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本研究首次在子痫前期(PE)患者离体子宫放射动脉中证实，普伐他汀可通过恢复受损的一氧化氮(NO)通路和内皮源性超极化(EDH)机制，包括上调钙激活钾通道(IKCa、BKCa)功能、增加小窝蛋白-1(Cav-1)与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达，并重建肌内皮缝隙连接(MEGJs)，从而逆转PE相关的血管内皮功能障碍，为其临床治疗PE提供了新的实验依据。
本研究旨在评估普伐他汀对子痫前期(Preeclampsia, PE)患者离体子宫放射动脉内皮功能障碍的急性纠正作用及其潜在机制。子宫放射动脉是妊娠子宫最末端的阻力血管，是决定PE血压的主要部位。该研究通过比较正常妊娠(Normotensive, NT)与PE患者来源的动脉功能、蛋白表达与超微结构，探究了内皮依赖性舒张的机制，并重点分析了普伐他汀如何通过调节一氧化氮(Nitric Oxide, NO)和内皮源性超极化(Endothelium-Derived Hyperpolarization, EDH)介导的舒张来改善PE血管功能。
1 引言
子痫前期是导致全球孕产妇、胎儿及新生儿发病和死亡的主要原因之一，其特征包括子宫血管阻力改变和内皮依赖性舒张功能障碍。当前PE的临床管理仅限于控制高血压、凝血障碍和体液紊乱，并进行早期计划分娩，这些方法均不针对疾病根本的病理生理学改变。普伐他汀作为一种3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抑制剂，其降脂外的多效性作用（即非他汀作用）是将其作为PE治疗药物的主要兴趣点。本研究旨在明确NT与PE妊娠中离体子宫放射动脉内皮依赖性舒张的机制，特别是EDH型和NO信号的作用，并阐明急性普伐他汀作用的效果与机制，验证其可通过改变EDH和NO相关血管信号通路来改善PE血管内皮功能障碍的假说。
2 结果
2.1 患者与组织特征
研究纳入了14名NT和10名PE患者。与NT组相比，PE患者首次就诊时体重和体重指数更高，收缩压与舒张压升高，孕周更短，且全部伴有蛋白尿，50%存在胎儿生长受限。婴儿出生体重在PE组显著降低。
2.2 PE、普伐他汀和MβCD对子宫放射动脉内皮功能的影响
血管功能研究表明，与NT妊娠相比，PE患者的子宫放射动脉对缓激肽（内皮依赖性血管舒张剂）诱导的内皮依赖性舒张反应减弱。这种抑制在经普伐他汀（2 mM孵育6小时）孵育的PE动脉中被逆转，恢复至NT水平。另一种膜胆固醇消耗剂甲基-β-环糊精(Methyl-β-cyclodextrin, MβCD; 10 mM孵育1小时)处理则未改善PE动脉的舒张功能，但增加了NT动脉对缓激肽的敏感性。内皮非依赖性舒张剂硝普钠引起的松弛在NT与PE动脉间无差异，且不受普伐他汀或MβCD影响，表明PE中选择性受损的是内皮依赖性机制，而非平滑肌普遍松弛能力。
2.3 一氧化氮与前列腺素途径的作用
药理学抑制剂实验显示，在NT动脉中，抑制一氧化氮合酶(NOS)和可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)或环氧合酶(COX)，能显著降低对缓激肽诱导舒张的敏感性。然而，在PE动脉中，这种抑制作用消失，表明NO和前列腺素介导的动脉松弛能力在PE中丧失。此外，单独抑制NOS和sGC（无血管加压素预收缩时）可引起NT动脉收缩，但PE动脉无此反应，进一步支持了PE中NO信号丢失的观点。普伐他汀孵育恢复了PE动脉中缓激肽诱导的舒张对NO抑制的敏感性。
2.4 内皮源性超极化与钙激活钾通道的作用
在阻断NO和前列腺素作用后，NT和PE动脉中仍有相当部分的内皮依赖性舒张存留，提示EDH的作用。通过选择性通道抑制剂研究发现，在PE动脉中，小电导钙激活钾通道(Small-Conductance Ca2+-Activated K+Channels, SKCa)抑制剂Apamin可消除大部分剩余的缓激肽诱导舒张，而在NT动脉中无此效果。相反，大电导钙激活钾通道(Large-Conductance CaCa-Activated K+Channels, BKCa)抑制剂Paxilline可消除NT动脉中剩余的微小舒张，但对PE动脉无效。这些结果表明，在PE中，内皮依赖性舒张的机制从正常的NO/BKCa主导转变为SKCa主导。
