SARS-CoV-2疫苗接种的接种策略和时机对接受克拉屈滨治疗的多发性硬化症患者的免疫反应的影响

《Clinical Immunology》：Effect of dynamics and timing of SARS-CoV-2 vaccination on immune response in people with multiple sclerosis during cladribine treatment

多发性硬化症患者接种COVID-19疫苗的免疫应答受cladribine治疗时间窗口影响，B细胞抗体反应在疫苗前接种更佳而T细胞应答在疫苗后接种更优。

　　

克劳迪娅·鲁索（Claudia Russo）| 克洛琳达·富斯科（Clorinda Fusco）| 福图纳塔·卡博内（Fortunata Carbone）| 特蕾莎·米奇洛（Teresa Micillo）| 克劳迪娅·拉罗卡（Claudia La Rocca）| 吉乌西·德罗莎（Giusy De Rosa）| 文森佐·迪马里诺（Vincenzo Di Marino）| 克里斯蒂娜·鲁杰罗（Kristyna Ruggiero）| 费德里卡·加尔齐亚诺（Federica Garziano）| 弗朗切斯科·佩尔纳（Francesco Perna）| 卡拉·扎内拉（Carla Zannella）| 马西米利亚诺·加尔迪埃罗（Massimiliano Galdiero）| 詹卢伊吉·弗朗奇（Gianluigi Franci）| 罗伯塔·兰齐洛（Roberta Lanzillo）| 文森佐·布雷西亚·莫拉（Vincenzo Brescia Morra）| 拉凯莱·比吉（Rachele Bigi）| 詹马尔科·阿巴德萨（Gianmarco Abbadessa）| 西蒙娜·博纳维塔（Simona Bonavita）| 马可·萨尔维蒂（Marco Salvetti）| 马塞洛·莫奇亚（Marcello Moccia）| 朱塞佩·马塔雷塞（Giuseppe Matarese）

意大利那不勒斯费德里科二世大学医院实验室与输血医学系

摘要

自COVID-19大流行爆发以来，世界卫生组织建议多发性硬化症（pwMS）患者接种疫苗。然而，接受免疫调节治疗的pwMS患者接种疫苗后产生的免疫反应目前尚不明确。本研究评估了接受克拉布里滨（cladribine）治疗的pwMS患者对BNT162b2 mRNA疫苗的体液免疫和T细胞介导的免疫反应，重点探讨了给药与接种疫苗之间的时间间隔对免疫反应强度和动态的影响。研究发现，克拉布里滨在不同时间点对B细胞和T细胞的数量产生了不同的影响。因此，克拉布里滨治疗后的疫苗接种导致抗体产生减少，但保留了T细胞反应；而克拉布里滨治疗前的pwMS患者虽然具有有效的体液免疫，但其针对SARS-CoV-2刺突蛋白的T细胞反应受到抑制。我们的研究结果可为临床决策提供依据，帮助确定克拉布里滨治疗期间合适的疫苗接种时机。

引言

克拉布里滨（2-氯脱氧腺苷）是一种合成药物（脱氧腺苷类似物），已获得欧洲药品管理局和美国食品药品监督管理局的批准，用于治疗成人多发性硬化症（MS）的复发型[1]、[2]。研究表明，克拉布里滨片剂可降低多发性硬化症患者的复发率和炎症活动[3]、[4]。该药物在淋巴细胞内选择性转化为2-CdATP活性三磷酸盐，干扰DNA合成并导致细胞凋亡[5]、[6]、[7]。由于其作用机制，克拉布里滨主要消耗T细胞和B细胞，对先天免疫系统影响较小[8]、[9]、[10]。具体而言，它会导致淋巴细胞计数迅速下降，每个治疗周期开始后约2-3个月达到最低点，随后逐渐恢复[3]、[11]。由于其对淋巴细胞亚群的影响，克拉布里滨以及许多其他针对淋巴细胞的疾病修正疗法（DMTs）可能干扰多种疫苗的免疫反应[12]、[13]、[14]。2019冠状病毒病（COVID-19）大流行凸显了进一步研究DMTs对疫苗效果影响的必要性。接受特定免疫调节和免疫抑制治疗的pwMS患者被认为感染严重急性呼吸综合征冠状病毒2型（SARS-CoV-2）的风险较高，且可能带来不良后果[15]、[16]、[17]、[18]，因此他们被列为优先接种SARS-CoV-2疫苗的群体。有证据表明，B细胞和T细胞的协同作用对于产生有效的免疫记忆至关重要[19]、[20]。因此，在COVID-19大流行期间，国家和国际指南建议在可能的情况下协调克拉布里滨治疗期间疫苗接种的时间，以尽量减少治疗对免疫反应的潜在影响[21]、[22]、[23]。

