从Paratinospora sagittata (Oliv.) Wei Wang的块根中分离出具有肝保护活性的 Clerodane 二萜内酯、生物碱和呋喃衍生物

金odal（Paratinospora sagittata tuberous root）的化学研究鉴定了10种新化合物（1-5,7-10）及1种新天然产物（6），包括2种clerodane二萜（1,2）、6种生物碱（3-8）和2种呋喃衍生物（9,10）。通过光谱分析、电子圆偏振光谱和密度泛函理论计算确认结构，其中化合物3、4在10 μM浓度下显著降低APAP诱导的肝细胞毒性（存活率58.85%和60.14%）。

　　

孙俊华|王宏庆|周占荣|陈若云|董超轩|康杰

中国科学院药物研究所&北京协和医学院天然药物生物活性物质与功能国家重点实验室、多态性药物北京重点实验室，中国北京市延农潭街1号，100050

摘要

通过对Paratinospora sagittata（Oliv.）块根的植物化学研究，分离出了9种此前未描述的化合物（1–5和7–10）以及1种未描述的天然产物（6），其中包括2种克莱罗烷二萜类化合物（1和2）、6种生物碱（3–8）和2种呋喃衍生物（9和10）。这些化合物的结构通过广泛的光谱分析（1D、2D NMR和HRESIMS数据）进行表征，并结合计算与实验得到的电子圆二色性（ECD）数据以及X射线晶体学分析进行了验证，同时还利用密度泛函理论（DFT）计算了¹³C NMR化学位移。其中，两种阿朴啡类生物碱（3和4）在10 μM浓度下显著降低了对人类肝癌细胞系HepG2的细胞毒性，其细胞存活率分别为58.85%和60.14%。

引言

Paratinospora sagittata（Oliv.）属于远志科。该名称是Tinospora sagittata（Oliv.）的同义词，根据分子系统发育、分化时间和形态学证据，魏 Wang于2017年将其更名为P. sagittata（Wang et al., 2017）。其块根在中文中通常被称为“Jinguolan”，首次记载于清代《本草纲目》中，并被收录在《中国药典》中（国家药典委员会，2020年）。P. sagittata广泛分布于中国南部，也在越南北部有发现（http://www.worldfloraonline.org）。长期以来，P. sagittata被传统用于缓解咽喉痛、消除表层感染和止泻（国家药典委员会，2020年）。从Jinguolan中已分离出多种化学成分，包括克莱罗烷二萜类化合物（Choudhary et al., 2010; Zhang et al., 2016）、生物碱（Chang et al., 1984）和木脂素（Huang et al., 2012）。其中，克莱罗烷二萜类化合物是Paratinospora属中含量最丰富的生物活性成分。P. sagittata的块根具有多种药理活性，如抗氧化（Huang et al., 2012）、抗炎（Song et al., 2024; Zhang et al., 2016）、细胞毒性（Jiang et al., 2014; Qin et al., 2015）以及α-葡萄糖苷酶抑制活性（Xu et al., 2021）。

在本研究中，从P. sagittata的块根中分离出了9种此前未描述的化合物（1–5和7–10）以及1种未描述的天然产物（6，见图1）。由于P. sagittata的95%乙醇提取物（100 μg/mL）显著降低了对人类肝癌细胞系HepG2的细胞毒性，因此评估了所有化合物（1–10）的护肝作用。其中，两种阿朴啡类生物碱（3和4）在10 μM浓度下表现出显著的体外护肝效果。进一步的研究有助于阐明其护肝机制。

化合物1–10的结构解析

P. sagittata的干燥块根（33.6公斤）被研磨成粉末，用95%乙醇提取，提取物依次经过硅胶柱色谱分离，再用石油醚、CH₂Cl₂、EtOAc、丙酮和甲醇洗脱，得到5个组分（Frs. A–E）。其中Frs. B（410克）再次经过硅胶柱色谱分离，得到10种化合物（1–10）。这些化合物的结构见图1。

化合物1以无色立方晶体的形式从甲醇中分离出来。

结论

以往的植物化学研究主要集中在P. sagittata中的克莱罗烷二萜类化合物上（Li et al., 2025a; 2025b）。然而，在本研究中，除了克莱罗烷二萜类化合物（1和2）外，还从P. sagittata的干燥块根中分离并鉴定了6种生物碱（3–8）和2种呋喃衍生物（9–10）。

阿朴啡类生物碱表现出多种生物活性，如抗氧化（Wang et al., 2020）、护肝（Subramaniam et al., 2019）等。

实验方法

光学旋转测量使用JASCO P-2000自动数字偏振仪（JASCO，日本东京）进行。ECD光谱使用JASCO J-815光谱仪（JASCO，日本东京）测量。UV光谱在JASCO V-650分光光度计（JASCO，日本东京）的甲醇溶液中收集。FT-IR光谱使用Nicolet 5700光谱仪（Thermo Electron Corporation，美国威斯康星州麦迪逊）进行。NMR光谱使用JNM-ECZ500R/S1光谱仪（JEOL，日本东京）获得。

作者贡献声明

陈若云：指导、概念构思。 王宏庆：撰写初稿、数据管理。 周占荣：验证、实验研究。 孙俊华：撰写初稿、实验研究、数据管理。 董超轩：撰写、审稿与编辑、概念构思。 康杰：撰写、审稿与编辑、指导、资源获取、资金申请、概念构思。

利益冲突声明

作者声明不存在利益冲突。

数据获取

数据可应要求提供。

利益冲突声明

作者声明没有财务利益冲突。

致谢

本工作得到了CAMS医学科学创新基金（CIFMS）（2021-I2M-1-028）的资助。