《Methods》：Clinical assessment of the diagnostic performance of the LIAISON? Legionella urinary antigen assay
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Legionella尿液抗原检测LIAISON?试验性能评估显示其特异性100%、敏感性97%，与现有CE认证方法等效，证实该化学发光免疫分析法通过双抗原检测（LPS和PAL）提升检测灵敏度与特异性，适用于疑似肺炎患者快速诊断。
Jessica Cusato|Giorgia Menegatti|Monica Ravotto|Andrea Pighini|Francesco Capuano|Du?an Pícha|Gianluca Bianco|Camilla Martino|Marco Simiele|Antonio D’Avolio
意大利都灵大学医学科学系
摘要
嗜肺军团菌是导致军团病的主要病原体，军团病是一种严重的肺炎。虽然培养仍是诊断的金标准，但其较长的检测时间限制了其临床实用性。快速检测方法（如尿抗原检测）可以改善检测的及时性。LIAISON?军团菌尿抗原检测是一种新型化学发光免疫测定法，用于检测尿液中的可溶性军团菌抗原。本研究评估了该方法的性能，并将其与现有的CE认证抗原检测方法进行了比较。
样本来自六个外部实验室，使用LIAISON检测方法和相应的对比方法进行了单独分析。
LIAISON检测方法的表现与参考方法相当，显示出100%的诊断特异性和97%的敏感性——在统计上与宣称的98%相当。值得注意的是，有四个样本在不同检测方法之间出现了结果差异，这突显了军团菌感染的诊断复杂性。还进行了接收者操作特征（ROC）分析，以确定最佳阈值并确认检测的临界值。LIAISON检测的结果与基于共识标准的预期结果进行了比较。
总体而言，研究结果表明，LIAISON?军团菌尿抗原检测方法在现实环境中对疑似肺炎患者的尿液样本中嗜肺军团菌和长滩军团菌抗原的定性检测具有可靠的临床性能。
引言
军团菌是一种革兰氏阴性细菌，存在于淡水环境（如湖泊或河流）中，也存在于人造水系统中，对人类健康构成重大威胁[1]。通常，军团菌通过受污染的水源（包括热水浴缸或空调系统）以气溶胶形式被吸入[2]。
嗜肺军团菌是该属中最常见的菌种，可引起军团病，这是一种严重的肺炎[3]。军团病的症状与其他类型的肺炎相似，可能导致诊断不足。一旦吸入，细菌会在肺部积聚，引起高烧、寒战、咳嗽、呼吸急促、肌肉疼痛和头痛等症状。在严重情况下，患者可能会出现胃肠道症状和意识混乱，尤其是在老年人或免疫功能低下的人群中[1]、[4]、[5]。在某些情况下，军团病可能是致命的，尤其是对于免疫抑制患者[1]。
军团菌暴发已在医院、酒店和游轮等各种场所发生。公共卫生官员在调查和控制暴发方面发挥着关键作用，以减少细菌的传播并防止进一步疾病的发生。通过适当的消毒程序或实施水资源管理计划并对其进行监测，对于公共卫生至关重要[6]。此外，准确诊断军团菌感染对于有效的公共卫生响应也至关重要。
目前有多种诊断方法可供选择[7]：培养是金标准，需要从呼吸道标本（痰液、支气管肺泡灌洗液或肺组织）中进行培养[8]。然而，这种方法耗时较长，并需要特殊的培养基（如特定琼脂）来促进细菌生长。聚合酶链反应（PCR）具有高敏感性，可以直接从呼吸道标本中检测到军团菌DNA。该方法还可以区分不同种属和血清型的军团菌，这对于流行病学研究非常重要。在这种情况下，下一代测序技术也可以使用[9]。检测尿液中的军团菌抗原是另一种常用的方法，某些检测方法可以在几小时内提供结果。这种方法特别有用，因为它不需要培养。基本上，它可以检测嗜肺军团菌血清型1——这是军团病最常见的原因——尽管它无法检测其他血清型。血清学检测通常不太适用于急性诊断。这些检测可以检测针对军团菌的抗体，但抗体的产生可能需要几周时间，因此不太适合早期诊断。最后，环境采样也有助于诊断暴发和感染源。在这种情况下，检测水源有助于识别潜在的感染源，从而防止更多病例的发生[10]。
然而，尽管培养仍是金标准，但其较长的检测时间和不理想的敏感性无法满足临床对准确诊断的需求，特别是对于重症患者。因此，迫切需要可靠的早期识别和诊断嗜肺军团菌的方法，例如尿抗原检测，以提高我们快速识别军团菌感染的能力。
LIAISON检测方法是一种完全自动化的化学发光免疫测定法，用于检测尿液中军团菌的可溶性抗原，以支持对疑似肺炎患者尿液样本中嗜肺军团菌和长滩军团菌抗原的定性检测。该检测基于创新的“双抗原”检测原理，可以同时检测两种军团菌抗原：脂多糖（LPS）和肽聚糖相关脂蛋白（PAL），从而提高敏感性和特异性。与LPS类似，PAL抗原也会在受感染的尿液中排出并可被检测到，但与LPS不同的是，它在不同军团菌种属和血清型中高度保守，因此可以检测到非Lp1型的嗜肺军团菌和其他军团菌种。该检测方法用于辅助诊断军团菌感染。检测必须在LIAISON?分析仪（LIAISON? XL和LIAISON? XS）上进行。
在这项研究中，我们通过描述该产品的临床性能，并结合临床数据，提供了LIAISON?军团菌尿抗原检测方法有效性的证据，以帮助医生做出最准确的诊断。
研究设计
样本收集工作由六个外部实验室完成（见附录1），这些实验室负责收集并提供所有包含必要临床数据的样本。
关于样本前处理步骤的详细信息，请参阅相关使用说明书。
样本使用LIAISON?检测方法和相关使用说明书推荐的对比方法进行了检测。
检测在两个不同的检测地点进行
样本收集
通过检测307个符合条件的样本（143个疑似肺炎患者的样本，其中进行了军团菌检测；15个细菌性呼吸道感染患者的样本（尿抗原检测呈阳性）；68个尿路感染患者的样本；以及81个看似健康的受试者的样本），评估了LIAISON?军团菌尿抗原检测方法的诊断性能。收集样本的人口统计特征见表1。
LIAISON检测方法与CE认证检测方法的比较
频率分布情况
讨论
通过对307个样本的收集和分析，全面评估了LIAISON?军团菌尿抗原（Ag）检测方法的诊断性能。这些样本包括疑似肺炎患者、细菌性呼吸道感染患者和健康个体，反映了多样化的患者群体，体现了该方法在各种临床场景中的潜在应用价值。
利益冲突声明
作者声明以下可能被视为潜在利益冲突的财务利益/个人关系：MONICA RAVOTTO、ANDREA PIGHINI、FRANCESCO CAPUANO表示获得了DiaSorin Inc.的财务支持；JESSICA CUSATO表示与COQUA LAB存在咨询或顾问关系。如果还有其他作者，他们声明自己没有已知的可能影响研究结果的财务利益或个人关系。
