《Veterinary Parasitology: Regional Studies and Reports》：Investigation of
Toxoplasma gondii seroprevalence and associated risk factors in dairy cattle in the Eastern Anatolia region of Türkiye
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本研究检测了土耳其厄尔祖鲁姆省398头奶牛弓形虫抗体阳性率，发现15.3%，并分析其与地区、品种、年龄、产次及农场是否有猫的关系，提示生乳和肉制品存在公共卫生风险，需控制农场流浪猫|
作者名单：Ba?ak Hanedan、Bülent Zafer Ta?、Esengül Y?ld?r?m、?brahim Balkaya、Zekai Bastem、Muhammed Serta? Ero?lu、Ramazan Kaman
土耳其埃尔祖鲁姆市阿塔图尔克大学兽医学院内科系
摘要
牛通过摄入牧场、饲料和水源中的孢子化卵囊而感染弓形虫（Toxoplasma gondii）。弓形虫病在牲畜中的主要危害在于其人畜共患性。本研究调查了奶牛中弓形虫抗体的血清阳性率，并评估了相关风险因素，包括地理位置、品种、年龄、繁殖史以及农场中猫的存在情况，同时探讨了潜在的公共卫生风险。研究从土耳其东安纳托利亚地区的埃尔祖鲁姆市多个牛群中选取了398头奶牛作为样本。血液样本在冷藏条件下被送往实验室。离心处理后，血清样本被转移到Eppendorf管中并冷冻保存直至分析。使用商业ELISA试剂盒检测了针对弓形虫的IgG抗体。结果显示，奶牛中弓形虫的血清阳性率为15.3%（61/398）。通过单变量和多变量逻辑回归分析评估了血清阳性率与各风险因素之间的关联。其中，阿齐齐耶（Aziziye）地区的奶牛血清阳性率最高（27.8%），尤其是荷斯坦（Holstein）品种（25.0%）、10-16岁年龄段的牛（21.9%）以及生育7-8次的牛（20.8%）。这些发现表明土耳其埃尔祖鲁姆市的奶牛中存在弓形虫感染，提示食用生乳制品和肉类可能存在公共卫生风险。实施控制措施限制农场中自由活动的猫的数量可能有助于减少弓形虫的传播并改善该地区的农场管理。
引言
所有温血动物，包括人类，都可能感染弓形虫（Bilgili和Hanedan，2019；Dubey，2010）。在牲畜中，卵囊是具有感染性的阶段（Constable等，2017；Gomes等，2020）。猫粪便中排出的卵囊会污染土壤、饲料和水源，因此牲畜可能通过摄入牧场及其他饲料或水源中的孢子化卵囊而感染（Constable等，2017；Radostits等，2006；Robert-Gangneux，2014）。弓形虫感染的血清阳性率受文化习俗、社会模式、气候条件、动物年龄和养殖方式的影响（Smith，1991）。全球范围内的研究表明，英国的弓形虫血清阳性率为1.79%（Hosein等，2016），孟加拉国为8.3%（Sah等，2018），阿尔及利亚为28.7%（Abdallah等，2019），中国东北部为2.6%（Qiu等，2012），苏丹为13.3%（Elfahal等，2013），尼日利亚为13.91%（Onyiche和Ademola，2015），巴西为30.9%（De Azevedo Filho等，2020），爱沙尼亚为18.62%（Jokelainen等，2017）。在土耳其，艾登（Ayd?n）地区的牛血清阳性率为45.2%（Karagen?等，2005），萨姆松（Samsun）为54.16%（Acici等，2008），阿达纳（Adana）为56.06%（Yücel等，2014）。
全球约30%的人口感染了弓形虫（OIE，2019），全球范围内的血清阳性率范围为7%至51%（Rehman等，2020）。食用受感染牛的生肉或未煮熟的牛肉可能是人类感染弓形虫的途径（Alvarado-Esquivel等，2010；Belluco等，2016；Belluco等，2018；da Silva等，2014；de Souza等，2016；EFSA等，2018；Opsteegh等，2011）。由于食物处理方式的差异，人类弓形虫感染的流行率存在显著差异（Galvan Ramirez等，1995；Rehman等，2020）。有报道指出，食用鞑靼牛排（steak tartare）、萨拉米香肠和生肉丸的人群中曾发生过弓形虫病暴发（de Paula Eduardo等，2007；Alves等，2021）。
