阿托伐他汀对内皮细胞炎症反应的剂量依赖性影响：MMP/TIMP平衡及体外伤口愈合实验

《BMC Molecular and Cell Biology》：Dose-dependent effects of atorvastatin on inflammatory response in endothelial cells: MMP/TIMP balance and in vitro wound closure assay

内皮细胞炎症反应中阿托伐他汀的剂量依赖性效应及MMP/TIMP平衡调控机制研究。

　　

摘要

背景

临床和临床前证据表明，炎症与多种动脉疾病密切相关。多项研究报道了他汀类药物对不同类型细胞的影响，然而阿托伐他汀（ATV）及其在炎症状态下对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）细胞反应的作用机制仍在进行研究中。本研究探讨了不同剂量的ATV如何影响炎症反应、细胞外基质（ECM）调节因子以及细胞迁移能力，这些通过脂多糖（LPS）刺激的内皮细胞的体外划痕伤口闭合实验来评估。

方法

将ATV以不同剂量（5-10-50 μM）应用于细胞，同时或不加入LPS（20 ng/mL）。在指定组中研究了细胞的增殖和毒性。随后，检测了ATV对MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达水平以及划痕闭合（细胞迁移）时间的可能影响。通过qPCR定量分析MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的基因表达，而蛋白质水平则通过Western blotting测定。细胞迁移情况通过划痕实验和实时成像系统进行评估。

结果

高剂量的ATV具有更强的细胞毒性，在LPS刺激下伤口闭合时间虽有增加，但未达到统计学显著性。低剂量的ATV增强了MMP和TIMP的表达，而高剂量处理则降低了TIMP-1的表达，并破坏了MMP/TIMP的平衡。这种失衡伴随着炎症应激下细胞恢复能力的下降。

结论

本研究强调了ATV在炎症条件下的复杂细胞效应，支持其在内皮细胞行为和基质调节中的剂量依赖性作用。这些发现突显了在针对血管炎症的治疗背景下优化剂量的重要性，并提供了关于他汀类药物剂量如何影响内皮细胞恢复机制的新见解，超出了其传统的胆固醇调节作用。

图形摘要

背景

临床和临床前证据表明，炎症与多种动脉疾病密切相关。多项研究报道了他汀类药物对不同类型细胞的影响，然而阿托伐他汀（ATV）及其在炎症状态下对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）细胞反应的作用机制仍在进行研究中。本研究探讨了不同剂量的ATV如何影响炎症反应、细胞外基质（ECM）调节因子以及细胞迁移能力，这些通过脂多糖（LPS）刺激的内皮细胞的体外划痕伤口闭合实验来评估。

方法

将ATV以不同剂量（5-10-50 μM）应用于细胞，同时或不加入LPS（20 ng/mL）。在指定组中研究了细胞的增殖和毒性。随后，检测了ATV对MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达水平以及划痕闭合（细胞迁移）时间的可能影响。通过qPCR定量分析MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的基因表达，而蛋白质水平则通过Western blotting测定。细胞迁移情况通过划痕实验和实时成像系统进行评估。

结果

高剂量的ATV具有更强的细胞毒性，在LPS刺激下伤口闭合时间虽有增加，但未达到统计学显著性。低剂量的ATV增强了MMP和TIMP的表达，而高剂量处理则降低了TIMP-1的表达，并破坏了MMP/TIMP的平衡。这种失衡伴随着炎症应激下细胞恢复能力的下降。

结论

本研究强调了ATV在炎症条件下的复杂细胞效应，支持其在内皮细胞行为和基质调节中的剂量依赖性作用。这些发现突显了在针对血管炎症的治疗背景下优化剂量的重要性，并提供了关于他汀类药物剂量如何影响内皮细胞恢复机制的新见解，超出了其传统的胆固醇调节作用。

图形摘要