通过补充蛋白质L-异天冬氨酰甲基转移酶来提高布法罗地区冷冻保存精子的质量与生育能力

《Andrology》：Enhancing Cryopreserved Sperm Quality and Fertility of Buffalo Through Protein L-Isoaspartyl Methyltransferase Supplementation

本研究探讨重组蛋白L-isoaspartyl甲基转移酶（rPIMT）对冷冻解冻精子质量的影响。通过免疫荧光、PCR、Western blotting等方法检测PIMT在男性生殖系统中的表达，并评估添加rPIMT至精液扩展剂（0.5、1.0、2.0 μg/80百万精子）后精子活力、顶体完整性和受精能力的变化。结果显示，2.0 μg组在精子前向运动、存活率、HOST反应及顶体完整性方面显著优于对照组（8.9%-13.0%提升），体外受精率提高2.32倍，证实rPIMT可修复氧化应激损伤的血浆蛋白，从而改善冷冻精子功能。

　　

摘要

背景

由于冻融过程，精子会因氧化应激而发生蛋白质修饰。随着对冻融精子中氧化修饰蛋白质了解的深入，研究向精液扩展剂中添加修复酶L-异天冬氨酰甲基转移酶（PIMT）对冻融精子质量的影响变得至关重要。

研究目的

研究PIMT在男性生殖器官（包括精液）中的表达情况，并评估重组PIMT（rPIMT）补充剂对冻融精子质量的影响。

材料与方法

通过免疫荧光检测、PCR和Western blotting技术研究PIMT的表达情况。通过HOST试验、活力检测、前向运动能力检测、顶体完整性检测以及 zona 结合试验来评估精子的功能。

结果

在男性生殖道的所有部位（包括精子）均检测到PIMT的存在，但在精浆中未检测到该蛋白。实验中，将rPIMT以0.5、1.0或2.0 μg/8000万精子的浓度添加到精液扩展剂中（分别为组II、组III和组IV），而对照组（组I）未添加rPIMT。结果显示，与对照组相比，组IV的前向运动能力提高了8.9%，活力提高了13.0%，HOST反应增强了11.9%，顶体完整性改善了11.8%。此外，使用CASA技术评估了冻融精子的运动参数（VCL、VAP、DSL、VSL、DAP、ALH和BCF），发现组IV的多数运动参数均优于组I、II和III。另外，组IV精子的体外受精能力约为对照组的2.32倍。

讨论与结论

冻融精子更好的功能特性和受精能力的显著提升与其质量密切相关。可以推测，rPIMT通过修复氧化损伤的精浆蛋白质来改善了精液的冷冻保存质量。

利益冲突

作者声明不存在任何利益冲突。