多项研究强调了生牛肉和牛奶中弓形虫存在带来的潜在公共卫生风险。通过生物测定分析，在385头牛中检测到1.6%（6/385）的牛体内含有活的弓形虫组织囊（Opsteegh等，2016）。在法国，牛尸体的弓形虫血清阳性率为17.8%，8个月以下小牛的肉为5.34%，8个月以上成年牛的肉为23.12%（Blaga等，2019）。此外，在哥伦比亚伊巴克（Ibaqué）使用常规嵌套PCR方法检测到19.3%的弓形虫DNA阳性率（Medina-Hernandez等，2022），在波兰使用嵌套PCR和实时PCR方法在牛的心脏和膈肌样本中检测到10.2%的弓形虫DNA阳性率（Sroka等，2020）。
欧洲食品安全局（EFSA）指出，急性感染的奶牛的乳汁中可能存在弓形虫速殖子。因此，饮用生牛奶可能对公共卫生构成风险（EFSA等，2018；Tenter等，2000）。研究发现，饮用未经巴氏杀菌的牛奶的孕妇中弓形虫感染率较高（Rehman等，2020）。da Costa等（2020）在巴西一起弓形虫病暴发调查中，从用生牛奶制成的新鲜奶酪中检测到了弓形虫DNA，确定奶酪可能是感染源。
在牛奶样本中检测到弓形虫DNA并不一定意味着寄生虫具有传染性或活性。尽管如此，多项研究评估了生牛奶的潜在公共卫生风险。中国使用ELISA方法检测出生牛奶中弓形虫的阳性率为6.38%（Liu等，2022），波兰为15.9%（Cisak等，2017），埃及为9.7%（Fereig等，2024），巴西使用嵌套PCR方法为2.8%（da Fonseca等，2023），伊朗为3.63%（Asiyabi Aghdam等，2023）。
弓形虫病在牲畜中的主要危害在于其人畜共患性。目前，尚无流行病学研究调查土耳其东安纳托利亚埃尔祖鲁姆省奶牛中的弓形虫感染情况。了解奶牛中弓形虫感染的流行病学特征及相关风险因素对于制定有效的控制措施至关重要，尤其是考虑到农场和牧场上存在自由活动的猫。因此，本研究旨在调查土耳其埃尔祖鲁姆市奶牛中弓形虫的血清阳性率，并评估血清阳性率与地理位置、年龄、品种、繁殖史以及农场中猫的存在情况之间的关联。此外，本研究还评估了牛弓形虫病对公共卫生的潜在风险，特别是通过受污染的乳制品和肉类产品的传播。
伦理批准和资金支持
本研究于2021年8月31日获得阿塔图尔克大学动物实验地方伦理委员会的批准（批准编号：202）。在研究开始前，已从牛主人处获得了书面知情同意书。
该项目得到了阿塔图尔克大学科学研究项目协调单位的支持，项目代码为TKP-2023-11739。
研究对象和样本采集
根据埃尔祖鲁姆省农业和林业局的记录，
结果
在398头牛中，有61头检测出弓形虫抗体，血清阳性率为15.3%。所有参与研究的农场都存在家养或流浪猫；因此，无法将农场中猫的存在作为统计分析中的风险因素。所有农场的牛都对弓形虫呈血清阳性。弓形虫血清阳性率与各变量之间的关系及其相应的比值比和95%置信区间见表1（单变量分析）
讨论
这是首次研究土耳其东安纳托利亚埃尔祖鲁姆省奶牛中弓形虫的血清阳性率及相关风险因素。使用商业ELISA试剂盒检测发现，埃尔祖鲁姆省奶牛的弓形虫血清阳性率为15.3%（61/398）。与其他检测方法（如间接荧光抗体试验）相比，ELISA技术是一种适合且可靠的流行病学研究方法。
结论
本研究证实土耳其埃尔祖鲁姆市的奶牛中存在弓形虫感染。这些发现表明，食用生乳制品和肉类可能存在公共卫生风险。实施限制农场中自由活动猫数量的控制措施可能有助于减少弓形虫的传播并改善该地区的农场管理。
作者贡献声明
作者名单：Ba?ak Hanedan：撰写、审稿与编辑、初稿撰写、数据可视化、验证、监督、软件使用、资源协调、项目规划、方法设计、研究实施、资金获取、数据分析、概念构建。Bülent Zafer Ta?：撰写、审稿与编辑、研究实施、概念构建。Esengül Y?ld?r?m：撰写、审稿与编辑、验证、数据分析。?brahim Balkaya：撰写、审稿与编辑、验证、方法设计、数据分析。利益冲突声明
所有作者均无需要声明的利益冲突。
致谢
作者感谢阿塔图尔克大学科学研究项目协调单位（项目代码TKP-2023-11739）对本项目的资助。
