土耳其本土 Beauveria bassiana 分离株对 Leptinotarsa decemlineata (Say)（鞘翅目：叶甲科）的生物防治潜力

《Crop Protection》：Biocontrol Potential of Native Beauveria bassiana Isolates from Türkiye Against Leptinotarsa decemlineata (Say) (Coleoptera: Chrysomelidae)

本研究系统调查了土耳其七个地理区土样中拟青霉贝氏属（Beauveria bassiana）原种，分离到71株形态鉴定为贝氏属真菌，其中5株原种（Ay1、Bey、Artv、Lul1、Den2）通过分子验证，并测试三种施用方法。结果显示喷洒法最有效，Artv菌株对4龄蛴螬的LT50为5.1天，毒力最高，表明原种可作为生物防治剂用于防治土豆蛴螬。

　　

Meltem ULUSOY | Nevin KESK?N

哈切特佩大学，生物系，应用生物学组，06800 安卡拉，土耳其

摘要

化学农药对人类健康和环境可持续性仍构成重大威胁，因此需要更安全的替代品。本研究系统地探讨了来自土耳其七个地理区域的本土Beauveria bassiana分离株作为生物控制剂对抗Leptinotarsa decemlineata（Say）（鞘翅目：叶甲科）的潜力。Leptinotarsa decemlineata是马铃薯的主要害虫。从土耳其七个地理区域收集的180个土壤样本中，共分离出71株被形态学鉴定为Beauveria属的昆虫病原真菌。使用Galleria诱饵法分离出84.5%的菌株，而土壤稀释法仅分离出15.5%的菌株。在71株形态学鉴定的菌株中，选取了31株具有代表性的菌株进行分子鉴定。通过ITS和TEF-1α区域的分子分析确认所有选定的菌株均为B. bassiana，但不同菌株的BLOC和RPB2扩增成功率存在差异。基于地理多样性，选取了5株本土Beauveria bassiana分离株（Ay1、Bey、Artv、Lul1和Den2）与标准B. bassiana菌株KVL03129一起进行致病性评估。比较三种施用方法（喷洒、叶片浸泡和幼虫浸泡）的生物实验表明，喷洒法的效果最佳。使用喷洒法在1×10⁷、1×10⁶和1×10⁵孢子/mL浓度下对L. decemlineata第四龄幼虫的致病性评估显示，不同菌株之间存在显著差异。标准菌株KVL03129的半数致死时间（LT₅₀）为3.6天，而本土B. bassiana Artv菌株在1×10⁷孢子/mL浓度下的LT₅₀为5.1天，显示出最高的毒力。这些发现表明，本土B. bassiana分离株是开发针对L. decemlineata的生物控制剂的理想候选菌株。

章节摘录

引言

农业生产面临来自昆虫害虫的严重威胁，这些害虫会对作物造成直接物理损害，降低产量质量，并导致经济损失（Weber, 2013）。化学农药一直是害虫管理策略的基础，能够提供快速有效的控制效果。然而，其长期和广泛的使用引发了严重的环境和健康问题，包括土壤和水体污染、食品中的农药残留等。

土壤样本采集与处理

土壤样本来自土耳其47个省份的7个地理区域，涵盖了森林、农田、草地、牧场、果园和未受干扰的地区等多样的生态栖息地。2015-2016年4月至6月期间，在这些区域共收集了180个土壤样本，以确保全面反映土耳其多样的生态环境和气候条件。采样策略旨在涵盖不同的栖息地类型。

真菌分离、鉴定与筛选

从土耳其七个地理区域收集的180个土壤样本中，分离出71株被形态学鉴定为Beauveria属的昆虫病原真菌。从不同地理区域选取了5株本土菌株（Ay1、Bey、Artv、Lul1和Den2）进行生物实验（表1）。使用Galleria诱饵法在7个地理区域的47个省份成功分离出真菌。该方法比土壤稀释法更有效，分离出60株菌株（占84.5%）。

讨论

本研究表明，从土耳其土壤中获得的本土Beauveria分离株对Leptinotarsa decemlineata第四龄幼虫具有显著的致病潜力，而这种害虫是马铃薯种植中的主要害虫，会导致严重的产量损失。通过Galleria诱饵法和土壤稀释法从生态多样的栖息地中收集的180个土壤样本中，有71株菌株被形态学鉴定为Beauveria属。其中5株本土菌株（Ay1、Bey、Artv、Lul1和Den2）被选用于进一步研究。

作者贡献声明

Meltem ULUSOY：撰写 – 审稿与编辑，撰写 – 原稿撰写，数据可视化，方法学设计，实验实施，数据分析，概念构建。Nevin Keskin：撰写 – 审稿与编辑，项目监督，资源协调，项目管理，方法学设计，资金申请，概念构建。

未引用参考文献

Dick等人，2007年。

披露声明

作者声明没有需要披露的相关财务或非财务利益。

利益冲突

作者声明没有利益冲突。

数据可用性

本研究期间生成和/或分析的数据集可应要求向相应作者索取。

资助

本研究得到了土耳其农业研究与政策总局（TAGEM）的支持（资助编号：TAGEM/15/AR-GE/10）。

利益冲突声明

作者声明没有可能影响本文工作的已知财务利益或个人关系。

致谢

作者感谢土耳其农业研究与政策总局（TAGEM）提供的财务支持（资助编号：TAGEM/15/AR-GE/10）。本研究是哈切特佩大学科学研究所生物系硕士论文的一部分。作者还要感谢丹麦哥本哈根大学的Nicolai V. Meyling教授，他慷慨提供了从USDA-ARS获得的Beauveria bassiana KVL03129（ARSEF 8032）菌株。