然而，在疫苗推广初期，往往难以精确控制药物治疗与疫苗接种的时间。目前尚不清楚免疫调节疗法如何根据给药与接种疫苗之间的时间间隔影响有效的免疫反应。

最新研究表明，尽管接受了克拉布里滨治疗，这些患者在感染COVID-19时通常症状较轻[24]。因此，本研究旨在探讨在这种治疗背景下，无论是未接受过治疗的pwMS患者还是接受克拉布里滨治疗的pwMS患者，对基于mRNA的BNT162b2 SARS-CoV-2疫苗的体液免疫和T细胞介导的免疫反应。

标准协议批准、注册和患者同意

本研究获得了那不勒斯费德里科二世大学机构审查委员会的批准（批准编号391/19），并遵循伦理标准进行。所有参与者均签署了知情同意书，充分了解了研究目的、程序、潜在风险和益处。参与者的详细信息见表1。

外周血样本处理

外周血采集于肝素化真空采血管（BD Biosciences，意大利米兰）。分离血浆后用于后续分析。

队列设计

研究纳入了接受克拉布里滨治疗并接种两剂BNT162b2 mRNA疫苗的pwMS患者（n=30），以及未接受过治疗的pwMS患者（n=7），分别在接种前（未治疗组）和接种后（已治疗组）进行评估（详见补充图1 A中的研究设计示意图）。我们收集所有参与者的血液样本，以分析其外周免疫表型并开展血清学检测和体外实验。

讨论

本研究分析了克拉布里滨治疗对pwMS患者接种SARS-CoV-2疫苗后体液免疫和细胞免疫反应的影响，旨在填补关于接种时间与免疫反应之间关系的知识空白。已有临床研究表明，接种时间对疫苗效果有重要影响，尤其是针对水痘-带状疱疹病毒（VZV）的疫苗。

作者贡献声明

克劳迪娅·鲁索（Claudia Russo）：撰写初稿、方法学设计、数据收集、数据分析、概念框架。克洛琳达·富斯科（Clorinda Fusco）：方法学设计、数据收集、数据分析。福图纳塔·卡博内（Fortunata Carbone）：方法学设计、数据收集、资金申请、数据分析。特蕾莎·米奇洛（Teresa Micillo）：方法学设计、数据收集、数据分析。克劳迪娅·拉罗卡（Claudia La Rocca）：方法学设计、数据收集、数据分析。吉乌西·德罗莎（Giusy De Rosa）：数据整理、数据分析。

资助

本研究得到了以下机构的资助：国家恢复与韧性计划（NRRP）、NextGenerationEU项目第4任务第2部分（M4C2）、意大利大学与研究部（MUR）资助的“具有国家重要性的研究项目”（PRIN）。项目代码：2022LNHZAP（资助对象G.M.）；国家恢复与韧性计划（NRRP）和Next Generation EU项目M6/C2_CALL 2022（资助对象G.M.，项目代码：PNRR-MAD-2022-12375634）。

利益冲突声明

R.L.从Amgen、Alexion、Janssen、BMS Biogen、Sanofi-Genzyme、Novartis、Neuraxpharm、Roche和Merck公司获得了咨询费或酬金；V.B.M.从Almirall、Bayer、Biogen、Merck、Mylan、Novartis、Roche、Sanofi-Genzyme和Teva公司获得了酬金；G.A.从Roche、Novartis、Merck-Janssen-Cilag公司获得了演讲费用或参会/差旅支持。

致谢

作者感谢Salvatore De Simone和Mariarosaria Montagna在SARS-CoV-2抗刺突蛋白IgG检测方面提供的技术协助。同时，感谢所有参与本研究的人士以及支持他们研究的人士。