转录因子HOXA4通过激活KIF11的转录作用，促进HBV（乙型肝炎病毒）的复制以及肝细胞癌（hepatocellular carcinoma）的增殖

《In Vitro Cellular & Developmental Biology - Animal》：Transcription factor HOXA4 promotes HBV replication and hepatocellular carcinoma proliferation by activating KIF11 transcription

KIF11基因通过HOXA4转录因子调控HBV相关肝癌的增殖和病毒复制，为新型基因治疗提供依据。

　　

摘要

KIF11是一种有丝分裂动力蛋白，负责双极纺锤体的形成和维持，在肝细胞癌（HCC）中表达水平较高。然而，KIF11基因在乙型肝炎病毒（HBV）相关HCC中的作用尚不清楚。因此，本研究旨在探讨转录因子HOXA4与KIF11在HBV相关HCC中的结合机制，以期为其治疗提供新的基因疗法方法。研究使用了HBV阳性（HepG2.2.15细胞）和HBV阴性（HepG2细胞）肝癌细胞来检测KIF11和HOXA4的表达情况。HepG2细胞或HepG2.2.15细胞被转染pc3.1-HBx、si-KIF11和si-HOXA4，或同时转染si-HOXA4和oe-KIF11以进行后续分析。通过ChIP实验检测HOXA4蛋白与KIF11基因启动子的结合情况。使用CCK-8和流式细胞术评估HepG2.2.15细胞和HepG2细胞的生物学特性。通过Northern印迹和Southern印迹检测HBV的转录和复制水平。通过ELISA测定HepG2.2.15细胞上清液中HBV抗原的分泌水平。结果显示，HepG2.2.15细胞中KIF11和HOXA4的表达量较高。沉默KIF11可抑制细胞存活率、HBV复制和转录，降低细胞上清液中的HBsAg和HBeAg水平，促进细胞凋亡，并下调HepG2.2.15细胞中的p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达。pc3.1-HBx可促进细胞存活率，抑制细胞凋亡，并上调HepG2细胞中的p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达，这一效应可被si-KIF11逆转。ChIP实验证实HOXA4确实与KIF11基因启动子结合。沉默HOXA4可抑制细胞存活率、HBV复制和转录，降低细胞上清液中的HBsAg和HBeAg水平，增强细胞凋亡，并下调HepG2.2.15细胞中的p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达。在同时转染pc3.1-HBx的HepG2细胞中，沉默HOXA4也会抑制细胞存活率、促进细胞凋亡并下调p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达。KIF11的过表达可抵消si-HOXA4在HepG2.2.15细胞或pc3.1-HBx转染的HepG2细胞中的作用。综上所述，沉默HOXA4可通过下调KIF11来抑制HBV复制和HCC增殖，为HBV相关HCC提供一种新的基因辅助治疗策略。

KIF11是一种有丝分裂动力蛋白，负责双极纺锤体的形成和维持，在肝细胞癌（HCC）中表达水平较高。然而，KIF11基因在乙型肝炎病毒（HBV）相关HCC中的作用仍不清楚。因此，本研究旨在探讨转录因子HOXA4与KIF11在HBV相关HCC中的结合机制，以期为其治疗提供新的基因疗法方法。研究使用了HBV阳性（HepG2.2.15细胞）和HBV阴性（HepG2细胞）肝癌细胞来检测KIF11和HOXA4的表达情况。HepG2细胞或HepG2.2.15细胞被转染pc3.1-HBx、si-KIF11和si-HOXA4，或同时转染si-HOXA4和oe-KIF11以进行后续分析。通过ChIP实验检测HOXA4蛋白与KIF11基因启动子的结合情况。使用CCK-8和流式细胞术评估HepG2.2.15细胞和HepG2细胞的生物学特性。通过Northern印迹和Southern印迹检测HBV的转录和复制水平。通过ELISA测定HepG2.2.15细胞上清液中HBV抗原的分泌水平。结果显示，HepG2.2.15细胞中KIF11和HOXA4的表达量较高。沉默KIF11可抑制细胞存活率、HBV复制和转录，降低细胞上清液中的HBsAg和HBeAg水平，促进细胞凋亡，并下调HepG2.2.15细胞中的p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达。pc3.1-HBx可促进细胞存活率，抑制细胞凋亡，并上调HepG2细胞中的p-PI3K/PI3K和p-AKT蛋白表达，这一效应可被si-KIF11逆转。ChIP实验证实HOXA4确实与KIF11基因启动子结合。沉默HOXA4可抑制细胞存活率、HBV复制和转录，降低细胞上清液中的HBsAg和HBeAg水平，增强细胞凋亡，并下调HepG2.2.15细胞中的p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达。在同时转染pc3.1-HBx的HepG2细胞中，沉默HOXA4也会抑制细胞存活率、促进细胞凋亡并下调p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT蛋白表达。KIF11的过表达可抵消si-HOXA4在HepG2.2.15细胞或pc3.1-HBx转染的HepG2细胞中的作用。综上所述，沉默HOXA4可通过下调KIF11来抑制HBV复制和HCC增殖，为HBV相关HCC提供一种新的基因辅助治疗策略。