经过TNFR-CD3基因改造的调节性T细胞能够减轻神经炎症和神经病理性疼痛

本研究通过构建携带TNFR-CD3融合蛋白的工程调节性T细胞（Tregs），评估其在缓解大鼠神经性疼痛中的疗效。实验显示，工程Tregs能增强增殖并抑制凋亡，有效降低机械性过敏反应，减少炎症细胞浸润，抑制NF-κB/p65和MAPK磷酸化，减少IL-1β、TNF-α等炎症因子释放，从而显著改善疼痛症状。该策略为神经免疫疾病治疗提供了新思路。

　　

摘要

背景：神经性疼痛是一种致残性疾病，其特征是神经元过度兴奋和神经免疫失调。调节性T细胞（Tregs）对免疫稳态至关重要，但在炎症环境中，尤其是在肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响下，它们的存活和功能会受到严重损害。本研究旨在探讨通过构建TNFR-CD3融合蛋白来改造Tregs是否能够提高其在慢性压迫损伤（CCI）大鼠模型中的稳定性、存活率和治疗效果。 方法：从大鼠体内分离出CD4?CD25? Tregs，然后用TNFR-CD3ζ-IRES-GFP慢病毒载体对其进行转导，并在体外检测其增殖、凋亡和趋化性。通过松散结扎坐骨神经来诱导CCI。实验大鼠接受了未经改造的Tregs或TNFR-CD3 Tregs的过继转移。行为学检测用于评估机械性过敏反应，而流式细胞术和分子分析则用于评估脊髓中的免疫细胞浸润、表型及信号通路激活情况。 结果：内源性Tregs不足以控制CCI引起的炎症：其数量减少会加剧过敏反应，而未经改造的Tregs的过继转移由于在富含TNF的环境中发生凋亡而无法缓解疼痛。相比之下，TNFR-CD3 Tregs保留了其对TNF的趋化性，表现出增强的增殖能力且凋亡减少，并能在体内持续存在。TNFR-CD3 Tregs的过继转移显著提高了大鼠的疼痛阈值，减少了巨噬细胞的浸润，并促进了M2型巨噬细胞的表型转化。小胶质细胞的激活和促炎细胞因子的产生受到显著抑制，同时NF-κB/p65和MAPK的磷酸化水平也降低。此外，TNFR-CD3 Tregs还限制了中性粒细胞的浸润，减少了IL-1β、TNF、IL-6和MMP的分泌，并降低了活性氧（ROS）和超氧阴离子的产生。 结论：TNFR-CD3 Tregs通过调节巨噬细胞、小胶质细胞和中性粒细胞有效地重新编程了神经免疫微环境，从而缓解了神经性疼痛。这些发现表明，工程化的Treg疗法是一种有前景的免疫调节策略，可用于治疗神经炎症性疾病，并支持其在神经性疼痛管理中的潜在转化应用。