在384孔板上进行的高通量抗菌效果测试

《World Journal of Microbiology and Biotechnology》：High-throughput antimicrobial efficacy tests on a 384PillarPlate

ATP生物发光技术结合384PillarPlate平台实现高通量抗菌检测，替代传统菌落计数法。通过测定活菌ATP水平构建抑菌曲线，验证Acticide LG和MBR2的IC50值及微生物灭活效果，九种洗碗液配方（含新鲜及储存8周样本）的log值与T-AET高度相关（98%灵敏度）。该方法显著降低试剂用量，缩短检测周期，但特异性受限（44%）与样本营养及阴性对照不足相关，仍为消费品防腐开发提供高效解决方案。

　　

摘要

为了防止产品在消费者多次使用过程中受到微生物污染，通常会在家用和个人护理产品（如洗洁精）中添加防腐剂，包括抗菌化合物。传统的抗菌效果测试（T-AET）依赖于菌落计数方法，即将含有微生物的混合物接种到含有防腐剂的产品中，然后将其接种在琼脂板上以测量微生物的存活情况。尽管T-AET被视为金标准，但它耗时、劳动强度大、成本高，并且由于手动操作容易出现变异和误差。为了解决这些局限性，我们利用384PillarPlate平台开发了一种高通量、微型化的基于ATP的芯片上抗菌效果测试（O-AET）技术。将Pseudomonas aeruginosa、Enterobacter cloacae和Staphylococcus aureus包裹在3%的琼脂糖中，并使其接触测试化合物和洗涤剂配方。通过BacTiter-Glo?发光测定法量化存活微生物中的ATP水平，从而生成剂量-反应曲线、IC₅₀值和对数减少量。评估了两种工业抗菌剂Acticide LG和Acticide MBR2，其CV值均低于8%。测试了来自Colgate-Palmolive的九种洗涤剂配方，包括新鲜样品和储存8周（40°C）后的老化样品。O-AET的对数减少数据与T-AET的结果具有很强的相关性。以3-log减少为临界值时，O-AET的灵敏度达到98%，特异性为44%，总体预测性为71%。较低的特异性部分归因于使用的真实阴性样本数量有限以及营养成分不足。O-AET显著减少了试剂用量，提高了检测速度，并且与标准平板读数仪兼容，使其具有成本效益和可扩展性。这种基于ATP生物发光的平台为T-AET提供了一种稳健、可重复且高通量的替代方案，在消费品护理应用中具有简化产品开发和防腐剂筛选的巨大潜力。

图形摘要