对经冻干处理的银叶木（Croton argenteus）水乙醇提取物在杀虫、抗氧化及毒理学方面针对埃及伊蚊（Aedes aegypti）的初步评估

《Biocatalysis and Agricultural Biotechnology》：PRELIMINARY EVALUATION OF THE LARVICIDAL, ANTIOXIDANT, AND TOXICOLOGICAL ACTIVITY OF THE LYOPHILIZED HYDROETHANOLIC EXTRACT OF CROTON ARGENTEUS AGAINST AEDES AEGYPTI.

本研究评估了巴西紫薇（Croton argenteus）芽的冷冻干燥水乙醇提取物（LHEC）的化学成分、抗氧化活性及对埃及伊蚊幼虫的杀灭活性。通过HPLC检测到主要成分为槲皮素、水杨酸、咖啡因和香豆素，总酚和黄酮含量分别为229.13和28.12 mg/g。LHEC在24小时内幼虫死亡率超过90%，48小时达100%，且小鼠急性毒性测试显示LD50>2000 mg/kg，表明其安全性和潜在应用价值。

　　

Rafaela Brito Ribeiro Santos | Isabelly Domiciano Santos Guimar?es | Yane Neves Valadares | Joane Cristina Costa Pereira | Daniel Lobo Sousa | Widarlane ?ngela da Silva Alves | Debora Cardoso da Silva | Simone Andrade Gualberto | Eduardo Carvalho Lira | Janaina Silva Freitas

巴西巴伊亚州西南部州立大学（UESB）环境科学研究生项目（PPGCA），地址：BR 415，Km 03，Itapetinga，BA 45700-000，巴西

摘要

控制埃及伊蚊（Aedes aegypti）主要依赖于合成化学杀虫剂，但这些杀虫剂会对环境产生不利影响，并导致蚊子种群产生抗药性。本研究评估了Croton argenteus芽的冻干乙醇提取物（LHEC）对埃及伊蚊的植物化学成分、抗氧化活性以及初步的杀虫活性，并描述了蚊子幼虫的形态变化以及小鼠的急性口服毒性。乙醇提取物是通过 exhaustive percolation 方法制备的。对次级代谢物进行了体外筛选，并采用了反相高效液相色谱法（HPLC）进行分析。抗氧化活性通过铁还原抗氧化能力（FRAP）测定法进行评估。在杀虫实验中，将埃及伊蚊幼虫（Rockefeller 菌株）暴露于不同浓度的 LHEC 中，并在立体显微镜下观察其形态变化。LHEC 的急性毒性在 35 只小鼠身上进行了测试。LHEC 提取物中检测到了黄酮类、皂苷、生物碱、酚类和单宁。色谱分析鉴定出没食子酸、香豆素、槲皮素和儿茶素。总酚类和黄酮类的含量分别为 229.13 mg GAE.g^?1 和 28.12 mg QE.g^?1，抗氧化活性为 9.29 mg Fe^2+}

24 小时内幼虫死亡率超过 90%，48 小时内达到 100%。埃及伊蚊幼虫表现出明显的形态变化。急性口服毒性试验表明，LHEC 提取物的半数致死剂量（LD₅₀）大于 2,000 mg.kg^?1。LHEC 提取物对埃及伊蚊具有杀虫效果，在急性口服毒性试验中未观察到小鼠出现不良反应（符合 OECD 423 标准），这为进一步研究（如重复剂量试验）提供了依据，以确保其安全性。

引言

埃及伊蚊（Ae. aegypti）是登革热病毒（DENV）、寨卡病毒（ZIKV）和基孔肯雅病毒（CHIKV）的主要传播媒介（Santos 等，2023；Sharifrazi 等，2023）。这种蚊子及其传播的病毒主要分布在热带和亚热带地区，其扩散与社会环境因素密切相关。这些虫媒病毒在巴西是一个重大的公共卫生问题，预防和控制工作依然具有挑战性，例如 2010 年、2013 年、2015 年、2016 年和 2024 年的疫情中，全国记录了约 620 万例病例和 4,269 例死亡病例（巴西，2016；Kantor，2018；卫生部，2024；Silva 等，2023）。目前累计病例数为 1,584,612 例，其中 742 例仍在调查中（巴西，2025）。

根据泛美卫生组织（2025）的数据，控制埃及伊蚊的主要方法之一是使用合成杀虫剂。目前最常用的杀虫剂包括：有机磷类（如敌敌畏）用于水体中的杀虫，以中断蚊子的生命周期；拟除虫菊酯类（如氯氰菊酯）用于空间喷洒或家庭应用；氨基甲酸酯类（如吡丙醚）用于残留处理；以及近年来出现的昆虫生长抑制剂（Campos 等，2023；Nurul-Nastasea 等，2023；Wang 等，2023a）。然而，这些化合物的频繁使用对环境和人类健康有负面影响，同时还会导致蚊子产生抗药性，因此亟需开发危害较小且更具选择性的杀虫剂（Davila-Barboza 等，2024；Oliveira 等，2017）。

