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这项研究深入探究了中国脓毒症患者循环Toll样受体（TLR）/细胞因子表达谱与关键炎症基因常见多态性之间的关联。结果表明，患者血清中TLR2、TLR4、TLR9及多种促炎（IL-1β, IL-6, IL-8, TNF-α）和抗炎（IL-10）细胞因子水平显著上调，而多项基因多态性（如TLR2 -196 to -174 del, TLR4 rs1927911, IL-1B +3954 C/T等）与脓毒症易感性增加相关。这些发现支持了脓毒症中存在一个遗传-炎症相互作用的框架，并提示其可能与脓毒症相关的神经炎症和血脑屏障（BBB）功能障碍通路有关，为未来的生物标志物引导的风险分层策略提供了依据。
文章内容归纳总结
研究背景与目的
脓毒症是一种由宿主对感染反应失调引发的、危及生命的综合征，可迅速进展为器官功能障碍和感染性休克，是发病率和死亡率的重要原因。除了外周器官衰竭，脓毒症还可累及中枢神经系统，全身性炎症被认为会引发神经炎症并损害血脑屏障（BBB）完整性，从而导致脓毒症相关的脑功能障碍。Toll样受体（TLR）介导的炎症信号可以放大全身细胞因子释放，并通过神经炎症和BBB损伤与脓毒症相关脑功能障碍相关。然而，临床脓毒症中影响这些免疫驱动过程的炎症和遗传决定因素尚未完全阐明。本研究旨在通过整合系统性TLR-细胞因子谱与宿主遗传变异，提供脓毒症中炎症和遗传决定因素更全面的视角，并探讨其与脓毒症相关神经炎症和BBB功能障碍通路的潜在相关性。
材料与方法
本研究是一项基于医院的病例对照研究，招募了2020年1月至2025年5月期间入住苏州高新区人民医院重症监护病房（ICU）的480名符合Sepsis-3诊断标准的成年脓毒症患者。对照组为同期从医院体检中心招募的840名年龄和性别匹配的表观健康个体。
在脓毒症诊断时（即入组时），通过酶联免疫吸附试验（ELISA）定量血清中TLR2、TLR4、TLR9、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α和IFN-γ的水平。使用经典的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR–RFLP）方法确定TLR和细胞因子相关基因中候选多态性的基因型。在对照组中评估哈代-温伯格平衡（HWE）。使用经年龄和性别校正的多变量逻辑回归评估多态性与脓毒症易感性之间的关联，并在敏感性分析中考虑多重比较（包括保守的Bonferroni校正）来解释p值。
研究结果
临床特征
脓毒症组和对照组在年龄、性别分布、体重指数（BMI）、糖尿病史、高血压史、饮酒或吸烟史方面无显著差异。在脓毒症组中，最常见的原发感染部位是腹腔和肺部感染，其次是肢体、软组织、导管相关、头面部和颅内感染。
血清Toll样受体和细胞因子水平
与健康对照组相比，脓毒症患者的血清TLR2、TLR4、TLR9水平显著更高。同样，促炎细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α以及抗炎细胞因子IL-10在脓毒症组中也显著升高。相比之下，两组间的血清IFN-γ浓度无显著差异。总体而言，这些发现表明脓毒症中存在明显的TLR驱动的促炎环境，并伴有代偿性抗炎反应，这与可能促成脓毒症中神经炎症和BBB功能障碍的机制相符。
基因多态性分析
TLR基因多态性
对于TLR2 -196 to -174 del变异，缺失（D）等位基因在脓毒症患者中比对照组更常见，并且在经年龄和性别校正的模型中，与I/I基因型相比，I/D和D/D基因型与更高的脓毒症风险相关，其中D/D基因型的效应最强。对于TLR4，rs1927911位点的A等位基因携带者（GA和AA基因型）相对于GG基因型，患脓毒症的风险显著增加。关于TLR9，rs352140的A等位基因（GA和AA基因型）与脓毒症呈正相关，而rs574836的C等位基因（TC和CC基因型）相对于TT基因型与较低的脓毒症风险相关。
细胞因子基因多态性
