《Current Research in Parasitology & Vector-Borne Diseases》:Tick-associated microorganisms (
Borrelia,
Rickettsia,
Hepatozoon, and
Hemolivia) in
Amblyomma varanense ticks parasitizing Asian water monitors (
Varanus salvator): Insights from a hotspot in Ratchaburi Province, Western Thailand
编辑推荐:
本刊推荐:为评估泰国西部人-林交错带野生动物(亚洲水巨蜥)寄生蜱所携带微生物的多样性及其潜在公共卫生风险,研究人员在Ratchaburi省Khaozon野生动物繁育中心,对Amblyomma varanense蜱中的微生物(Borrelia、Rickettsia、Hepatozoon、Hemolivia)进行了调查。结果显示,Rickettsia(SFG组)与Borrelia(REP分支)检出率极高,并首次在巨蜥蜱中分子鉴定出Hemolivia。尽管相关菌株尚未报道感染人类,但其与人类致病种亲缘关系密切,凸显了在该界面进行“一体化健康”持续监测的紧迫性。
在全球气候变化与人类活动加剧的背景下,蜱传疾病的威胁日益严峻。以往研究多聚焦于家畜或哺乳动物宿主,然而,作为生态系统重要一环的爬行动物,特别是广泛分布于东南亚的亚洲水巨蜥,不仅是多种蜱类的关键宿主,也可能是未知微生物的“移动仓库”。在泰国,人类居住区与森林交界地带不断重叠,使得以巨蜥为宿主的蜱及其携带的病原体,构成了一个潜在但尚未明确的公共卫生风险界面。为了揭开这个“野生动物-人类”交错地带的微生物面纱,一支研究团队深入泰国西部的热点区域,对寄生在亚洲水巨蜥身上的蜱虫及其携带的微生物群落进行了一次细致的“人口普查”。
这项研究发表在《Current Research in Parasitology》上。研究人员在泰国西部Ratchaburi省的Khaozon野生动物繁育中心,于2024年8月采集了寄生在亚洲水巨蜥身上的30只成年蜱。通过形态学和分子生物学(16S rRNA基因测序)鉴定,确认所有蜱均为Amblyomma varanense。随后,他们利用巢式或半巢式PCR技术,针对蜱体基因组DNA,特异性扩增了多种微生物的标记基因,包括Borrelia的鞭毛蛋白flaB基因、Rickettsia的柠檬酸合成酶gltA基因、Anaplasma的16S rRNA基因,以及血簇虫(haemogregarine,包括Hepatozoon和Hemolivia)的18S rRNA基因。对阳性PCR产物进行测序,并通过BLAST比对和贝叶斯推断法构建系统发育树,分析了所检出微生物的遗传多样性和进化地位。
3.1. 蜱种类鉴定
所有采集的30只成虫(15雄15雌)经形态和分子鉴定均为Amblyomma varanense。其16S rDNA序列与来自泰国南部蟒蛇的A. varanense分离株完全一致,系统发育分析显示它们与来自泰国各地巨蜥和蛇类的A. varanense聚为一支,但与南部省份的某些分离株存在大于3%的遗传差异,提示A. varanense可能是一个包含多个物种或亚种的复合群。
3.2. 蜱相关微生物的分子检测
PCR检测显示,A. varanense蜱中Borreliaspp.阳性率为76.66%(23/30),Rickettsiaspp.为90.00%(27/30),血簇虫为6.66%(2/30)。Anaplasma未检出。混合感染普遍,单一感染、双重感染和三重感染分别占27.58%、68.96%和6.89%。
3.3. 疏螺旋体与立克次体
对Borrelia flaB基因的分析揭示了9个核苷酸序列型,它们均属于爬行动物相关疏螺旋体分支。这些序列型与印度尼西亚茂物发现的巨蜥蜱Borrelia分离株高度相似,系统发育分析将其归入巨蜥相关疏螺旋体谱系的5个推定亚支(A-E)中,其中8个序列型属于亚支A,与茂物的分离株聚在一起;1个序列型属于亚支B,与泰国其他地区的分离株聚类。值得注意的是,这些蜱体内的Borrelia在遗传上不同于先前在同一地点巨蜥血液中检出的菌株。
对Rickettsia gltA基因的分析仅发现3个序列型,它们与马来西亚蟒蛇蜱中发现的未培养Rickettsiasp. S1株(原文为S5,根据正文和图表上下文,此处应为与S5同源)为同一物种。系统发育分析表明,这些立克次体属于斑点热群,并且与人类致病菌Rickettsia monacensis和Rickettsia tamurae亲缘关系密切。
3.4. 肝簇虫与血虫
在两个血簇虫阳性样本中,鉴定出两种不同的18S rDNA序列型。序列型1与来自塞舌尔狼蛇的Hepatozoonsp. 高度相似,被归入Hepatozoon谱系。序列型2则与来自阿尔及利亚陆龟蜱Hyalomma aegyptium的Hemoliviasp. 相似,被归入Hemolivia谱系,但在系统发育树上形成一个独立的分支。这是首次在巨蜥相关的A. varanense蜱中通过分子手段记录到Hemolivia属的存在。
研究结论与意义
本研究首次系统报道了泰国西部Ratchaburi省亚洲水巨蜥寄生蜱Amblyomma varanense中微生物的多样性和高携带率。主要结论包括:1)Rickettsia(斑点热群)和Borrelia(爬行动物相关分支)的检出率极高,表明该地点是这些微生物传播的热点区域。2)蜱体内检出的Borrelia在遗传上不同于同一地点巨蜥血液中的菌株,提示这些蜱可能并非专性寄生巨蜥,其宿主关系可能更为复杂。3)首次在巨蜥相关蜱中分子鉴定出Hemolivia,可能代表一个新种。4)检出的Rickettsia与人类致病种R. monacensis和R. tamurae亲缘关系密切,Borrelia也属于一个独特的爬行动物相关谱系。
讨论部分着重强调了其公共卫生意义。尽管目前尚无爬行动物相关Borrelia和Rickettsia感染人类的病例报道,但这些微生物在蜱中的高流行率,以及它们与已知人类病原体的遗传亲缘性,构成了潜在的溢出风险。随着巨蜥等野生动物日益频繁地出现在人类居住区附近,蜱的宿主转移可能性增加。例如,在澳大利亚已有蜥蜱Amblyomma limbatum寄生人类的报告。因此,在类似Khaozon这样的人类-森林活动频繁的交错界面,开展持续的、基于“一体化健康”理念的监测至关重要。这项研究不仅拓宽了我们对泰国西部蜱媒微生物地理分布的认识,也为评估和管理野生动物相关人畜共患病风险提供了重要的基线数据和科学依据。