通过网络药理学和实验验证研究Timosaponin BII对A/B型肠道病毒的抗病毒作用

《Virus Genes》：Investigating the antiviral effects of Timosaponin BII on enterovirus A/B via network pharmacology and experimental validation

Timosaponin BII对EV-A71和CVB3病毒的抗病毒活性及多靶点协同机制研究。采用系统药理学、细胞形态观察、CCK-8检测及蛋白质印迹分析，发现BII能显著抑制两种病毒复制（EC50分别为0.54和2.59 μM），降低病毒VP1 RNA表达及病毒蛋白水平，机制涉及多靶点协同调控。

　　

摘要

肠病毒A/B是一种重要的病原体，可引发多种人类疾病。目前，针对这些病毒的有效预防和治疗策略仍然有限。Timosaponin BII是一种天然产物的活性成分，具有潜在的抗氧化和抗炎特性。本研究旨在探讨Timosaponin BII的抗病毒活性并阐明其作用机制，从而为开发新型广谱抗肠病毒药物提供科学依据。首先，采用系统药理学方法确定Timosaponin BII的潜在作用靶点并预测其作用机制。随后，在缺乏干扰素的Vero细胞中通过观察细胞形态和CCK-8测定法验证了其对代表性肠病毒A/B株（分别为EV-A71和CVB3）的抗病毒活性。最后，在非缺乏干扰素的HeLa细胞中通过时间进程药物添加实验评估了其对病毒复制的抑制作用，并通过Western Blot检测了其对病毒蛋白的抑制效果。结果显示，Timosaponin BII在细胞水平上对肠病毒A和B具有显著的抗病毒活性，感染48小时后其对EV-A71的EC₅₀值为0.54 μM，对CVB3的EC₅₀值为2.59 μM。定量实时PCR（qRT-PCR）分析表明，同时接受Timosaponin BII处理和病毒感染的组中EV-A71和CVB3病毒VP1 RNA的水平低于仅接受病毒感染的组。Western Blot结果证实Timosaponin BII能够降低病毒蛋白的表达水平。Timosaponin BII作为一种潜在的广谱抗病毒药物，对EV-A71和CVB3均表现出抗病毒活性，其抗病毒机制可能涉及多个靶点和信号通路的协同作用。