一种高效、便捷的快速药物提取方法，结合半自动分散清洗技术，利用超高效液相色谱-质谱（UHPLC-MS/MS）分析手段，能够快速检测患者血浆样本中直接口服的抗凝药物成分，适用于生物监测

《ANALYTICAL AND BIOANALYTICAL CHEMISTRY》：A streamlined in-syringe fast drug extraction and semi-automated dispersive cleanup technique for quick biomonitoring of direct oral anti-coagulant drugs in patients’ plasma samples using UHPLC-MS/MS analysis

微流控萃取耦合半自动固相萃取用于血浆中DOACs的快速定量分析，优化了溶剂、盐类及吸附剂组合，线性范围0.1-500 μg/mL（R>0.99），检测限0.02-0.1 μg/mL，日内/日间精密度<6%，房颤患者血浆验证显示回收率85.3%-105.3%。

　　

摘要

在本研究中，将手动的多步骤QuEChERS（快速、简便、廉价、高效、耐用且安全）方法简化为一种微型的注射器内QuEChERS方法，称为注射器辅助快速药物提取（IS-FaDEx），并结合半自动化（SA）分散固相净化（dSPC）技术，利用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）检测技术，实现对人血浆样本中直接口服抗凝剂（DOACs）的快速定量分析。在IS-FaDEx-SA-dSPC方法中，首先将100 μL的血浆置于3-mL塑料注射器中，通过盐诱导的液-液萃取过程进行提取；随后将提取液转移至另一个3-mL塑料注射器中，使用含有盐的吸附剂（包括C18吸附剂、具有伯胺和仲胺官能团的吸附剂以及无水MgSO₄）进行dSPC净化；最终得到的纯净提取液被注入UHPLC-MS/MS进行分析。实验中测试并优化了影响DOACs提取效率的各种因素，如提取溶剂、盐的类型和用量以及净化吸附剂的类型和用量。在0.1至500 μg/mL的校准浓度范围内，该方法表现出良好的线性关系，相关系数大于0.99。检测限在0.02至0.1 μg/mL之间，日内和日间（n=6）的相对标准偏差均小于6%。作为概念验证，该方法被实时应用于检测心房颤动患者的血浆样本中的DOACs，结果显示该方法具有较高的准确性和精确度（加标回收率介于85.3%至105.3%之间）。该方法提供了一种简单、高效、灵敏且自动化的流程，可用于从血浆样本中提取和测定DOACs，可作为常规临床实验室实践中监测DOACs的替代分析工具，尤其是在心房颤动和静脉血栓栓塞患者中。

图形摘要

图中展示了利用IS-FaDEx-SA-dSPC方法和UHPLC-MS/MS技术对人血浆中目标DOACs进行生物监测的典型过程。

在本研究中，将手动的多步骤QuEChERS（快速、简便、廉价、高效、耐用且安全）方法简化为一种微型的注射器内QuEChERS方法，称为注射器辅助快速药物提取（IS-FaDEx），并结合半自动化（SA）分散固相净化（dSPC）技术，利用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）检测技术，实现对人血浆样本中直接口服抗凝剂（DOACs）的快速定量分析。在IS-FaDEx-SA-dSPC方法中，首先将100 μL的血浆置于3-mL塑料注射器中，通过盐诱导的液-液萃取过程进行提取；随后将提取液转移至另一个3-mL塑料注射器中，使用含有盐的吸附剂（包括C18吸附剂、具有伯胺和仲胺官能团的吸附剂以及无水MgSO₄）进行dSPC净化；最终得到的纯净提取液被注入UHPLC-MS/MS进行分析。实验中测试并优化了影响DOACs提取效率的各种因素，如提取溶剂、盐的类型和用量以及净化吸附剂的类型和用量。在0.1至500 μg/mL的校准浓度范围内，该方法表现出良好的线性关系，相关系数大于0.99。检测限在0.02至0.1 μg/mL之间，日内和日间（n=6）的相对标准偏差均小于6%。作为概念验证，该方法被实时应用于检测心房颤动患者的血浆样本中的DOACs，结果显示该方法具有较高的准确性和精确度（加标回收率介于85.3%至105.3%之间）。该方法提供了一种简单、高效、灵敏且自动化的流程，可用于从血浆样本中提取和测定DOACs，可作为常规临床实验室实践中监测DOACs的替代分析工具，尤其是在心房颤动和静脉血栓栓塞患者中。

图形摘要

图中展示了利用IS-FaDEx-SA-dSPC方法和UHPLC-MS/MS技术对人血浆中目标DOACs进行生物监测的典型过程。