从大戟属植物Euphorbia wallichii的地上部分提取出的具有抗肾纤维化活性的萜类化合物

拉提兰二萜类化合物从Euphorbia wallichii地上部分分离出18个新与已知化合物，结构通过MS、NMR及ECD确认，化合物8抑制肾纤维化可能与Wnt/β-catenin通路有关。

　　

马仁芬|刘凯月|潘银波|张华

济南大学化学与化学工程学院，中国济南250022

摘要

从Euphorbia wallichii的地上部分分离出了十八种lathyrane二萜类化合物，其中包括九种未报道的化合物（1?9）和九种已知的类似物（10?18）。通过详细解析质谱（MS）和核磁共振（NMR）数据确定了这些化合物的结构，并通过比较实验和计算得到的电子圆二色性（ECD）光谱确定了它们的绝对构型。对选定化合物的生物评价显示，它们对RAW264.7巨噬细胞中的NO生成没有显著抑制作用，也没有对MDA-MB-231、A549、MCF-7和HeLa癌细胞系表现出细胞毒性。然而，其中几种化合物对TGF-β1诱导的人类肾小管HK-2细胞中的纤维化生物标志物上调具有显著的抑制作用，化合物8的抗肾纤维化潜力可能与其对Wnt/β-连环蛋白信号通路的抑制作用有关。

引言

作为大戟科（Euphorbiaceae）中的一个主要植物属，Euphorbia由于其丰富的生物活性成分（尤其是二萜类化合物）而一直是植物化学研究的主要焦点（Wang等人，2026；Wu等人，2026；Yang等人，2026）。Euphorbia wallichii Hook. f.是一种特有于青藏高原的药用植物（Pan等人，2006），在中国传统藏医学中用于治疗水肿和皮肤病（Xu等人，2015）。该植物在科学文献中以其多样且丰富的二萜类代谢物而闻名，特别是lathyranes、tiglianes、ent-kauranes、ent-atisanes和ent-abietanes（Kuang等人，2017；Li等人，2021a；Wang等人，2010；Wang等人，2022；Wang等人，2023；Yuan等人，2022；Zhang等人，2024；Zhang等人，2005）。此外，还从该植物中分离出了三萜类、甾体和黄酮类化合物（Gao等人，2025；Yang等人，2015；Yang等人，2025）。在先前报道的二萜类成分中，有些表现出不同的生物活性，例如对INS-1细胞的细胞保护和促增殖作用（Gao等人，2025），对RAW264.7巨噬细胞中LPS诱导的促炎介质释放的抑制作用（Wang等人，2022；Wang等人，2023；Yang等人，2025），以及在PC-12细胞中的神经保护作用（Yuan等人，2022）。

Lathyrane骨架具有5/11/3三环系统，其在Euphorbia物种中的结构多样性主要来源于环系统的不同氧化状态、取代基类型和空间构型（Xu等人，2021）。关于lathyrane二萜类化合物生物合成途径的研究揭示了其结构多样性的分子机制。例如，BAHD家族的酰基转移酶EIBAHD16和EIBAHD35通过区域选择性和供体多样性催化了多种酰基化反应，从而形成了多种大环二萜酯（Zhao等人，2025）。近年来，天然产物研究者发现lathyrane二萜类化合物具有潜在的抗炎作用（Eugenia等人，2019；Ma等人，2025；Xu等人，2012）和在肿瘤细胞中逆转多重耐药性的作用（Yang等人，2020）。尽管已经分离出了大量的lathyrane化合物，但它们的完整结构多样性仍然是一个活跃的研究领域。此外，还需要进一步研究这些二萜类的生物作用机制（Xu等人，2021）。为了进一步探索E. wallichii的药理潜力并丰富其代谢物库，最近对其乙醇提取物进行了深入的植物化学研究，并对分离出的化合物进行了一系列生物评价。在本报告中，将详细介绍lathyrane二萜类化合物的分离、结构鉴定和初步生物评估。

结果与讨论

化合物1（图1）以无色晶体的形式获得，其分子式为C₂₀H₂₈O₄，通过HR-ESIMS分析确定m/z为333.2061（[M + H]⁺，计算值为C₂₀H₂₉O₄⁺，333.2060），表明其具有七个不饱和度（DOU）。其¹H NMR光谱显示了四个甲基（δ_H 0.91, 1.06, 1.79, 1.85）、一个氧亚甲基（δ_H 3.28, 3.31）和两个烯烃（δ_H 5.10, 6.81）质子的特征信号。¹³C NMR光谱显示了20个信号，这些信号归属于四个甲基（δ_C 10.6, 11.4，

结论

从E. wallichii的地上部分分离出了十八种lathyrane二萜类化合物，其中包括九种未报道的化合物（1?9）和九种已知的类似物（10?18）。通过多种光谱方法对其结构进行了全面表征。大多数化合物（1、3、5、6、8和10–18）被评估了其对TGF-β1诱导的HK-2细胞中纤维连接蛋白表达的抑制作用，其中化合物8表现出最强的活性。化合物8可能通过抑制

一般实验程序

NMR实验在Bruker Avance DRX600光谱仪（Bruker BioSpin AG，瑞士Fallanden）上进行，并以残留溶剂峰为参考（CDCl₃：δ_H 7.26, δ_C 77.16；CD₃OD：δ_H 3.31, δ_C 49.00）。ECD和UV光谱在Chirascan光谱仪（Applied Photophysics Ltd.，英国Leatherhead）上获得，使用0.1厘米路径的细胞。HR-ESIMS分析在Agilent 6545 Q-TOF MS仪器（Agilent Technologies Inc.，德国Waldbronn）上进行。具体光学旋转数据

作者贡献声明

张华：撰写 – 审稿与编辑、监督、项目管理、资金获取、数据分析、数据管理。刘凯月：实验研究。潘银波：实验研究。马仁芬：撰写 – 初稿撰写、实验研究、数据分析、概念化

利益冲突声明

所有作者声明没有已知的财务利益冲突或个人关系可能影响本文的研究工作。

致谢

本项目得到了济南大学的财政支持。