从细叶欧瑞索兰（Eurysolen gracilis）的根中发现了九种此前未被描述的免疫抑制性萜类化合物，属于恩特-拉布丹烷（ent-labdane）类二萜结构

《Phytochemistry》：Nine previously undescribed immunosuppressive ent-labdane diterpenoids from the roots of Eurysolen gracilis

从滇南石梓根中分离并鉴定了9个新型ent-labdane型二萜类化合物，包括两种首报的18(4→3)-abeo-ent-labdane衍生物，通过核磁共振、高分辨质谱及单晶X射线分析确证结构，其中化合物1和2对干扰素-γ产生及T细胞增殖抑制活性显著，IC50值分别为6.30-15.03 μM。

　　

林琳·滕（Lin-Lin Teng）| 刘彦春（Yan-Chun Liu）| 肖朝江（Chao-Jiang Xiao）| 程淑禧（Shu-Xi Jing）| 李德森（De-Sen Li）| 徐冉（Ran Xu）| 李晓年（Xiao-Nian Li）| 刘燕（Yan Liu）| 李胜红（Sheng-Hong Li）

中国科学院昆明植物研究所植物化学与天然药物国家重点实验室及云南省天然药物化学重点实验室，中国昆明 650201

摘要

通过对Eurysolen gracilis（唇形科）根部的详细植物化学研究，分离出了9种先前未描述的ent-labdane二萜类化合物（1–9），其中包括两种全新的18(4→3)-abeo-ent-labdane型二萜类化合物（7和8）。通过广泛的光谱表征（1D/2D NMR、HR-ESI-MS）和单晶X射线衍射分析，明确了这些化合物的结构。所有化合物均在体外评估了其免疫抑制活性。值得注意的是，化合物1和2显示出对IFN-γ生成和T细胞增殖的抑制作用，IC₅₀值介于6.30至15.03 μM之间。

引言

萜类化合物是自然界中最大且结构最多样化的天然产物之一，目前已鉴定出超过80,000种化合物（Christianson, 2017）。这些代谢物普遍存在于各种物种中，尤其是在植物中，表现出广泛的生物活性。Labdane二萜类化合物是其中的主要亚群，主要分布在唇形科、菊科、马鞭草科、大戟科以及眼子菜科的水生植物中（Peters, 2010; Cangiano et al., 2001; Cangiano et al., 2002）。著名的例子包括从Andrographis paniculata中分离出的强效抗菌和抗炎成分andrographolide（Kumar et al., 2004），以及具有降压作用、正性肌力作用和抑制血小板聚集作用的forskolin，它最初来自Coleus forskohlii（De et al., 1983）。

Eurysolen gracilis Prain是唇形科中的一个单型属，分布于中国西南部、印度、缅甸和马来西亚。哈尼族的传统药理学记录显示，其根部被用于治疗月经失调和闭经（Company, 1994; Jia and Li, 2005; Wu and Li, 1977）。在我们的研究之前，尚未有关于该物种的植物化学研究报道。我们对其地上部分的初步研究表明，存在两种全新的五环C₂₅倍半萜类化合物，它们含有大环醚结构（Teng et al., 2021）。有趣的是，我们的研究小组发现，与其系统发育相关的唇形科物种Leucosceptrum canum能够产生大量先前未描述的生物活性萜类化合物（Guo et al., 2019; Luo et al., 2012; Luo et al., 2013; Luo et al., 2014; Luo et al., 2011）。基于这些发现，我们进一步研究了E. gracilis的根部，成功分离并阐明了其成分的结构（利用1D/2D NMR、HR-ESI-MS和X射线晶体学分析），并对其生物合成途径和生物活性进行了研究。

化合物1-9的鉴定

化合物1为无色油状物，其分子式通过HR-ESI-MS确定为C₂₀H₂₆O₅（m/z 369.1670 [M+Na]⁺，计算值369.1672），表明含有8个不饱和键。¹H NMR数据分析（表1）显示在δ_H 0.91 (s)、0.94 (s)和1.17 (s)处有三个甲基单峰。在δ_H 7.18 (br s)、5.26 (t, J = 7.3 Hz)和6.37 (br s)处共振的三个质子可能与烯烃或含氧碳相关。¹³C NMR和HSQC分析进一步确认了这些质子的存在。

结论

总结来说，从中国云南省德宏地区采集的Eurysolen gracilis根部分离出了9种先前未描述的ent-labdane二萜类化合物（1–9）。通过包括1D/2D NMR和HR-ESI-MS在内的综合光谱分析，以及使用Cu Kα辐射的单晶X射线衍射，明确了这些化合物的结构。其中，化合物1和2表现出显著的免疫抑制活性，能够选择性地抑制...

一般实验方法

柱层析（CC）使用硅胶（200–300目，青岛海洋化工厂，中国青岛）、Sephadex LH-20（20–100 μm，Amersham Pharmacia Biotech，瑞典）和MCI gel CHP–20P（70–150 μm，三菱化学公司，日本东京）进行。标准薄层色谱（TLC）使用硅胶（GF254，10–40 μm，青岛海洋化工厂）。TLC斑点在紫外光下观察，并用5% H₂SO₄在EtOH（v/v）中喷洒后显色。

CRediT作者贡献声明

李德森（De-Sen Li）：研究工作及正式数据分析。 徐冉（Ran Xu）：数据管理。 肖朝江（Chao-Jiang Xiao）：验证、研究工作。 程淑禧（Shu-Xi Jing）：撰写、审稿与编辑。 林琳·滕（Lin-Lin Teng）：撰写初稿、方法学研究、数据分析、数据管理。 刘彦春（Yan-Chun Liu）：研究工作。 李胜红（Sheng-Hong Li）：撰写、审稿与编辑、项目监督、资金筹集、概念构思。 李晓年（Xiao-Nian Li）：正式数据分析。 刘燕（Yan Liu）：撰写、审稿与编辑、项目监督、资金筹集。

未引用的参考文献

De Souza et al., 1983.

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究结果。

致谢

本工作得到了国家自然科学基金（U24A20806、U23A20510）、中国科学院的战略优先研究计划（XDB1230000）、云南省自然科学基金（202401BC070016、202402AA310219、202504BW050004）、西部植物化学与植物资源国家重点实验室（P2022-ZZ05、P2022-ZZ10）以及云南省科学技术厅（202305AH340005）的财政支持。