普伐他汀处理则改变了这一模式。在经普伐他汀孵育的PE动脉中，中电导钙激活钾通道(Intermediate-Conductance Ca2+-Activated K+Channels, IKCa)抑制剂TRAM-34可显著减弱舒张反应，随后Apamin无进一步抑制作用，而Paxilline则废除了剩余反应。这表明普伐他汀恢复了IKCa和BKCa在舒张中的贡献。
2.5 内皮信号蛋白的表达与定位
免疫荧光研究揭示了相关蛋白的表达变化与功能数据一致：
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SKCa：在PE动脉内皮细胞中表达量增加约29%，且分布从NT的细胞边界扩散至整个细胞。普伐他汀处理未改变内皮SKCa表达，但使其在平滑肌细胞边界的表达降低约56%。
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IKCa：在PE动脉内皮细胞中表达量降低约88%，呈点状分布于细胞边界。普伐他汀处理使其内皮表达增加约86%。
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小窝蛋白-1(Caveolin-1)：在PE动脉内皮细胞中表达量降低约65%，普伐他汀处理使其表达部分恢复。
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内皮型一氧化氮合酶(Endothelial Nitric Oxide Synthase, eNOS)：在PE动脉内皮细胞中表达量降低约75%。普伐他汀处理使其表达增加，甚至超过NT水平。
2.6 大电导钙激活钾通道的平滑肌表达
BKCa通道由α和β1亚基组成。研究表明，BKCaα亚基在NT和PE动脉平滑肌中的表达无差异。然而，BKCaβ1亚基在NT动脉的内侧（近腔）和外侧（近外膜）平滑肌层呈现差异分布，在PE动脉中，其在内外层的表达均增加，且外侧层的点状表达密度增高。BKCaα和β1在内皮细胞中均未检测到。
2.7 小窝相关蛋白的mRNA表达
实时定量PCR显示，与NT相比，PE动脉中小窝蛋白-1、-2以及Cavin-1、-2的mRNA表达无变化，但平滑肌特异性小窝蛋白-3(Caveolin-3)的mRNA表达增加。
2.8 小窝与肌内皮缝隙 junction 的密度
透射电子显微镜分析显示：
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小窝密度：PE动脉内皮细胞的小窝密度低于NT动脉，且小窝扁平化增加。普伐他汀孵育增加了PE动脉腔面膜和膜下小窝密度，但降低了NT动脉的相应小窝密度。MβCD处理在NT动脉中产生了与普伐他汀类似的小窝耗竭效应，但在PE动脉中却增加了腔面膜下小窝密度。
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肌内皮缝隙连接密度：PE动脉中的肌内皮缝隙连接密度比NT动脉低约64%。普伐他汀处理使PE动脉的肌内皮缝隙连接密度增加至与NT相似的水平。
3 讨论
本研究首次在PE患者的离体子宫放射动脉中证明，急性普伐他汀治疗可通过增强NO合酶活性、增加IKCa/BKCa功能、并恢复肌内皮缝隙连接密度，来纠正受损的内皮依赖性舒张，使其达到甚至超过NT动脉的水平。这些改善作用主要归因于普伐他汀的非降胆固醇多效性。
在NT动脉中，内皮依赖性舒张由SKCa、前列腺素、NO和BKCa共同介导。在PE动脉中，此机制发生改变，表现为NO/COX和BKCa介导的活性丧失，尽管平滑肌BKCa亚基表达上调，同时转变为SKCa主导的舒张。肌内皮缝隙连接密度降低可能限制了EDH向平滑肌的传递。
普伐他汀的作用机制可能是多方面的：恢复eNOS功能、重建小窝微结构、上调IKCa表达以及增加肌内皮缝隙连接密度，从而协调改善EDH和NO信号。值得注意的是，单纯的胆固醇耗竭剂MβCD虽能改变小窝形态，但未能改善PE动脉功能，凸显了普伐他汀多效性作用的关键性。
4 结论
本研究阐明了PE中子宫微血管内皮功能障碍的潜在机制，并揭示了普伐他汀纠正这些功能障碍的急性效应。普伐他汀通过其多效性作用，逆转PE诱导的NO和I/BKCa介导的内皮信号丢失，支持了其作为以血管内皮功能障碍为驱动的PE疾病预防性治疗的潜力。该研究增进了对控制子宫血流和压力、以及胎盘胎儿供血的血管舒张信号机制的理解，及其在疾病中的修饰和潜在纠正方法。
