利用MassIVE和NPExtractor策略的组合，从Daphne Retusa Hemsl.中靶向分离具有抗银屑病活性的圭亚那型倍半萜类化合物

《European Journal of Medicinal Chemistry》：Targeted isolation of guaiane-type sesquiterpenoids from Daphne Retusa Hemsl. with anti-psoriasis activities using a combination of MassIVE and NPExtractor strategy

抗炎活性单萜类化合物分离及分子机制研究。从丹酚酸中分离出34种单萜类化合物，其中16种为新型桂烷型单萜。通过分子网络分析和NMR等手段确定结构，化合物5在免疫缺陷小鼠模型中显著抑制Psoriasis病理特征，其机制涉及类固醇生物合成调控RORγT信号通路。

　　

Jing-Xian Ren|Zi-Hao Ge|Shang-Tong Li|Shu-He Jia|Rong-Jiao Li|Chun-Ying Yang|Yuan-Qing Li|Wei-Yu Zhou|Yu-Yang Liu|Xiao-Xiao Huang|Ming Bai|Shao-Jiang Song

辽宁省计算化学基础天然抗肿瘤药物研究与发展重点实验室

摘要

银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病，其中炎症反应起着关键作用。Daphne属含有多种具有抗炎活性的次级代谢物，这使得可以从Daphne Retusa Hemsl中分离出具有抗炎活性的化合物。本文通过分子网络分析，从D. Retusa中分离出了16种前所未有的瓜烷型倍半萜（daphusanes A-P，编号1-16）以及18种已知的类似物（编号17-34）。化合物1-16的结构通过核磁共振（NMR）光谱分析、NMR和电子色谱（ECD）计算以及单晶X射线衍射得到了确定。所有分离出的化合物均对RAW264.7细胞进行了抗炎活性测试，并总结了这些倍半萜化合物的抗炎活性与结构之间的关系。值得注意的是，化合物5在咪喹莫特（imiquimod）诱导的银屑病小鼠模型中表现出显著的抗银屑病活性。代谢组学和Western blot实验结果表明，化合物5通过影响类固醇激素的生物合成进而调控RORγT信号通路来发挥抗银屑病作用。

引言

银屑病是一种免疫介导的炎症性疾病，其特征是红斑、角质形成细胞过度增殖和鳞状斑块的形成，影响全球约2-3%的人口[1],[2]。治疗银屑病的传统方法包括系统疗法（如依那西普、曲格列酮等）和局部用药（如蒽林、皮质类固醇和维生素D衍生物等）[3],[4]。然而，长期使用这些药物可能会产生副作用和药物相互作用[5],[6],[7]。因此，具有抗炎活性的天然产物越来越受到重视。 Daphne属包含超过90种植物，是桃金娘科（Thymelaeaceae）中植物种类最多的属[8]。从Daphne属中已分离出380多种天然产物，包括黄酮类、二萜类、倍半萜类、木脂素和香豆素[9]。在我们之前的研究中，Daphne属中的瓜烷型倍半萜显示出多种活性，包括对RAW264.7细胞的抗炎作用[10],[11]。这表明Daphne属植物可能是含有抗炎活性瓜烷型倍半萜的宝库。Daphne retusa Hemsl是一种广泛分布于东亚地区的药用植物[12]。在传统中医中，D. retusa因其抗炎作用而被用于治疗风湿病和关节痛[13]。因此，如何有针对性地分离出瓜烷型倍半萜成为我们研究的重点。 < />Daphne属倍半萜的MassIVE数据库。为了快速鉴定并指导从D. retusa中分离瓜烷型倍半萜，我们对D. retusa提取物的MS²数据进行了MassIVE数据库和NPextractor的分析[15]。 < />D. retusa中分离出了34种瓜烷型倍半萜，其中16种为新型化合物。此外，还通过咪喹莫特（IMQ）诱导的银屑病小鼠模型研究了化合物5的体内抗银屑病活性。

部分内容摘要

组分A和B的抗银屑病活性

< />D. Retusa的粗提物用乙酸乙酯（EtOAc）进行分离，随后用硅胶进一步分离得到组分A和B。为了确定哪个组分具有抗银屑病活性，使用IMQ诱导的Balb/c小鼠建立了银屑病模型。与对照组相比，IMQ组的背部皮肤组织出现明显的红斑、鳞屑和增厚现象，PASI评分也有所升高[16]。

结论

< />Daphne属倍半萜的MassIVE数据库，并利用MassIVE和NPExtractor的定位策略指导从D. retusa中分离倍半萜。在该策略的指导下，从D. retusa的地上部分分离出了16种新的瓜烷型倍半萜（daphusanes A-P，编号1-16）以及18种已知的倍半萜。它们的结构通过多种光谱技术得到了确定。

通用实验材料

<紫外光谱使用uv-2600i光谱仪（岛津公司，日本）进行测量。化合物的光学旋转角在mcp200数字旋光仪（anton paar gmbh，奥地利）上记录。电子色谱（ecd）光谱使用mos-450光谱仪（bio-logic science instruments，法国）进行测量。核磁共振（nmr）光谱使用bruker avance iii hd 600 mhz光谱仪（bruker biospin corp., 瑞士）记录。高分辨率质谱（hresims）数据则结合ultimate 3000>

CRediT作者贡献声明

利益冲突

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利益冲突声明

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致谢

< /><中国国家重点研发计划》（项目编号2024yfc3506600）、辽宁省人才振兴计划（编号xlyc2002066）、国家自然科学基金（编号32570470）、辽宁省科技规划项目（编号2021jh1>