MEHP通过GPR30介导的上皮-间充质转化促进乳腺癌的进展

《Food and Chemical Toxicology》：MEHP promotes breast cancer progression via GPR30-mediated epithelial–mesenchymal transition

MEHP通过激活GPR30促进乳腺癌细胞增殖迁移侵袭的机制研究。采用MCF-7细胞模型，抑制GPR30后验证MEHP对细胞周期和EMT过程的调控作用，发现GPR30介导的EMT是MEHP促进乳腺癌细胞恶性表型的关键途径。

　　

文琪|贾旺|王云龙|崔建伟|吴晓彤|丁子吉|姜涛|刘万宇|翟学宇|金顺子|叶琳

吉林大学公共卫生学院职业与环境健康系，长春，中国

摘要

目的

单(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯（MEHP）是二(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯（DEHP）的主要代谢物，是一种已知的环境内分泌干扰物，具有类似雌激素的作用，能够促进激素受体阳性肿瘤的发展。G蛋白偶联受体30（GPR30），也称为G蛋白偶联雌激素受体1，在激素依赖性肿瘤的发病机制和进展中起着关键作用。本研究阐明了MEHP通过GPR30促进乳腺癌发展的机制。

方法

MCF-7细胞暴露于不同浓度的MEHP中，并使用G15抑制GPR30的表达。分别通过CCK-8和流式细胞术评估细胞增殖和细胞周期。通过划痕伤口实验和Transwell迁移实验评估细胞迁移和侵袭能力。通过Western blotting和定量实时逆转录PCR分析GPR30以及上皮-间充质转化（EMT）相关mRNA和蛋白质的表达。

结果

我们的研究发现，MEHP暴露促进了MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭，同时调节了GPR30及相关mRNA和蛋白质的表达。抑制GPR30后，MEHP对MCF-7细胞增殖和迁移的促进作用减弱。

结论

值得注意的是，GPR30的抑制通过调节EMT过程减弱了MEHP诱导的MCF-7细胞增殖和迁移。

部分内容摘录

引言

二(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯（DEHP）是一种广泛使用的增塑剂，会逐渐从塑料产品中释放到大气、土壤和水中，最终进入人体[1]。人类接触DEHP主要通过口服、皮肤吸收和吸入[2]。DEHP的每日可耐受摄入量（TDI）因国家而异，美国为22 μg/kg体重，加拿大为44 μg/kg体重，欧盟为50 μg/kg体重[3]。

材料与方法

• 1.
  细胞培养和处理

MCF-7细胞在含有10%小牛血清（BI, Israel）的DMEM培养基（DMEM; BI, Israel）中于37 °C和5% CO₂条件下培养。选择MCF-7细胞是因为它们是一种成熟的雌激素受体阳性乳腺癌模型，常用于研究雌激素相关的信号通路。此外，GPR30在MCF-7细胞中具有功能性表达，使其适合探讨MEHP的类雌激素毒性效应及其在乳腺癌中的作用。

结果

• 1.
  MEHP暴露对MCF-7细胞存活率的影响

100 μM MEHP处理组的存活率显著高于空白对照组，表明MEHP对MCF-7细胞具有促进生长的作用。0.1 μM MEHP可以促进细胞增殖，而100 μM MEHP处理则显著影响细胞存活。因此，我们选择了0.1、1、10和100 μM的MEHP剂量进行后续实验（补充图A）。

讨论

DEHP是一种常见的环境内分泌干扰物，可能干扰体内正常的激素合成、分泌、运输、结合和代谢，从而导致生殖系统、神经系统和免疫系统的不良影响[27]。研究表明，接触邻苯二甲酸酯与多种激素相关癌症（如肾母细胞瘤、睾丸癌、前列腺癌、卵巢癌和神经母细胞瘤）的发生密切相关[28]。我们的研究显示……

作者贡献声明

吴晓彤：数据可视化、正式分析。崔建伟：写作——审稿与编辑、初稿撰写、正式分析。王云龙：写作——审稿与编辑、资源获取、概念构思。叶琳：写作——审稿与编辑、资源获取、概念构思。金顺子：写作——审稿与编辑、监督、资源获取。贾旺：写作——初稿撰写、正式分析。文琪：写作——审稿与编辑、监督、资源获取、概念构思。姜涛：写作——初稿撰写。

未引用参考文献

42.; 43.; 44.; 45.; 48.

利益冲突声明

作者声明没有利益冲突。

数据可用性

本研究中使用或分析的数据集可应要求向相应作者获取。

利益冲突声明

本手稿的提交不存在利益冲突，所有作者均同意发表。我代表我的合作者声明，所描述的工作是原创研究，未曾以全部或部分形式在其他地方发表。所有列出的作者均已批准该手稿的发表。