在不同实验条件下，为皱叶螺旋白粉虱（Aleurodicus rugioperculatus Martin）的基因表达研究验证合适的参考基因

《International Journal of Tropical Insect Science》：Validation of suitable reference genes for gene expression studies in rugose spiraling whitefly (Aleurodicus rugioperculatus Martin) under various experimental conditions

白粉虱qRT-PCR内参基因稳定性分析首次在皱叶白粉虱中发现，通过14个候选基因在不同生物/非生物条件下的表达评估，筛选出18S rRNA与NADH（发育阶段）、18S rRNA与EF1α（性别/温度）、RPL13与18S rRNA（饥饿）的最佳组合。

摘要

粗糙螺旋白粉虱（Aleurodicus rugioperculatus Martin）是一种危害多种经济作物的入侵性害虫，包括椰子。定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）是基因组研究中一种基本且广泛使用的技术，特别适用于高灵敏度和特异性地分析基因表达水平。影响qRT-PCR结果准确性和可靠性的关键因素之一是内部参考基因（也称为管家基因）的选择。这些基因用于标准化目标基因的表达水平。然而，由于缺乏针对A. rugioperculatus的参考基因验证研究，严重限制了qRT-PCR在基因表达分析中的准确应用。本研究旨在确定该物种在不同生物和非生物条件下的合适参考基因。使用geNorm、NormFinder、BestKeeper、Comparative ΔCT和RefFinder等五种计算程序，分析了14个参考基因（18S rRNA、GST、HSP90、GAPDH、RPS17、actin、RPL13、NADH、ETF-QO、EF1α、UBQ、β-TUB、肽基脯氨酰异构酶A和Myosin L）的表达稳定性。研究结果表明，在A. rugioperculatus中，不同发育阶段的最佳参考基因组合为18S rRNA和NADH；不同性别和温度条件下的最佳组合为18S rRNA和EF1α；而在饥饿条件下的最佳组合为RPL13和18S rRNA。本研究首次报道了可用于A. rugioperculatus qRT-PCR分析的稳定参考基因，为未来的表达研究及基于RNAi的害虫管理奠定了基础。