连翘苷A通过抑制氧化应激诱导的肝星形细胞活化及巨噬细胞极化，部分延缓了肝内胆管癌的进展

《BMC Biotechnology》：Forsythiaside A inhibits the progression of intrahepatic cholangiocarcinoma partially via suppressing oxidative stress-induced hepatic stellate cell activation and macrophage polarization

肝内胆管癌（ICC）的治疗研究：Forsythiaside A通过抑制氧化应激和M2型巨噬细胞极化发挥抗ICC作用

　　

摘要

背景

肝内胆管癌（ICC）是一种高度恶性的肿瘤。 Forsythiaside A（FA）已被证明具有显著的抗肝星形细胞（HSCs）激活作用。然而，其对ICC的具体作用机制仍不清楚。

方法

在C57BL/6小鼠中建立了ICC的皮下肿瘤模型，并将动物随机分为5组（每组24只）。对照组注射生理盐水，H?O?组注射含有40 μg H?O?的生理盐水。低/中/高剂量FA组分别注射含有40 μg H?O?+20/40/80 mg/kg FA的生理盐水。从小鼠的肝组织中分离出HSCs，从肿瘤组织中分离出原发性肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）。通过CCK-8检测细胞增殖情况，利用Western blot分析蛋白质表达。通过DCFH-DA染色检测ROS水平，结合JC-1染色通过流式细胞术检测线粒体膜电位。通过荧光素酶发光法检测线粒体ATP合成活性。通过免疫组化双重染色同时标记巨噬细胞和内皮细胞，以评估肿瘤转移微环境的密度。通过免疫荧光染色检测Mena侵袭（MenaINV）的表达。此外，还通过网络药理学分析了FA在治疗ICC中的作用机制。

结果

FA以剂量依赖的方式抑制了H?O?诱导的HSCs增殖以及激活标志物Wnt5a、α-SMA和COL1A1的表达水平。FA减轻了H?O?诱导的HSCs线粒体功能障碍，同时上调了PGC1α、TFAM、MFN2和OPA1的表达，同时降低了DRP1的表达。H?O?促进了巨噬细胞中M2极化标志物CD200R和CCL22的表达，增加了TMEM的密度和MenaINV阳性细胞的比率。FA干预以剂量依赖的方式逆转了这些效应。此外，FA还抑制了HSCs中TGF-β/Smad通路、PI3K/Akt通路和HIF-α通路的激活。

结论

FA至少部分通过抑制氧化应激诱导的HSCs激活和巨噬细胞M2极化来发挥抗ICC作用，为ICC的治疗提供了新的潜在策略。