《MEDIATORS OF INFLAMMATION》：Circ-Eif3c Carried by M2 Macrophage-Derived Exosomes Mitigates Asthma Progression via miR-15a-5p/GSS/SOCS6 Axis Inhibition
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语
本研究揭示了一个缓解哮喘气道重塑的新机制。M2型巨噬细胞来源的外泌体（M2Φ-Exos）富含circ-Eif3c，其通过吸附miR-15a-5p，解除对谷胱甘肽合成酶（GSS）和细胞因子信号抑制物6（SOCS6）的抑制，从而保护肺泡上皮细胞、减轻炎症和肺损伤。该研究首次阐明了外泌体circRNA在哮喘中的功能，为靶向circ-Eif3c/miR-15a-5p/GSS/SOCS6轴治疗哮喘提供了新思路。
文章内容总结
引言
哮喘是一种影响全球超过3亿人的慢性呼吸道疾病，其特征包括气道炎症、高反应性、气流阻塞和气道重塑。尽管已有治疗方法，但重症哮喘患者的治疗仍面临挑战，发现新的治疗靶点至关重要。巨噬细胞极化在哮喘发病中扮演着重要角色，其中M2型巨噬细胞具有抗炎特性。外泌体作为细胞间通讯的关键介质，可携带包括circRNA在内的生物活性分子，参与疾病进程。然而，外泌体中的circRNA如何调控哮喘微环境尚不清楚。本研究旨在探索M2型巨噬细胞来源外泌体在哮喘中的潜在治疗机制。
方法
从M0型和M2型巨噬细胞中分离外泌体（M0Φ-Exos和M2Φ-Exos）。建立卵清蛋白（OVA）诱导的哮喘小鼠模型和脂多糖（LPS）诱导的肺泡上皮细胞（AECs）损伤模型。利用高通量测序筛选差异表达的circRNA，并通过生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验揭示circ-Eif3c、miR-15a-5p、GSS和SOCS6之间的调控关系。通过体内外功能实验验证其作用。
结果
1. M2Φ-Exos抑制OVA诱导的炎症因子分泌和肺损伤
在OVA诱导的哮喘小鼠模型中，M2Φ-Exos治疗显著降低了支气管肺泡灌洗液（BALF）中促炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平。组织学分析显示，M2Φ-Exos治疗减轻了OVA诱导的肺细胞凋亡、肺纤维化、肺血管损伤和活性氧（ROS）积累，表明M2Φ-Exos能有效缓解哮喘相关的肺部病理变化。
2. Circ-Eif3c在M2型巨噬细胞来源外泌体中发挥重要作用
高通量测序比较M0Φ-Exos和M2Φ-Exos中的circRNA表达谱，发现多个circRNA在M2Φ-Exos中上调。RT-qPCR验证确认，其中mmu_circ_0001628（命名为circ-Eif3c）表达上调最为显著。生物信息学分析显示，circ-Eif3c位于7号染色体，源自Eif3c基因，长度为364 bp。
3. 下调Circ-Eif3c抑制M2Φ-Exos的治疗效果
在M2型巨噬细胞中敲低circ-Eif3c后，其分泌的外泌体治疗哮喘小鼠的效果被削弱。具体表现为，促炎因子水平回升，肺组织凋亡、纤维化、血管损伤和ROS积累程度加重。这说明circ-Eif3c是M2Φ-Exos发挥保护作用的关键成分。
4. MiR-15a-5p、GSS和SOCS6是Circ-Eif3c的下游靶点
预测分析和双荧光素酶报告基因实验证实，miR-15a-5p可直接与circ-Eif3c结合，是其下游靶点。进一步研究发现，miR-15a-5p也能与GSS和SOCS6 mRNA的3‘-UTR结合。在AECs中，过表达circ-Eif3c可下调miR-15a-5p，并上调GSS和SOCS6的表达。而过表达miR-15a-5p则可逆转circ-Eif3c对GSS和SOCS6的上调作用，证实了circ-Eif3c通过海绵吸附miR-15a-5p来调控GSS和SOCS6的分子轴。
5. 过表达miR-15a-5p或敲低GSS/SOCS6逆转Circ-Eif3c对LPS诱导的AEC损伤的保护作用
在LPS诱导的AEC损伤模型中，过表达circ-Eif3c可减少细胞凋亡、ROS积累，并改善血管生成分化能力。然而，同时过表达miR-15a-5p，或敲低GSS/SOCS6，均可逆转circ-Eif3c带来的这些保护效应。这表明circ-Eif3c是通过抑制miR-15a-5p、进而促进GSS/SOCS6表达来发挥细胞保护作用的。
6. 过表达Circ-Eif3c增强M2Φ-Exos的治疗效果
在M2型巨噬细胞中过表达circ-Eif3c，使其分泌的外泌体（circ-Eif3c-enriched M2Φ-Exos）治疗哮喘小鼠的效果进一步增强。与普通M2Φ-Exos相比，它能更有效地抑制炎症因子分泌，减轻肺组织凋亡、纤维化、血管损伤和ROS积累。
结论
本研究表明，富含circ-Eif3c的M2型巨噬细胞来源外泌体，通过circ-Eif3c/miR-15a-5p/GSS/SOCS6轴，恢复肺泡上皮细胞功能，从而减轻气道炎症和重塑，缓解哮喘进展。这为哮喘治疗提供了新的潜在靶点和策略。
