针对爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）EBNA1 DNA结合结构域的纳米抗体能够抑制肿瘤生长

《Journal of Nanobiotechnology》：Nanobodies targeting the Epstein-Barr virus EBNA1 DNA binding domain inhibit tumor growth

EBNA1-DBD特异性纳米抗体制备及抗肿瘤机制研究，通过酵母表面展示技术筛选高亲和力纳米抗体，抑制体外肿瘤细胞增殖及体内 xenograft 肿瘤生长，揭示四个结合位点中三个位于DNA结合界面，直接干扰EBNA1基因组功能。

　　

摘要

背景

Epstein-Barr病毒（EBV）编码的核抗原1（EBNA1）是一种关键的致癌蛋白，对于维持病毒潜伏状态、促进细胞永生化以及在EBV相关恶性肿瘤中驱动肿瘤发生至关重要。尽管其在发病机制中起着核心作用，但目前的治疗策略仍无法有效针对EBV的潜伏状态或由EBNA1驱动的致癌过程。EBNA1的DNA结合域（DBD）对其与病毒episomes和宿主染色质的相互作用至关重要，这使得基因组维持和转录调控成为可能。

结果

在这里，我们提出了一种基于高通量酵母表面展示的新筛选平台，用于识别对EBNA1-DBD具有高特异性和亲和力的纳米抗体。通过利用一个原始的纳米抗体库和迭代的互补决定区（CDR）突变技术，我们设计出了能够破坏EBNA1与DNA相互作用的纳米抗体。通过体外实验和异种移植肿瘤模型的功能验证表明，这些纳米抗体显著抑制了EBV阳性肿瘤细胞的增殖，并在体内抑制了肿瘤生长。表位图谱分析揭示了EBNA1-DBD上的四个不同结合位点，其中三个表位位于DNA结合界面附近，这表明它们直接干扰了EBNA1的基因组功能。

结论

本研究不仅建立了一种针对病毒致癌蛋白的稳健筛选方法，还强调了针对EBNA1-DBD的纳米抗体在治疗EBV相关癌症方面的治疗潜力。

图形摘要