Diaporthe eres Nitschke（子囊菌门，Diaporthales目，Diaporthaceae科）是一种分布广泛的真菌，其宿主范围非常广泛，包括温带和亚热带地区的木本和草本植物[[1], [2], [3]]。根据环境和宿主条件的不同，它可以是病原体、内生菌或腐生菌，并与多种疾病相关，如茎溃疡、枝条枯死和果实腐烂[[4], [5], [6]]。长期以来，该物种被认为是一个分类学上的复合体，但分子系统发育研究重新定义了 D. eres sensu stricto 的分类地位，明确了其与几个先前归类为 Phomopsis 的属之间的关系[3,7]。
在应用多基因系统发育和遗传一致性方法后，Diaporthe 属经历了重大的分类修订，研究发现许多形态相似的属在遗传上实际上是不同的[1,3,7]。Dissanayake等人[3] 最近对这一属进行了全球性的重新评估，确认 D. eres 为该属的模式种，并证实它是一个在遗传上一致但在形态上多变的复合体，包含了许多先前被错误归类的名称。
在核桃（Juglans regia L.）中，D. eres 最近成为多个生产区域中的一种新兴病原体，据报道会导致溃疡和枝条枯死现象[[8], [9], [10]]。例如，在中国最近的研究中发现，该病原体还会导致枝条枯萎，从而导致果实大量脱落[11]。田间观察和致病性研究表明，D. eres 与Botryosphaeriaceae科的其他真菌共同作用，引起树干和枝条的枯死[[8]a; [12,13]]。虽然其致病性通常低于 Botryosphaeria dothidea 或 Neofusicoccum mediterraneum，但在有利的环境条件下或生理胁迫的宿主体内，D. eres> 可能会引起广泛的坏死[13,14]。
为了评估 D. eres 分离株的毒力及其与不同核桃品种的相互作用，进行致病性测试至关重要。目前已有多种方法用于木质组织的人工接种，包括使用菌丝塞、分生孢子悬浮液和伤口接种技术[8,12]。在榛子和葡萄上的比较试验表明，接种技术和所用植物组织的年龄或类型显著影响感染成功率和病斑严重程度[14,15]。然而，尽管在果园中检测到 D. eres 的频率不断增加，但针对 J. regia 的不同接种方法的系统评价仍然很少[10]。
López-Moral等人[12,13] 的最新研究表明，宿主基因型和组织年龄对核桃对 Diaporthe 和 Botryosphaeriaceae 科真菌的易感性有显著影响。他们的结果表明，一年生枝条特别容易受到感染，而品种间的病斑发展差异可能反映了不同的防御反应。Chen等人[8] 也发现接种技术显著影响症状表现和病原体存活率，这突显了制定标准化致病性试验方案的必要性。这些发现强调了评估方法变量对于获得可重复、可比数据的重要性。
基于这些背景，本研究旨在描述这种病原体，并比较评估三种接种方法——分别应用于绿色果实、当季枝条和休眠枝条——以评估 D. eres 对核桃的致病潜力。具体目标包括：(i) 通过多基因系统发育分析确认分离株的分类学身份；(ii) 确定最能模拟自然感染过程的接种方法；(iii) 量化七个土耳其主要品种间的宿主反应差异。这种综合的方法论框架为致病性评估提供了坚实的基础，并有助于更好地理解 D. eres 在核桃溃疡和枝条枯死发生中的流行病学意义。尽管多个分离株可以反映种内毒力变异，但本研究使用了两个地理上不同的分离株来建立土耳其 D. eres 种群的基线毒力数据。