2023 年，巴西国家卫生监督局（ANVISA）批准了一种针对四种登革热病毒血清型（DENV-1、DENV-2、DENV-3 和 DENV-4）的有效疫苗。然而，目前尚无针对寨卡病毒或基孔肯雅病毒的疫苗（Lessa 等，2023）。需要有效的蚊虫控制方法来减少这些虫媒病毒的传播。因此，植物源杀虫剂提供了一种额外的解决方案，当与其他控制策略结合使用时，有助于管理埃及伊蚊及其他蚊种。

关于植物源杀虫剂、杀虫剂和驱虫剂的研究已经取得进展，显示出对埃及伊蚊幼虫和成虫阶段的高效性（Pratheeba 等，2019；Vivekanandhan，2025；Wang 等，2023b）。这些基于植物提取物和精油的制品对蚊子的所有发育阶段都有效（Hillary 等，2024；Vivekanandhan，2025；Yagoo 等，2023）。此外，研究表明植物来源的化合物具有快速的环境降解性，对非目标生物的毒性较低，并且可以纳入综合害虫管理计划（Daraban 等，2023；Isman，2020）。

许多植物种类产生的次级代谢物具有驱虫和杀虫作用，能够保护植物免受食草动物的侵害（Nasir 等，2022）。针对Croton属植物的研究显示，这些化合物对埃及伊蚊具有杀虫活性（Carvalho 等，2023），包括C. urucurana Baill（Nogueira 等，2023）、C. betaceus Baill.、C. lundianus (Didr.) Müll. Arg.（da Silva 等，2020）和C. tetradenius Baill.（Silva 等，2023）。Croton属植物中次级代谢物的治疗潜力引起了研究兴趣，并具有显著的经济价值（Nogueira 等，2023）。

C. argenteus L. 在巴西被称为“velame da lagoa”，分布于新热带地区，原产于北美洲和南美洲多个国家。在巴西，它的地理分布范围涵盖了亚马逊雨林、大西洋森林、塞拉多草原和卡廷加灌木丛生物群落（巴西植物志，2018；Rojas-Sandoval，2016）。根据 Rech 等（2015）的研究，C. argenteus的粗乙醇提取物能够延缓Senna occidentalis幼苗的发芽和生长；Rodríguez 等（2006）的研究则发现了其中的生物碱、黄酮类和其他化学成分。因此，关于C. argenteus的详细化学成分和生物活性潜力仍存在知识空白，尤其是在卫生相关应用方面。

本研究的目的是评估C. argenteus芽的冻干乙醇提取物（LHEC）对埃及伊蚊的植物化学成分、抗氧化活性以及初步的杀虫活性，并描述蚊子幼虫的形态变化及小鼠的急性口服毒性。

植物材料

C. argenteus样本采集于 2022 年 7 月的巴西巴伊亚州 Contendas do Sincorá 国家森林（FLONA）（坐标：13°56′15.6″S, 41°06′44.4″W），采集工作由 Guadalupe Edilma Licona de Macedo 博士负责，并将样本存放在巴伊亚州西南部州立大学（UESB）的标本馆（凭证编号：15149）。植物材料的采集和使用符合国际和国家生物多样性法规。

LHEC 的植物化学成分分析和色谱分析

LHEC 的初步植物化学分析发现了黄酮类、皂苷、酚类、缩合单宁和生物碱（表 1）。

高效液相色谱（HPLC）分析确定没食子酸、儿茶素和槲皮素是 LHEC 的主要成分（图 1）。

没食子酸、儿茶素和槲皮素的标准色谱和分析参数见表 2。其中儿茶素的浓度最高（4.97 mg.g^?1）。

讨论

与纯溶剂相比，使用乙醇溶剂提取化合物有利于酚类和黄酮类的提取，因为乙醇的极性适中，能够溶解更多具有生物活性的代谢物（Dirar 等，2019；Upton 等，2020）。研究表明，乙醇提取物通常含有更高的酚类含量和更强的生物活性。

结论

LHEC 在测试浓度下对埃及伊蚊表现出初步的杀虫效果。植物化学分析发现了黄酮类、皂苷、酚类、缩合单宁、生物碱、没食子酸和儿茶素等具有明确杀虫特性的化合物。LHEC 具有显著的抗氧化活性以及较高的总酚类和黄酮类含量。在大鼠实验中未观察到毒性迹象，这表明需要进一步测试以确认其安全性。

CRediT 作者贡献声明

Rafaela Brito Ribeiro Santos：撰写初稿、数据可视化、方法验证、实验设计、资金获取、数据分析、概念构思。 Isabelly Domiciano Santos Guimar?es：方法设计、实验设计、数据分析。 Janaina Silva Freitas：审稿与编辑、撰写初稿、数据可视化、实验监督。 Simone Andrade Gualberto：审稿与编辑、撰写初稿、数据可视化。

未引用参考文献

Abe 等，2007；巴西植物志，2018；Consoli 和 Oliveira，1994；de Oliveira 等，2022；Narayanaswamy 等，2014；Oliveira 等，2013；泛美卫生组织/世界卫生组织，2025；Silva 等，2020；Sutiningsih 等，2018；Warikoo 和 Kumar，2013。

利益冲突声明

作者声明没有已知的经济利益或个人关系可能影响本文的研究结果。

资助

本研究得到了巴西高等教育人员培训协调机构（CAPES）的硕士奖学金支持（2022–2024 年）。

利益冲突声明

? 作者声明没有已知的经济利益或个人关系可能影响本文的研究结果。