一种新颖的固定相方法，用于提高大肠杆菌中重组蛋白的表达水平：超越指数生长阶段

《Microbial Cell Factories》：A novel stationary phase approach for improved recombinant protein expression in Escherichia coli: beyond the exponential phase

本研究通过葡萄糖诱导醋酸介导的生长停滞及色氨酸限制，构建了稳定期样生理状态，使融合人干扰素γ的绝对和相对表达量分别提升2.4倍和2.5倍，为高效重组蛋白生产提供了新策略。

　　

摘要

背景

大肠杆菌是研究重组蛋白表达的常用宿主菌株，通常在指数生长期进行诱导表达。然而，在静止生长期，营养物质耗尽和有毒物质的积累会对重组蛋白表达产生负面影响，从而限制了其高效生产蛋白质的能力。本研究旨在探索一种不同于传统策略的生理状态，通过在静止生长期研究重组蛋白表达来寻求补充方法。

结果

研究人员通过利用葡萄糖触发乙酸介导的生长停滞，并减少色氨酸的摄入以防止细胞再生，从而构建了一种非传统的静止生长状态。在这种条件下，信号肽与人干扰素γ（mCsn2-SP-hIFN-γ）融合蛋白的绝对表达和相对表达分别比在指数生长期诱导时提高了2.4倍和2.5倍。

结论

本研究结果表明，尽管静止生长期对重组蛋白生产不利，但利用葡萄糖仍有可能建立相应的静止生长模型来克服这些限制。总体而言，这些发现强调了细胞内代谢状态和表达时机在优化重组蛋白生产中的重要性。尽管本研究仅检测了一种蛋白质，但结果凸显了非传统静止生长状态作为提高重组蛋白表达有效新策略的潜力。