRISPR技术靶向TP53、PTEN和BRCA1的自发性三阴性乳腺癌小鼠模型，并构建了包含不同免疫浸润特征的细胞系库。该模型能自然形成异质性肿瘤，为研究肿瘤微环境与免疫治疗响应机制提供了新工具。

　　

摘要

每八名女性中就有一人会在其一生中患上乳腺癌，这是女性癌症相关死亡的第二大原因。乳腺癌是一种异质性疾病，具有多种亚型，这些亚型在患者预后、生物标志物和治疗选择方面存在差异。三阴性乳腺癌（TNBC）是一种侵袭性较强的乳腺癌类型，其治疗选择较为有限。最近，该疾病获得了美国食品药品监督管理局（FDA）批准，可以使用抗PD1免疫疗法进行治疗，但预测患者治疗成功的因素仍不明确。研究TNBC的一个主要障碍是缺乏具有临床相关性的动物模型。大多数研究使用的是有限的小鼠细胞系，这些细胞系无法准确反映肿瘤的免疫逃逸机制以及人类乳腺癌的异质性。我们的实验室开发了一种自发的TNBC模型，该模型利用CRISPR技术靶向TNBC中常见的三个突变基因：TP53、PTEN和BRCA1。通过将表达Cre蛋白的腺病毒（Ad-Cre-GFP）注入乳腺导管，该模型能够在乳腺上皮细胞中诱导Cas9、GFP和三种CRISPR引导RNA的表达。这使得肿瘤能够在导管内最初形成，随后扩散到周围的乳腺组织中，并在完全具有免疫功能的宿主体内形成异质性的、可追踪的肿瘤。每个肿瘤在TP53、PTEN和BRCA1基因上具有独特的突变特征，这些突变推动了肿瘤的发展和微环境的形成。由于这些肿瘤的潜伏期较长，我们还利用它们生成了二十多种与C57BL/6小鼠兼容的TNBC类似细胞系。我们通过免疫组化（IHC）分析了这些肿瘤的激素受体和细胞角蛋白表达情况，通过流式细胞术检测了肿瘤浸润的淋巴细胞，通过RNA测序（RNAseq）分析了基因表达谱等。我们发现这些细胞系具有独特的突变特征，并且这些肿瘤在免疫学上也表现出多样性：有些肿瘤中髓系细胞浸润较多，有些则以淋巴细胞为主，还有一些肿瘤几乎完全不受免疫系统的影响。通过拥有这样一个与C57BL/6小鼠兼容的TNBC细胞系库，我们能够在研究中捕捉到人类乳腺癌的异质性，包括基因表达和免疫参与方面的差异。我们的细胞系库还包括在饮食诱导的肥胖小鼠中形成的肿瘤，这为研究肿瘤生长环境对免疫浸润、免疫原性和突变负担的影响提供了新的见解。总体而言，我们不仅在C57BL/6小鼠中建立了自发的TNBC模型，还构建了高度多样化的TNBC可植入细胞系，这将有助于更准确地模拟人类乳腺癌在小鼠体内的表现。未来，我们将能够研究这些不同肿瘤系对免疫疗法的反应，并利用它们来更好地理解影响患者免疫疗法疗效的因素。