推进阴道感染诊断：检测阴道毛滴虫（T. vaginalis）和白色念珠菌（C. albicans）的分子方法与传统方法
《Diagnostic Microbiology and Infectious Disease》：Advancing Vaginal Infection Diagnosis: Molecular versus Conventional Methods for Detecting
T. vaginalis and
C. albicans
编辑推荐：
秦皮属鞭毛虫和白色念珠菌阴道炎在伊朗克尔曼巴德已婚女性的流行率及诊断方法比较研究。采用传统实验室技术与分子PCR检测，发现PCR对秦皮属检测更敏感（3% vs 0.7%），而SDA培养对念珠菌检测率最高（21.4%）。研究揭示当地念珠菌性阴道炎高发（6.6-21.4%），需优化诊断策略。
Fahimeh Abdi|Asghar Sepahvand|Amirreza Javadi Mamaghani|Fatemeh Yari|Mehdi Birjandi|Azadeh Karimi|Shirzad Fallahi|Farnaz Kheirandish
伊朗霍拉马巴德洛雷斯坦医科大学医学院医学寄生虫学与真菌学系
摘要
背景
阴道毛滴虫（Trichomonas vaginalis）是一种具有鞭毛的移动性原生动物，仅感染人类。它是导致阴道炎的重要病原体，并与不良生殖结局（如早产和不孕）有关。白色念珠菌（Candida albicans）约占真菌性阴道炎病例的85-90%。本研究旨在利用传统实验室技术和分子诊断方法，确定霍拉马巴德地区就诊于卫生中心的已婚妇女中阴道毛滴虫和白色念珠菌阴道炎的患病率。
方法
在这项描述性分析研究中，2024年从霍拉马巴德卫生中心就诊的304名已婚妇女中收集了阴道样本。样本通过传统实验室方法进行分析，包括直接涂片、Giemsa染色、Sabouraud葡萄糖琼脂（SDA）培养、芽管试验、玉米粉琼脂培养以及45°C培养，同时采用分子技术（PCR和测序）。数据使用SPSS 27版进行统计分析。
结果
通过PCR检测出9例（3%）阴道毛滴虫感染，通过直接涂片检测出2例（0.7%）。直接涂片与PCR结果的一致性Kappa系数为0.36（p < 0.001），表明两者具有中等程度的符合度。对于白色念珠菌，PCR检测出20例阳性病例（6.6%），而传统方法的结果分别为：直接涂片56例（18.4%）、SDA培养65例（21.4%）、芽管试验63例（20%）、玉米粉琼脂培养58例（19.1%）和45°C培养12例（3.9%）。
结论
PCR在检测阴道毛滴虫方面表现出更高的敏感性，而SDA培养在检测白色念珠菌方面敏感性最高。阴道毛滴虫的低患病率（3%）与相对较高的白色念珠菌患病率（6.6-21.4%）形成对比，这凸显了开展有针对性的健康教育和预防措施的必要性。
引言
外阴阴道感染是全球妇女最常见的健康问题之一，对生殖健康、生活质量及公共卫生系统具有重要影响。这些感染不仅会引起身体不适和情绪困扰，还会因误诊和经验性治疗而增加医疗成本和抗生素耐药性[[1], [2], [3]]。导致这些感染的两大病原体是阴道毛滴虫和白色念珠菌，每种病原体都带来不同的临床挑战，需要准确的诊断方法。
阴道毛滴虫是一种鞭毛原生动物寄生虫，是全球最常见的非病毒性性传播感染之一，每年影响约1.56亿人[4]。该寄生虫仅以滋养体形式存在，以生殖道的黏液分泌物、白细胞和细菌为食[5]。阴道毛滴虫感染可能导致多种并发症，包括早产、不孕、盆腔炎以及增加HIV传播的风险[6]。作为HIV传播的协同因素，其早期和准确检测尤为重要，尤其是在高风险人群中。此外，无症状携带者可能无意中促进感染传播，因此常规筛查和敏感的诊断方法至关重要。
白色念珠菌导致85-90%的真菌性阴道炎病例，是外阴阴道念珠菌病的另一个重要原因[7]。这种机会性酵母菌在女性生育年龄期间影响大量人群，常导致反复感染、不适和增加的医疗负担。抗生素使用、激素变化、糖尿病、免疫抑制和避孕方法等因素可能增加念珠菌过度生长的风险[8,9]。除了临床表现外，白色念珠菌还能形成生物膜并发生表型转换，从而增加治疗难度和抗真菌药物耐药性[10]。
这些感染的传统诊断方法包括直接显微镜检查、培养技术和生化测试[11,12]。尽管这些方法应用广泛，但在敏感性、特异性和检测时间方面存在局限。显微镜检查可能无法检测到低浓度的寄生虫，而培养方法耗时且无法区分不同物种。相比之下，分子诊断方法（尤其是聚合酶链反应（PCR）已成为更可靠的工具，具有更高的敏感性和特异性、更快的检测速度，并能检测低水平感染或混合病原体[13,14]。多重PCR检测和实时PCR平台现在可以同时检测多种病原体，提高诊断效率并指导针对性治疗[12,15]。
鉴于缺乏关于霍拉马巴德地区阴道毛滴虫和白色念珠菌阴道炎患病率的最新和全面数据，本研究旨在确定当地卫生中心就诊的已婚妇女中这些感染的频率。研究结合了传统实验室技术和分子诊断方法，以提供更准确的流行病学信息，并为未来的公共卫生策略和临床管理方案提供依据。本研究的结果也有助于区域监测工作，并为外阴阴道感染的筛查和治疗制定基于证据的指南。
