从Paratinospora sagittata (Oliv.) Wei Wang的块根中提取的免疫调节性克莱罗丹二萜类化合物

《Bioorganic Chemistry》：Immunomodulatory clerodane diterpenoids from the tuberous roots of Paratinospora sagittata (Oliv.) Wei Wang

从帕拉丁诺斯草根中分离出10种新clerodane型二萜（1-10）及13个已知类似物（11-23），通过光谱、计算及单晶X射线确定结构。化合物4显著促进T/B淋巴细胞增殖并抑制凋亡，机制涉及PD-1和TIM-3等免疫检查点调控。

　　

张俊生|徐德峰|吕辉|王明华|鲍杰|尹春来|张华

中国济南大学生物科学技术学院

摘要

从Paratinospora sagittata（Oliv.）Wei Wang）的块根中分离出了10种新的 Clerodane 类二萜化合物（paratinosanoids A-J（1?10），其中包含一种罕见的含氮衍生物（1），以及13种已知的类似物（11?23）。这些新化合物的结构，包括其绝对构型，通过光谱学和计算方法以及单晶X射线衍射技术得到了阐明。所有二萜化合物均被检测了对免疫细胞的影响，其中某些化合物能够促进T细胞和B细胞的增殖。化合物4表现出最强的活性，并能有效抑制淋巴细胞凋亡。进一步的研究表明，化合物4不仅显著改变了各种T细胞和B细胞亚群的比例，还下调了关键的免疫检查点，包括PD-1和TIM-3，这表明其在开发新型免疫疗法方面具有潜在价值。

引言

免疫调节天然产物被广泛用于治疗多种病理状况，包括自身免疫疾病、炎症性疾病和恶性肿瘤。由于与合成替代品相比具有成本效益和更好的安全性，这些化合物在近几十年来受到了广泛的治疗关注[1]、[2]、[3]。作为著名的免疫调节剂，二萜化合物在天然化合物中脱颖而出，因为它们在植物化学研究中具有明确的生物活性[4]、[5]。

Paratinospora sagittata（Oliv.）Wei Wang在中医中被称为“金果兰”，其治疗作用已被正式列入《中国药典》，具有解热、解毒、抗炎和镇痛作用[6]。此外，P. sagittata及其近缘物种在东南亚也被广泛用作民间药物，因其具有免疫调节作用[7]、[8]。许多研究表明，这些药用植物具有广泛的免疫调节活性，大多数研究集中在其粗提取物的作用上[9]、[10]。本研究是我们持续寻找具有免疫调节活性的萜类化合物的努力的一部分，对P. sagittata的块根进行了植物化学分析。共分离出了10种以前未描述过的Clerodane 类二萜化合物及其13种类似物。这些化合物的结构鉴定主要通过光谱分析、ECD/NMR计算和单晶X射线衍射完成。部分化合物对T细胞和B细胞表现出免疫调节作用，还对最活跃的化合物4进行了初步的机制研究。本文详细描述了这些化合物的分离过程、结构鉴定、免疫调节活性及其潜在机制。

实验部分

一般实验程序

使用的仪器和试剂与我们之前的报告[11]中描述的相同。详细信息见支持信息。

植物材料

P. sagittata的块根于2018年8月在中国云南省景洪市采集。该植物材料由山东中医药学院的叶国华教授进行了鉴定。一份凭证标本已存放在济南大学生物科学技术学院（存档编号：

结果与讨论

化合物1是一种白色固体，其分子式为C₂₁H₂₅O₆N，通过HR-ESIMS离子测得质荷比m/z为388.1754 [M+H]⁺（C₂₁H₂₆NO₆⁺的计算值为388.1755），表明含有十个不饱和度（DOUs）。1的¹H NMR谱显示有两个烯烃质子（δ_H 7.04和6.82）、一个甲氧基（δ_H 3.74）、两个甲基单峰（δ_H 1.37和1.22）以及一系列脂肪族多重峰。通过¹³C和DEPT¹³⁵ NMR实验，21个碳共振峰被鉴定为四个酯羰基。

作者贡献声明

张俊生：撰写初稿、获取资金、概念构思。徐德峰：验证、实验研究。吕辉：资源提供。王明华：数据可视化。鲍杰：资金获取。尹春来：实验研究、概念构思。张华：撰写、审稿与编辑、监督。

利益冲突声明

作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究结果。

致谢

作者感谢国家自然科学基金（编号：82304336）和山东省高等学校青年创新科技项目（编号：2022KJ096）的支持。