IL-1B +3954 C/T的T等位基因以及TC和TT基因型与CC基因型相比，与脓毒症风险增加密切相关。IL-6 -174 G/C的C等位基因显示出类似模式，GC和CC基因型在脓毒症组中比对照组更常见。对于IL-10，-1082 G/A的A等位基因（GA和AA基因型）导致更高的脓毒症风险，而-819 T/C的C等位基因和CC基因型与较低的脓毒症风险有适度关联。在本队列中，未观察到IL-8或IL-17多态性的显著关联。
IFN-γ和TNF-α基因多态性
对于IFN-γ，+874 A/T的T等位基因和TT基因型相对于AA基因型与显著更高的脓毒症风险相关，而+2108 A/G变异与脓毒症无明确关联。同样，对于TNF-α，-308 G/A的A等位基因以及GA和AA基因型与脓毒症风险增加相关，而-376 G/A和-863 C/A多态性与脓毒症易感性无显著相关。
多重检验校正
由于分析了多个位点，我们进一步检查了哪些关联在保守的Bonferroni校正下仍具有统计学意义。在测试了28个位点的情况下，Bonferroni校正的显著性阈值约为p < 0.002。在此标准下，涉及TLR2 -196 to -174 del变异（D/D基因型和D等位基因）、TLR4 rs1927911（GA/AA基因型和A等位基因）、TLR9 rs352140（GA/AA基因型和A等位基因）、IL-1B +3954 C/T（TC/TT基因型和T等位基因）、IL-6 -174 G/C（CC基因型和C等位基因）、IL-10 -1082 G/A（GA/AA基因型和A等位基因）、TNF-α -308 G/A（GA/AA基因型和A等位基因）和IFN-γ +874 A/T（TT基因型和T等位基因）的关联仍然具有统计学显著性。相比之下，如TLR9 rs574836和IL-10 -819 T/C等变异的名义关联未达到此更严格的标准，因此应更加谨慎地解释。
讨论
本研究发现，在中国队列中，脓毒症的特征是明显的TLR驱动的炎症谱，并且TLR2、TLR4、TLR9、IL-1B、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ中的特定多态性与脓毒症风险相关，其中几个关联在经保守的多重检验校正后仍然稳健。这些表达和遗传数据的结合与增强的TLR–MyD88–NF-κB信号传导相符，这可能促进脓毒症相关的器官功能障碍，并可能涉及神经炎症和BBB相关并发症。
在机制层面，大多数已识别的变异定位在经典的TLR–MyD88–NF-κB信号通路组件上。启动子多态性可以改变细胞因子对炎症刺激的反应产量，从而影响促炎和抗炎输出的平衡。结合我们的表达数据，目前的遗传关联符合一个模型，即宿主多态性调节脓毒症中MyD88/NF-κB依赖性信号传导的幅度和持续时间，从而影响全身炎症，并可能影响对神经炎症和BBB相关并发症的易感性。
本研究的优势包括相对较大的样本量，提高了统计效能。研究结果具有潜在的临床意义：结合血清TLR和细胞因子水平与选定的遗传标记物，可能有助于识别脓毒症风险增加或更可能发生严重器官功能障碍的患者；阐明特定多态性如何改变TLR和细胞因子信号传导，可能为辅助疗法（例如，在遗传易感个体中调节TLR2/TLR4信号传导或下游NF-κB激活的干预措施）的开发提供信息。
本研究也存在一些局限性：未将病原体类型、序贯器官衰竭评估（SOFA）评分等详细临床因素纳入遗传关联模型；是单中心研究，可能限制结果在其他环境和种族群体中的普适性；专注于一组生物学上合理的候选多态性，存在残余假阳性发现的可能性；未直接测量神经炎症或BBB完整性，其参与是从已知的TLR和细胞因子生物学以及系统性表达模式推断出来的。
结论
本研究显示，在中国脓毒症队列中，循环TLR-细胞因子轴的上调以及TLR和细胞因子基因中与易感性相关的多态性，支持了脓毒症的遗传-炎症框架，并与涉及脓毒症相关神经炎症和BBB功能障碍的通路具有潜在相关性。由于本研究未直接测量中枢神经系统（CNS）受累和BBB完整性，这些联系应被视为推断性的。目前的研究结果推动了未来结合直接CNS和BBB终点及外部验证队列的研究，并可能为未来生物标志物引导的风险分层策略提供信息。