虽然之前的研究分别评估了阴道毛滴虫或白色念珠菌的诊断方法，或仅关注特定人群，但本研究首次在同一组伊朗未充分研究的已婚妇女中同时应用了七种传统和分子诊断技术进行了对比。据我们所知，这是霍拉马巴德地区首次整合如此广泛的诊断方法的研究，为资源有限环境下的实验室算法优化提供了实践经验，并有助于这两种主要病原体的区域流行病学监测。
样本采集
这项描述性分析研究于2024年在伊朗霍拉马巴德地区就诊的育龄已婚妇女（15-48岁）中进行。在获得知情同意后，由卫生中心的产科专家填写包含人口统计信息和阴道炎临床症状的问卷。在主治医生的监督下，使用无菌棉签从每位参与者的后穹窿处采集了两个阴道样本
结果
本研究共评估了2024年就诊于霍拉马巴德卫生中心的304名育龄已婚妇女（15-48岁）的阴道毛滴虫和白色念珠菌感染情况，采用多种诊断方法，包括直接湿片显微镜检查、Giemsa染色、Sabouraud葡萄糖琼脂（SDA）培养、玉米粉琼脂培养、芽管形成、45°C培养以及聚合酶链反应（PCR）。样本的平均年龄为31.36 ± 6.89岁
讨论
本研究结果详细了解了霍拉马巴德地区育龄已婚妇女中阴道毛滴虫和白色念珠菌感染的患病率和诊断挑战。通过结合传统和分子方法，研究揭示了检测率的关键差异，并提供了关于阴道感染流行病学变化的宝贵见解。
这项研究是对传统和分子诊断方法最全面的比较分析
结论
总之，本研究强调了传统方法在检测阴道毛滴虫方面的局限性，以及分子技术的补充价值。对于白色念珠菌，培养方法因其更广泛的检测范围和识别非白色念珠菌（NAC）物种的能力而仍然具有价值。观察到的非白色念珠菌物种及其抗真菌耐药性特征的变化要求加强监测、特定物种的诊断和定制的治疗方案。未来的研究应侧重于分子诊断方法
伦理声明
所有参与者均提供了书面知情同意。此外，洛雷斯坦医科大学研究伦理委员会（编号：IR.LUMS.REC.1403.288）已书面和口头批准了该研究程序。同时，也获得了未成年人的法定代表或监护人的书面知情同意，并得到了伦理委员会的批准。
出版同意
所有参与者均提供了书面知情同意。此外，还获得了未成年人的法定代表或监护人的书面知情同意，并得到了伦理委员会的批准。
财务支持
本研究得到了洛雷斯坦医科大学（LUMS）的资助（项目编号：3544），并在医学寄生虫学与真菌学系进行
作者贡献声明
Fahimeh Abdi：方法学、数据可视化与分析
Asghar Sepahvand：指导老师、方法学、撰写-审稿与编辑、数据可视化与分析
Amirreza Javadi Mamaghani：撰写-初稿撰写和方法学
Fatemeh Yari：样本采集、数据可视化与分析
Mehdi Birjandi：统计分析、撰写-审稿与编辑
Azadeh Karimi：方法学与分析
Shirzad Fallahi：指导老师、方法学、撰写-审稿与编辑、数据可视化
作者声明
Fahimeh Abdi：方法学、数据可视化与分析
Asghar Sepahvand：指导老师、方法学、撰写-审稿与编辑、数据可视化与分析
Amirreza Javadi Mamaghani：撰写-初稿撰写和方法学
Fatemeh Yari：样本采集、数据可视化与分析
Mehdi Birjandi：统计分析、撰写-审稿与编辑
Azadeh Karimi：方法学与分析
Shirzad Fallahi：指导老师、方法学、撰写-审稿与编辑、数据可视化
CRediT作者贡献声明
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Asghar Sepahvand：指导老师、方法学、撰写-审稿与编辑、数据可视化与分析
Amirreza Javadi Mamaghani：撰写-初稿撰写和方法学
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Mehdi Birjandi：统计分析、撰写-审稿与编辑
Azadeh Karimi：方法学与分析
Shirzad Fallahi：指导老师、方法学、撰写-审稿与编辑、数据可视化CRediT作者贡献声明
Fahimeh Abdi：方法学、数据可视化与分析
Asghar Sepahvand：撰写-审稿与编辑、数据可视化、指导老师、方法学
Amirreza Javadi Mamaghani：撰写-初稿撰写和方法学
Fatemeh Yari：样本采集、数据可视化与分析
Mehdi Birjandi：统计分析、撰写-审稿与编辑
Azadeh Karimi：方法学与分析
Shirzad Fallahi：指导老师、撰写-审稿与编辑、数据可视化作者声明
Fahimeh Abdi：方法学、数据可视化与分析
Asghar Sepahvand：指导老师、方法学、撰写-审稿与编辑、数据可视化
Amirreza Javadi Mamaghani：撰写-初稿撰写和方法学
Fatemeh Yari：样本采集、数据可视化与分析
Mehdi Birjandi：统计分析、撰写-审稿与编辑
Azadeh Karimi：方法学与分析
Shirzad Fallahi：指导老师、撰写-审稿与编辑、数据可视化
