miR-34c-3p 通过抑制 DCBLD2 对 PI3K/AKT 信号通路的激活，促进骨髓间充质干细胞（BMSCs）的成骨分化

《Journal of Molecular Histology》：miR-34c-3p promotes osteogenic differentiation of BMSCs by inhibiting DCBLD2 activation of the PI3K/AKT signaling pathway

DCBLD2通过调控miR-34c-3p/PI3K/AKT通路抑制骨髓间充质干细胞成骨分化，染色及分子实验证实DCBLD2过表达降低ALP和钙结节染色强度，下调OCN、Runx2等成骨标志物，同时激活PI3K/AKT通路，而miR-34c-3p靶向DCBLD2并促进其磷酸化。

　　

摘要

在骨骼代谢过程中，骨髓间充质干细胞（BMSCs）的成骨分化与骨骼形成、重塑和修复密切相关。作为I型跨膜蛋白，DCBLD2能够调节复发性多软骨炎，但其在BMSCs成骨分化中的作用仍不明确。本研究旨在探讨DCBLD2对BMSCs成骨分化的影响及其调控机制。使用人类间充质干细胞成骨分化培养基诱导BMSCs向成骨细胞分化。通过ALP染色和茜素红染色检测BMSCs的成骨分化情况，并通过生物信息学分析、RT-qPCR和Western blotting技术鉴定相关基因和蛋白质。利用AGO2-RIP和双荧光素酶报告基因实验检测miR-34c-3p与DCBLD2的结合情况。研究结果表明，在BMSCs成骨分化过程中，DCBLD2的表达水平下调。DCBLD2的过表达会抑制BMSCs的分化活性和矿化过程，同时降低OCN、OPN、Runx2和胶原蛋白I的表达，从而阻碍BMSCs的成骨分化。此外，在BMSCs成骨分化过程中，PI3K和AKT的磷酸化水平升高，而PI3K激活剂740 Y-P能有效逆转DCBLD2过表达对BMSCs成骨分化的抑制作用。相反，miR-34c-3p在BMSCs成骨分化过程中表达上调，并且与DCBLD2具有靶向结合关系。敲低DCBLD2的表达可部分减弱miR-34c-3p抑制剂的作用，促进BMSCs的分化。综上所述，miR-34c-3p通过抑制DCBLD2的表达来激活PI3K/AKT信号通路，从而促进BMSCs的成骨分化。