黄曲霉（Aspergillus flavus）和柑橘青霉（Penicillium citrinum）在以大米为基质的培养基上的生长动力学、竞争作用及霉菌毒素的产生：菌株、温度、水分活度及共培养的影响

《Food Bioscience》：Growth Kinetics, Competitive Interactions, and Mycotoxin Production of Aspergillus flavus and Penicillium citrinum on Rice-Based Medium: Effects of Strain, Temperature, Water Activity, and Co-Culture

抗氧化肽YR-10的肠道跨膜转运机制研究及其生物物理作用分析。采用Caco-2单层模型和DPPC脂质体模拟系统，发现该肽通过胞吞和紧密连接途径实现肠上皮转运，并证实其与脂双层结合为熵驱动机制（ΔG=-18.62 kJ/mol），涉及静电、氢键及疏水相互作用，调控膜流动性及有序性，为提升功能食品中核桃粉衍生肽生物利用度提供理论依据。

　　

欧阳慧|霍佳莹|辛晓娟|高颖|王萍|于雄伟|李书刚

教育部生物过程工程研究中心，安徽省农产品加工重点实验室，安徽省动物源重点实验室，合肥工业大学食品与生物工程学院，中国合肥230601

摘要

抗氧化肽的运输和吸收对其生物活性至关重要。研究表明，从核桃粉中提取的肽YWSPNDEQFR（YR-10）可以缓解氧化应激引起的肝脏损伤，但其吸收机制尚不清楚。在本研究中，我们利用Caco-2单层细胞、DPPC脂质体以及分子对接技术来研究YR-10在肠道上皮细胞中的跨上皮运输过程。YR-10通过网格蛋白介导的内吞作用和旁细胞途径被吸收，并显著促进了ZO-1和闭合蛋白基因的表达，表明其能够恢复上皮屏障的完整性。进一步的研究发现，YR-10与脂质双层的结合主要是由熵驱动的，涉及静电作用、氢键作用和疏水相互作用，这些作用调节了膜的流动性和有序性。这些发现共同阐明了YR-10的肠道吸收机制，并为提高核桃粉中生物活性肽在功能性食品中的应用效果提供了理论基础。

章节摘录

引言

核桃粉是核桃仁榨油的主要副产品，富含高质量的植物蛋白（≥40%），含有多种必需和非必需氨基酸，如谷氨酸、精氨酸和亮氨酸（Mustafa等人，2023年）。作为一种廉价且丰富的蛋白质来源，核桃粉在制备具有多种生物功能的食品活性肽方面受到了越来越多的关注（Qi等人，2023年）。这类肽已被报道具有多种生物活性。

材料与试剂

Caco-2细胞、胎牛血清（FBS）、0.25%胰蛋白酶、1%青霉素-链霉素（P/S）、Hanks平衡盐溶液（HBSS）、磷酸盐缓冲盐水（PBS）和Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）均购自Procell生命科学技术有限公司（中国武汉）。抗氧化肽YR-10及其FITC标记的类似物（FITC-acp-YR-10）的纯度≥97%（见补充材料1），由Top-peptide生物科技有限公司（中国上海）合成。CCK-8

YR-10对Caco-2细胞活力的影响

使用CCK-8方法测量了经YR-10处理的Caco-2细胞的活力。在1.00–5.00 mM浓度范围内孵育24小时后，细胞活力保持在90%以上（图1A），表明在该浓度范围内没有明显的细胞毒性。当YR-10浓度≥4 mM时，细胞活性逐渐下降，这可能是由于肽合成过程中产生的三氟乙酸残留所致（Wu等人，2024b）。在3 mM浓度时，细胞活力

讨论

本研究利用Caco-2单层细胞模型评估了核桃提取肽YR-10的运输途径，并结合DPPC脂质体模型进一步阐明了其跨膜吸收机制（图10C）。单层细胞模型显示，YR-10能够有效穿过肠道上皮屏障，被肝细胞吸收，并在200 μM浓度下表现出良好的生物相容性（细胞存活率>95%），证明了其跨上皮运输潜力。

结论

通过结合Caco-2单层细胞模型和DPPC脂质体模型，研究了核桃粉提取的抗氧化肽YR-10的跨上皮运输和膜扩散机制。结果表明，YR-10通过内吞作用和旁细胞途径的协同作用穿过肠道上皮屏障。生物物理分析显示，YR-10与脂质双层的相互作用是自发的、由熵驱动的（ΔG = ?18.62 kJ/mol；ΔS = 64.51 J/mol·K）

作者贡献声明

辛晓娟：正式数据分析、数据管理。李书刚：撰写-审稿与编辑、监督、资源协调、项目管理、方法学设计、资金申请、概念构思。于雄伟：资源协调、实验设计。王萍：方法学设计、资金申请。高颖：实验设计、数据管理。霍佳莹：实验设计、正式数据分析。欧阳慧：撰写-审稿与编辑、初稿撰写、方法学设计、数据管理、概念构思

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能影响本文研究的财务利益或个人关系。

资助

本研究得到了国家自然科学基金（编号32560538）、新疆维吾尔自治区重大科技项目（编号2022A02004-4）、安徽省重点研发计划（编号JZ2023AKKG0662）、安徽省农业研究系统专项基金（编号AHCYJSTX-NCPJG-15）以及合肥工业大学与武汉旭东食品有限公司的合作项目的支持。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能影响本文研究的财务利益或个人关系。代表所有作者，通讯作者声明不存在利益冲突。