陈明荣|邹梦婷|Chada Norphanphoun|Nalin N. Wijayawardene|杨在富|王勇
贵州省贵阳市贵州大学农学院植物病理学系，邮编550025，中国
摘要
核桃（Juglans regia L.）是一种具有经济价值的坚果作物，因其优质的木材和富含营养的果仁而受到全球广泛种植。2022-2023年间，中国贵州省德江县的一些核桃果园出现了严重的果斑病。受感染的果实会出现边缘清晰、中心凹陷的深棕色病斑，这些病斑直径可扩大至1.2-1.6厘米，并且经常相互融合，导致病害发生率高达40-50%，造成了巨大的经济损失。从患病组织中分离出了致病菌，并通过形态特征、致病性测试以及对内部转录间隔区（ITS）、β-微管蛋白（tub2）和翻译延伸因子1-α（tef1-α）基因区域的多基因座系统发育分析确定了其身份。最终确认该病原菌为Neopestalotiopsis concentrica。据我们所知，这是首次报道N. concentrica在中国引起核桃果斑病的情况。
引言
Juglans属包含约20种落叶植物，属于核桃科，原产于北美洲和南美洲（Hussain等人，2021年；大英百科全书，2024年）。核桃营养丰富且能量密度高，对健康饮食具有重要意义（Hussain等人，2021年）。中国是核桃的原始栖息地之一，拥有超过2000年的栽培历史，拥有丰富的遗传多样性，是核桃育种的重要种质资源，同时也是全球最大的核桃生产国，产量占全球总产量的一半（Chen等人，2014年；Pei等人，2021年）。然而，作为全球最大的核桃生产国，中国核桃产业正面临因病害感染导致的健康问题和产量下降的挑战（Huai等人，2024年）。
近年来，在中国（Heng等人，2023年；Qi等人，2023年）、印度（Pandey等人，2023年）和泰国（Norphanphoun等人，2019年）发现了大量Neopestalotiopsis属菌株。这些菌株多年来一直被视为植物病原体，导致Camellia sinensis和Eucalyptus等作物的产量下降和经济损失（Darapanit等人，2021年；Shahriar等人，2022年；Pandey等人，2023年）。Neopestalotiopsis属菌株的寄主特异性不强，可以感染多种植物（El-Gali等人，2017年；Darapanit等人，2021年）。这些病原体引起的症状包括果实腐烂、叶枯病、叶斑病、茎腐病、灰霉病、疮痂病和采后腐烂（Feng等人，2014年；Maharachchikumbura等人，2014年；Darapanit等人，2021年）。Neopestalotiopsis属菌株最近被确认为一类新兴的植物病原体，能够对多种重要经济作物和果实造成严重病害，例如Fragaria × ananassa（Baggio等人，2021年）、Psidium guajava（Solarte等人，2018年；Bhogal等人，2022年）、Vitis vinifera（Huanaluek等人，2021年）、Garcinia mangostana（Huanaluek等人，2021年）、Persea americana（Fiorenza等人，2022年）、Vaccinium corymbosum（Santos等人，2022年）、Myrciaria cauliflora（Lin等人，2022年）和Diospyros kaki（Qin等人，2023年）。种植通风良好、排水良好的树木可以降低病害风险。排水不良、树木过于密集的环境更容易发生真菌感染。适当的营养管理和减少压力因素可以提高树木的抗病能力（Lone，2025年）。
2022年和2023年，中国贵州省德江县的主要核桃种植区普遍发生了果斑病。我们在一个面积为10亩（约0.67公顷）的核桃种植园进行了调查，该园内有200棵核桃树。通过随机选取100棵核桃树并统计病果数量与总果数之比，计算出平均病害发生率为40%-50%，造成了显著的经济损失。因此，我们开展了这项研究以确定该病害的致病菌。对分离出的菌株进行形态分子分析后，确认其为Neopestalotiopsis concentrica。此外，我们还进行了致病性测试以验证我们的发现。
研究方法
样品采集与真菌分离
2022年至2023年间，我们在贵州省德江县核桃种植区采集了50个表现出病害症状的核桃果实样本。采样地点的地理坐标为北纬28°12'，东经108°33'。按照Zhang等人（2020年）的研究方法，对受感染的核桃果实表面进行了灭菌处理，以确保培养物不受污染。在显微镜观察下，观察到分生孢子
田间症状
该病害在核桃果实上的初期症状表现为叶绿素缺失，表现为边缘呈深棕色的病斑，中心部分凹陷且颜色也为深棕色。随着病情的发展，这些病斑会发展成坏死区域（图1 A–C）。
系统发育分析
为了确定致病菌，我们利用ITS、tef1-α和tub2基因座构建了系统发育树
讨论
中国是全球最大的核桃生产国，无论是在产量还是种植面积方面均处于领先地位。目前，人们对核桃作物的健康状况和产量越来越关注，主要原因是病原体感染（Huai等人，2024年）。核桃容易受到多种病害的影响，其中炭疽病尤为严重，经常导致产量大幅下降（Watanabe等人，2016年）。此外，Myrmaecium fulvopruinatum等病原体也会对核桃造成危害
作者贡献声明
陈明荣：撰写初稿、进行正式分析、数据管理、概念构思。邹梦婷：项目管理、调查、数据管理。杨在富：撰写、审稿与编辑。王勇：撰写、审稿与编辑、验证、监督、资金筹集。Chada Norphanphoun：撰写初稿。Nalin N. Wijayawardene：撰写、审稿与编辑
未引用参考文献
Ayoubi和Soleimani，2016年；Ayoubi和Soleimani，2016年；El-Gali，2017年；Lawrence等人，2023年；Ronquist等人，2012年；Trifinopoulos等人，2016年。
数据与材料的获取
数据已在文章中呈现。
利益冲突声明
作者声明没有已知的可能影响本文研究的财务利益或个人关系。
数据提供
数据可应要求提供。
资助
本研究得到了以下项目的支持：国家自然科学基金（编号：31972222、31660011）、学科人才引进计划（111计划，D20023）、贵州省科技国际合作基地项目（[2018]5806）、贵州省教育厅项目（[2020]001）以及贵州省科技创新人才团队项目（[2020]5001）。
利益冲突声明
作者声明没有可能影响本文研究的财务利益或个人关系。
