瑞格非尼（REG）及其代谢物药代动力学的UPLC-MS/MS分析新方法建立及其在药物相互作用研究中的应用

《Scientific Reports》：Development of a UPLC-MS/MS method and its application for the pharmacokinetic analysis of regorafenib in rats

本研究旨在开发一种可准确测定大鼠血浆中瑞格非尼（REG）及其代谢物M-2和M-5浓度的UPLC-MS/MS方法，以解决因个体血药浓度差异导致的不良反应或疗效不足问题，并评估曲美替尼（TRA）对其药代动力学的影响。方法经验证符合EMA指南，成功应用于大鼠药动学与药物相互作用研究。结果显示，TRA可显著升高REG和M-5的系统暴露量，降低M-2水平，为临床联合用药提供了重要实验依据。

　　

在抗击肝癌、胃肠道间质瘤和结直肠癌的战场上，瑞格非尼（Regorafenib, REG）作为一种多激酶抑制剂，是医生手中的重要武器之一。然而，这把“武器”的使用效果却因人而异，部分患者可能因血药浓度不足而疗效欠佳，另一些患者则可能因浓度过高而承受严重不良反应的折磨。这种个体间的巨大差异，让精准把控用药剂量变得至关重要。更复杂的是，在实际治疗中，患者往往会同时使用多种药物，这些药物之间可能产生“1+1>2”或“1+1<1”的相互作用，悄然改变着瑞格非尼在体内的旅程（即药代动力学过程），从而影响最终疗效与安全。因此，要解开个体化用药的密码，并厘清联合用药时的相互作用，首要任务就是拥有一双能在复杂生物样本中精准“看见”并“测量”瑞格非尼及其关键代谢物行踪的“火眼金睛”。这正是《科学报告》（Scientific Reports）上发表的这项研究致力于解决的问题。

为开展这项研究，作者团队首先建立并验证了一套基于超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）的定量检测方法。该方法用于测定大鼠血浆中瑞格非尼（REG）及其两个主要代谢产物：瑞格非尼N-氧化物（M-2）和N-去甲基瑞格非尼N-氧化物（M-5），并使用瑞格非尼D3作为内标。在技术应用层面，研究人员将这一经过验证的可靠方法，应用于后续的药代动力学及药物-药物相互作用研究中。

方法开发与验证

研究者成功建立了同时测定大鼠血浆中REG、M-2和M-5的UPLC-MS/MS方法。经验证，该方法对三者的定量线性范围分别为50–8000 ng/mL、25–2500 ng/mL和25–175 ng/mL。无论是日内还是日间的精密度与准确度（以CV%和偏差%表示）均小于15%。此外，该方法的提取回收率、基质效应及样品稳定性等关键指标均符合欧洲药品管理局（EMA）的生物分析方法指导原则要求。这些数据共同表明，该方法高效、可靠，适用于对大鼠血浆中REG及其代谢物进行准确定量分析。

药代动力学与药物相互作用研究结果

研究团队将上述方法应用于具体的药理学实验，以考察另一种药物曲美替尼（Trametinib, TRA）对REG及其代谢物药代动力学行为的影响。研究得出的数据揭示了一种显著的相互作用模式：

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  对于原形药物REG，在联合使用TRA后，其最大血浆浓度（C_max）和从零时到无穷时间的血药浓度-时间曲线下面积（AUC_0?∞，反映药物的总暴露量）分别大幅增加了375%和553%，且该变化具有统计学意义（p < 0.05）。
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  对于代谢物M-5，其C_max急剧增加了779%（p < 0.05），而AUC_0?∞也增加了482%（p > 0.05，此处p值大于0.05，说明AUC的增加在统计上未达到显著水平，但数值增幅很大，可能具有生物学意义）。
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  与之形成鲜明对比的是，对于另一个代谢物M-2，其C_max和AUC_0?∞在TRA存在下分别显著下降了52%和44%（p < 0.05）。

这项研究通过方法学创新与药理学应用相结合，得出了明确结论：研究团队成功建立了一种可靠、高效的UPLC-MS/MS方法，可用于精准监测大鼠体内瑞格非尼及其活性代谢物M-2和M-5的血浆浓度动态变化。更重要的是，应用该方法进行的相互作用研究首次揭示，共同给药曲美替尼会显著改变瑞格非尼及其代谢物的体内命运——它戏剧性地提高了原形药物REG和代谢物M-5的系统暴露水平，同时却抑制了代谢物M-2的生成与暴露。这一发现具有重要的转化医学意义。它提示临床医生，当考虑将瑞格非尼与曲美替尼或其他可能具有类似相互作用的药物联合用于癌症治疗时，必须高度警惕由此带来的血药浓度剧烈波动。这种波动可能将疗效与毒性的天平推向不可预测的方向。因此，该研究不仅提供了一套强大的生物分析工具，更为未来临床制定安全有效的联合用药方案、实现真正的个体化治疗提供了关键的实验数据与理论预警。