斯洛伐克北部城市环境中蓖子硬蜱人畜共患病病原体的监测及其流行病学意义

《Pathogens》：Zoonotic Pathogens in Ixodes ricinus from an Urban Environment in Northern Slovakia Zuzana Cellengová, Bla?ena Hajdová, Andrea Schreiberová, Patrícia Petrou?ková, Maro? Kosti?ák and Alica Ko?i?ová

这篇研究在斯洛伐克北部城市日利那，对蓖子硬蜱(I. ricinus)及其携带的蜱传病原体进行了调查。研究在通常不适宜的环境中，仍发现了高流行率的伯氏疏螺旋体(B. afzelii为主)及人畜共患的巴贝斯虫(B. microti, B. venatorum)、无形体(Anaplasma spp.)和立克次体(Rickettsia spp.)，并检测到混合感染。这证实了城市生态系统已成为人兽共患病病原体重要的潜在疫源地，对公共卫生构成显著风险。

　　

背景

蓖子硬蜱是斯洛伐克最常见且流行病学上最重要的蜱种，能够传播多种人畜共患病原体。气候变化、全球变暖及人类活动显著影响了蜱类的生态，促使蜱种群在欧洲扩张，包括向更北部的地区、城市、郊区及高海拔地区扩散。蓖子硬蜱偏好凉爽湿润的微气候，对宿主特异性低，可寄生包括人类在内的多种脊椎动物。尽管已知蓖子硬蜱是多种人畜共患病病原体的重要媒介，但关于斯洛伐克北部地区城市环境中病原体发生的数据仍然有限。本研究旨在填补这一知识空白，通过在相对寒冷、年平均气温约8°C的北部城市日利那进行调查，评估当地蓖子硬蜱的适应情况及其携带病原体的流行病学意义。

材料与方法

本研究在日利那市（北纬49.223442°，东经18.739328°）的五个地点进行蜱虫采集，涵盖了三种城市环境和两种郊区环境，这些地点具有人类活动频繁和适宜蜱-宿主相互作用的特点。采集时间为2024年3月至10月，采用旗帜拖拽法收集，仅采集若虫和成虫。总共收集了264只蓖子硬蜱，包括67只雌性、85只雄性和112只若虫。采集后，使用形态学方法鉴定蜱种。对每只蜱虫进行DNA提取，并使用特定引物的聚合酶链反应(PCR)方法，分别检测伯氏疏螺旋体(Borrelia spp.)、立克次体(Rickettsia spp.)、无形体(Anaplasma spp.)和巴贝斯虫(Babesia spp.)的DNA。阳性PCR产物经纯化后，进行桑格测序以确认病原体物种。

结果

在分析的264只蓖子硬蜱中，总感染情况如下：34.5%的蜱虫检测到伯氏疏螺旋体；2.65%检测到无形体；1.9%检测到巴贝斯虫；0.4%检测到立克次体。此外，在4只蜱虫（1.5%）中检测到由多种病原体引起的混合感染。

具体病原体检测结果包括：

1. 1.
   伯氏疏螺旋体：在91只蜱（34.5%）中检测到其DNA。通过测序鉴定出四种基因型，最常见的是Borrelia afzelii（73只，27.7%），其次是B. garinii（10只，3.8%），B. valaisiana（3只，1.1%）和B. burgdorferi sensu stricto（1只，0.4%）。另有4只蜱（1.5%）检测到伯氏疏螺旋体但无法精确鉴定到种。大多数阳性蜱来自地点5。B. afzelii的优势地位表明与啮齿动物种群作为主要储存宿主密切相关。
2. 2.
   立克次体：仅在1只雄性蜱（0.4%）中检测到Rickettsia spp.的DNA，但因序列质量不足，无法进行可靠的物种水平鉴定。
3. 3.
   无形体：在6只蜱（2.27%）中检测到其DNA，测序均确认为Anaplasma phagocytophilum。阳性蜱存在于雄性、雌性和若虫中，主要来自地点4和地点5。
4. 4.
   巴贝斯虫：在5只蜱（1.9%）中检测到其DNA。测序鉴定出两种人畜共患物种：Babesia microti（3只，1.14%）和Babesia venatorum（2只，0.76%）。阳性样本与来自德国的已知人畜共患分离株具有100%的序列一致性。阳性样本来自地点2、4和5。

讨论

本研究证实，即使在气候条件并不理想的北部城市环境中，日利那的城区和城郊环境也能为蓖子硬蜱的生存和多种人畜共患病原体的传播循环提供合适条件。蜱虫数量在春季（4月、5月）和秋季（9月）出现高峰，符合该物种在温带气候区的典型双峰活动模式。

所观察到的伯氏疏螺旋体流行率（34.5%）高于斯洛伐克许多城市和郊区生境的报告值，但仍处于郊区生境观察到的范围内，并表明城市蜱种群可能维持多种伯氏疏螺旋体基因型的稳定循环。B. afzelii占主导地位，提示啮齿动物是当地城市环境中关键的储存宿主。

立克次体的检出率（0.38%）显著低于欧洲（包括斯洛伐克）大部分地区报告的数据，但其存在仍表明立克次体在城市生态系统中循环，且其中一些物种对人类具有潜在致病性。

无形体(Anaplasma phagocytophilum)的检出率为2.27%，属于斯洛伐克城市和郊区生境报告值中较低的水平，且呈不均匀的空间分布，表明病原体及其储存宿主在城市环境中的分布可能不均。

检测到的人畜共患巴贝斯虫物种（B. microti 和 B. venatorum）具有重要意义，特别是B. microti的基因型与已知的人源分离株完全匹配。尽管流行率较低（1.9%），但这一发现证实了这些寄生虫的生命周期也可以在城市的生物群落中完成。由于人类巴贝斯虫病常表现为非特异性症状或被漏诊，实际流行情况可能被低估，需要进一步系统监测。

结论

研究结果明确表明，城市环境应被视为一个重要且常被低估的、有利于蜱传病原体传播的区域。即使在斯洛伐克北部相对不利的气候条件下，城市环境也能支持蓖子硬蜱的稳定种群，并维持多种人畜共患病原体的传播循环。在日利那市，检测到伯氏疏螺旋体的高流行率（34.5%），以及其他具有临床意义的病原体——无形体(Anaplasma spp.)、立克次体(Rickettsia spp.)以及人畜共患的巴贝斯虫(B. microti 和 B. venatorum)的存在。这对当地居民及其家养和伴侣动物构成了切实的暴露风险。

本研究首次提供了日利那市存在所研究病原体的分子证据，并证实了在城市生态系统中，包括储存宿主和人为因素的作用，进一步研究蜱及其传播病原体动态的重要性。